一次性使用医用高分子产品
初始染菌校正因子的测定操作规程
××××××××公司
1
1、输液（血）器初始染菌数校正因子的测定
1.1内壁校正因子
1.1.1洗脱液的制备：取三套任意规格新制备的样品，在净化操作台上，分别注入15毫升生理盐水，将两端封闭后反复震荡，使盐水在管路内往复运行数十次以上。将冲洗液在无菌的状态下置入事先已经灭菌的具塞三角瓶中，立即盖好备用。
1.1.2营养琼脂培养基的制备：将市售的营养琼脂培养基产品按说明书要求进行配制（称取4.2克，加水100毫升，混匀后在电加热炉上煮开），然后在121℃高压灭菌20分钟，放入55℃左右的水浴中备用。
1.1.3接种：在净化操作台上，用吸管吸取1毫升上述制备的洗脱液注入经过干热灭菌的平皿中，将约10-15毫升已融化的50℃左右的营养琼脂培养基倾注到平皿中，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。同样方法每组洗脱液做12个平行试验，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。
1.1.4培养：待上述培养基冷却凝固后，翻转平皿，使低面朝上，置于30-35℃恒温箱中培养48小时。
1.1.5菌落计数：记录各皿碟中的菌落数，取平均值，然后再乘以洗脱液总体积（毫升）数，即得到洗脱液中的全部菌落数。
重复1.1.1-1.1.5步，分别进行第二次、第三次、第四次洗脱，收集各次洗脱菌落数，填入数据表中。
1.1.6内壁校正因子的计算：用第一次洗脱液得到的菌落数除以四次洗脱得到的总菌落数，得到第一次冲洗去除率，去除率的倒数即为内壁校正因子。
1.2、外壁校正因子
1.2.1洗脱液的制备：在净化操作台上，用灭菌的脱脂棉蘸30毫升生理盐水反复擦拭样品的外表面，然后将擦拭液和脱脂棉一并收集到无菌的具塞三角瓶中，立即盖好备用。
重复上述1.1.2-1.1.6操作。即得到外壁校正因子。
1.3、琼脂覆盖：在净化操作台上，将上述经过4次内壁外壁冲洗后的样品选取管路中间部分剪成6cm剖面段，任取两段置入皿碟中，将25-30毫升50℃左右的营养琼脂培养基注入皿碟，覆盖在样品上，立即盖好。冷却后倒置，放入培养箱中培养，48小时后计数，每套样品做2个平行样，取平均数，乘以样品总长度（cm），再除以6，即得到全部样品的总琼脂覆盖菌落数。
2
表1输血器校正因子测定数据表
测定项目 第一次洗脱 第二次洗脱 第三次洗脱 第四次洗脱 琼脂覆盖 第一次洗脱去除率%
平均去除率
校正因子
内壁：
外壁：
表2输液器校正因子测定数据表
测定项目 第一次洗脱 第二次洗脱 第三次洗脱 第四次洗脱 琼脂覆盖 第一次洗脱去除率%
平均去除率
校正因子
内壁
外壁：
检验： 复核： 日期：2006/1/14
2、穿刺针初始染菌数校正因子的测定
2.1内壁校正因子
3
2.1.1洗脱液的制备：选取1个批次新制备的穿刺针样品15套，分成三份，每份5套为一组样品。在净化操作台上，每组产品分别注入15毫升生理盐水，将两端封闭后反复震荡，使盐水在管路内往复运行数十次以上，然后将冲洗液置入事先已经灭菌的具塞三角瓶中，立即盖好备用。 2.1.2营养琼脂培养基的制备：将市售的营养琼脂培养基产品按说明书要求进行配制（称取4.2克，加水100毫升，混匀后在电加热炉上煮开），然后在121℃高压灭菌20分钟，放入55℃左右的水浴中备用。
2.1.3接种：在净化操作台上，用吸管吸取1毫升上述制备的洗脱液注入经过干热灭菌的平皿中，将约10-15毫升已融化的50℃左右的营养琼脂培养基倾注到平皿中，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。同样方法每组洗脱液做12个平行试验，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。
2.1.4培养：待上述培养基冷却凝固后，翻转平皿，使低面朝上，置于30-35℃恒温箱中培养48小时。
2.1.5菌落计数：记录各皿碟中的菌落数，取平均值，然后再乘以洗脱液总体积（毫升）数，即得到洗脱液中的全部菌落数。
重复2.1.1-2.1.5步，分别进行第二次、第三次、第四次洗脱，收集各次洗脱菌落数，填入数据表中。
2.1.6内壁校正因子的计算：用第一次洗脱液得到的菌落数除以四次洗脱得到的总菌落数，得到第一次冲洗去除率，去除率的倒数即为内壁校正因子。
2.2、外壁校正因子
2.2.1洗脱液的制备：在净化操作台上，用灭菌的脱脂棉蘸30毫升生理盐水反复擦拭每组样品的外表面，然后将擦拭液和脱脂棉一并收集到无菌的具塞三角瓶中，立即盖好备用。
重复上述2.1.2-2.1.6操作。即得到外壁校正因子。
2.3、琼脂覆盖：在净化操作台上，将上述经过4次内壁外壁冲洗后的穿刺针样品选取管路中间部分剪成6cm剖面段，任取两段置入皿碟中，将25-30毫升50℃左右的营养琼脂培养基注入皿碟，覆盖在样品上，立即盖好。冷却后倒置，放入培养箱中培养，48小时后计数，每套样品做2个平行样，取平均数，乘以样品总长度（cm），再除以6，即得到全部样品的总琼脂覆盖菌落数。 测定结果详见表3。
