LC-MS在药物分析中的应用

LC-MS 在药物分析中的应用与进展

摘要：

液相色谱-质谱联用技术结合了色谱、质谱两者的优点,将色谱的高分离性能和质谱的高鉴别特点相结合,组成了较完美的现代分析技术［1］。随着液相色谱-质谱接口技术的不断完善,液质联用技术将在药物分析中占据越来越重要的地位。本文主要介绍近年来液相色谱-质谱/串联质谱联用技术等在药物分析中的应用,包括体内药物分析，天然药物分析，水果蔬菜等农产品药物残留的分析等研究领域，展示了它的发展前景。

关键词：LC-MS；体内药物分析；天然药物分析；农药残留

正文：

1.LC-MS在体内药物分析的应用与进展

体内药物分析即药物在体内代谢过程中质和量的变化，包括药物分子在生物系统内的吸收，分布，代谢和排泄（ADME）。这些因素决定了药物在体内能否以适当的浓度到达目标位置，并停留一定时间，从而使药物的疗效得以发挥。这就需要一项分析技术对药物在体内的变化进行精确的分析，HPLC-MS的成功联用，显著地扩展了质谱在药物代谢和药代动力学中的应用范围。目前，液质联用技术已成为体内药物分析的核心分析技术。

申颖，庄笑梅等［2］建立LC/MS/MS方法,定量检测家兔血浆和房水中咪哒酚衍生物浓度,并用于家兔给予咪哒酚衍生物滴眼后血浆及房水中药代动力学研究。采用电喷雾离子化电离源(ESI),选择反应离子监测(SRM)方式进行正离子检测,该方法快速、准确、灵敏度高,

专属性好,可用于咪哒酚衍生物在家兔体内的药物代谢动力学研究。

Rafaela Martin & Jennifer Schürenkamp &Heidi Pfeiffer & Helga Köhler［3］运用液体色谱与串联质谱定量的方法对血浆中二甲-4-羟色胺进行定量分析，样品在进行固相萃取时使用抗坏血酸和氮气进行保护，二甲-4-羟色胺的稳定性在血液储存在不同的温度在各个时期时间进行了实验研究，样品室温下储存显示分析物的不断减少导致的损失一个星期后约90%，储存在冰箱里得到改善样品稳定性显著。

2. 在中药指纹图谱研究的应用

中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图，它是一种综合的，可量化的鉴定手段。中药成分复杂，其中含有大量的次生代谢产物，因此分离提纯难度大。目前中药质量控制主要是对一些主要成分或特征性成分进行定性鉴别及含量测定，但大量研究表明，中药的药效是多成分共同作用的结果，而并非只是某几个“指标成分”或“主要成分”在起作用。中药指纹图谱技可对中药进行成分分析，为中药质量控制的提供依据。液质联用技术对样品不需要进行繁琐和复杂的前处理，可对已知成分进行定性定量分析，在对未知成分的研究中，质谱检测器可以提供大量的结构信息，结合已知结构化合物的裂解规律，或结合其他方法，即可对未知成分进行定性或定量。

陶敬奇，闻莹莹等［4］建立了高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-ESI-MSn)法确定五指毛桃指纹图谱的方法.采用C18柱,水(A)-甲醇(B)溶液为流动相,梯度程序洗脱.4个产地的五指毛桃样品分离得到16个共有峰,通过质谱鉴定出10种成分,通过样品共有峰含量及特征峰,以评价不同产地五指毛桃的优劣,并为五指毛桃药材的质量控制标准提供参考.

Juanjuan Zhao, Xiao Han［5］等通过对液体色谱-质谱联技术的开发和验证,同时测定吴茱萸中去氢吴茱萸碱和柠檬苦素在大鼠血浆的浓度。 血浆样品用乙酸乙酯进行液液萃取，分离采用阿波罗C18柱 (250毫米×4.6毫米,5μm),以甲醇- 0.01%盐酸水(60:40,v / v)为流动相,运行时间为12.0分钟。质谱采用选择离子监测(SIM)的模式与正离子的喷雾电离。线性范围去氢吴茱萸碱是1.0-500ng mL−1 柠檬苦素是2.0–1,000 ng mL−1，定量限的范围分别是1.0和2.0纳克。 日内和日间精度分别为6.0%和10.9%,此方法成功地应用于药物代谢动力学的研究,大鼠分别口服服用去氢吴茱萸碱，柠檬苦素，吴茱萸果实的水浸液。结果表明水浸液相对于单一单体，经口服给药，在药代动力学方面有明显的差异。

3. 食品及农产品中农药、兽药残留含量甚微，往往需要进行痕量分析，对灵敏度、重现性与选择性的要求非常高，需要在复杂的基质中检测ppb 级甚至更低浓度水平的痕量残留物质。这就需要良好的样品前处理手段来净化复杂的食品及农产本底，浓缩目标组分，而且需要选择高性能、高灵敏度的分析系统进行检测分析[12]。液质联用技术特别适合于痕量分析，可以鉴别和测定各种类型的农药、兽药以及生物毒素等残留物，如动物组织(肌肉、脂肪、肝、肾)中磺胺类、硝基咪唑类、喹诺酮类药物，水样中的除草剂、杀虫剂等

田宏哲，赵瑛博［6］等建立了同时测定牛奶中6 种氨基甲酸酯类农药残留量的方法，样品经乙腈提取，Oasis HLB固相萃取柱净化后，采用高效液相色谱- 离子阱质谱(HPLC-ESI-MS/MS)进行测定，测定条件为：C18 色谱柱分离，甲醇-0.02mol/L醋酸铵溶液梯度洗脱，多反应监测模式检测。结果表明，6 种杀虫剂的定量限为1.0～10.0μg/kg，平均添加回收率为79.21%～91.38%，相对标准偏差为3.44%～5.71%。本实验所建立的6 种杀虫剂的测定方法完全可以满足当前农药残留分析的要求。

Monica Scordino · Leonardo Sabatino · Pasqualino Traulo · Giacomo Gagliano［7］ 开发了一个分析方法主要检测柑橘类水果表面的双胍盐类,其目的是控制进

口水果的国家使用这种禁用杀菌剂的含量。双胍盐是一混合物包括GN, GG, GNG, GGN, GGG, GGGN and GGGG。内部标准采用高效液相色谱法分离，采用C18柱和亲水性end-capped Aquasil。检测采用ESI/MS/MS母离子扫描、正离子模式。使用1%HCOOH /丙酮(1:2 v / v) 对柑橘皮进行提取。统计分析方法验证了主要三个化学成分（GG,GGN和GGG)超过65%的总含量。回归线从0.100到3.750毫克/升,显示r 2 > 0.990。其相对标准偏差范围从2到8%(n = 6)。极限的检测均低于0.0050毫克/公斤,而限制的量化没有超过0.0065毫克/公斤。该方法成功地应用于2007年夏77例从意大利市场收集的柑橘类水果的检测。结果表明,64%的被调查的柑橘样本含有双胍盐残留且超过界限值0.010毫克/公斤,这也解释了当年的柑橘类水果为什么如此丰收。

参考文献：

［1］《分析化学》李发美 人民卫生出版社 第六版

［2］申颖; 庄笑梅; 张振清; 付守廷; 张志伟; 王娟;LC/MS/MS法测定家兔血 浆和房水中咪哒酚衍生物含量及其药代动力学研究 军事医学科学院［J］.2010,(05).

检索方法：

数据库：中国知网，检索词：LC-MS并含体内药物

［3］Rafaela Martin & Jennifer Schürenkamp &Heidi Pfeiffer