表3穿刺针校正因子测定数据表
4
测定项目
第一次洗脱
第二次洗脱
第三次洗脱
第四次洗脱 琼脂覆盖 第一次洗脱去除率%
平均去除率 校正因子
内壁： 外壁：
内壁：
外壁：
检验： 复核： 日期：2006/1/4
3、 头皮针、采血针初始染菌数校正因子的测定
3.1内壁校正因子
3.1.1洗脱液的制备：选取三个批次的样品，每个批次各选10套（采血针20套）样品，在净化操作台上，去掉针套同时插在密闭的生理盐水瓶盖上，用力挤压，将挤出液收集到已事先灭菌的具塞三角瓶中，每批产品共收集15毫升洗脱液，立即盖好备用。
5
3.1.2营养琼脂培养基的制备：将市售的营养琼脂培养基产品按说明书要求进行配制（称取4.2克，加水100毫升，混匀后在电加热炉上煮开），然后在121℃高压灭菌20分钟，放入55℃左右的水浴中备用。
3.1.3接种：在净化操作台上，用吸管吸取1毫升上述制备的洗脱液注入经过干热灭菌的平皿中，将约10-15毫升已融化的50℃左右的营养琼脂培养基倾注到平皿中，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。同样方法每组洗脱液做12个平行试验，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。
3.1.4培养：待上述培养基冷却凝固后，翻转平皿，使低面朝上，置于30-35℃恒温箱中培养48小时。
3.1.5菌落计数：记录各皿碟中的菌落数，取平均值，然后再乘以洗脱液总体积（毫升）数，即得到洗脱液中的全部菌落数。
重复3.1.1-3.1.5步，分别进行第二次、第三次、第四次洗脱，收集各次洗脱菌落数，填入数据表中。
3.1.6内壁校正因子的计算：用第一次洗脱液得到的菌落数除以四次洗脱得到的总菌落数，得到第一次冲洗去除率，去除率的倒数即为内壁校正因子。
3.2、外壁校正因子
3.2.1洗脱液的制备：在净化操作台上，用灭菌的脱脂棉蘸30毫升生理盐水反复擦拭每组样品的外表面，然后将擦拭液和脱脂棉一并收集到无菌的具塞三角瓶中，立即盖好备用。
重复上述3.1.2-3.1.6操作。即得到外壁初始染菌数的校正因子。
3.3、琼脂覆盖：在净化操作台上，将上述经过4次内壁外壁冲洗后的样品选取管路中间部分剪成6cm剖面段，任取两段置入皿碟中，将10-15毫升50℃左右的营养琼脂培养基注入皿碟，覆盖在样品上，立即盖好。冷却后倒置，放入培养箱中培养，48小时后计数，每批样品做2个平行样，取平均数，乘以样品总长度（cm），再除以6，即得到全部样品的总琼脂覆盖菌落数。
表4头皮针校正因子测定数据表
测定项目 第一次洗脱 第二次洗脱 第三次洗脱 第四次洗脱
6
琼脂覆盖 第一次洗脱去除率%
平均去除率
校正因子
内壁： 外壁：
内壁：
外壁：
表5采血针校正因子测定数据表
测定项目 第一次冲洗 第二次冲洗 第三次冲洗 第四次冲洗 琼脂覆盖 第一次冲洗去除率%
平均去除率
校正因子
内壁： 外壁：
内壁：
外壁：
检验： 复核： 日期：2006/1/6
4、管类产品初始染菌数校正因子的测定
4.1 洗脱液的制备：选取三套新制备的样品，在净化操作台上，将每套样品用无菌的剪刀（导丝用玫瑰剪）剪成大约1厘米长的段，放入事先灭菌的具塞三角瓶中，加15-50毫升（可根据样品本身的大小确定）生理盐水，加塞，充分震荡，使样品的内壁、外壁得到充分的洗脱，然后将冲洗液转移到另一个无菌的具塞三角瓶中，立即盖好备用。 4.2营养琼脂培养基的制备：将市售的营养琼脂培养基产品按说明书要求进行配制（称取4.2克，加水100毫升，混匀后在电加热炉上煮开），然后在121℃高压灭菌20分钟，放入55℃左右的水浴中备用。
4.3接种：在净化操作台上，用吸管吸取1毫升上述制备的洗脱液注入经过干热灭菌的平皿中，将约10-15毫升已融化的50℃左右的营养琼脂培养基倾注到平皿中，并立即旋摇平皿，使水样与培养基充分混匀。同样方法每组洗脱液做12个平行试验，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。
7
4.4培养：待上述培养基冷却凝固后，翻转平皿，使低面朝上，置于30-35℃恒温箱中培养48小时。
4.5菌落计数：记录各皿碟中的菌落数，取平均值，然后再乘以洗脱液总体积（毫升）数，即得到洗脱液中的全部菌落数。
重复4.1-4.5步，分别进行第二次、第三次、第四次冲洗，将各次洗脱液中的菌落数填入数据表中。
4.6校正因子的计算：用第一次洗脱液得到的菌落数除以四次洗脱得到的总菌落数，得到第一次冲洗去除率，取三套样品的第一次冲洗去除率的平均值，平均值的倒数即为校正因子。
表6辅助导管校正因子测定数据表
测定项目 第一次洗脱 第二次洗脱 第三次洗脱 第四次洗脱 琼脂覆盖 第一次洗脱去除率%
平均去除率
校正因子
%
表7冲洗器校正因子测定数据表
测定项目
第一次洗脱 第二次洗脱 第三次洗脱 第四次洗脱 琼脂覆盖 第一次洗脱去除率%
平均去除率
校正因子
%
检验： 复核： 日期：2006/1/11
8
因篇幅问题不能全部显示，请点此查看更多更全内容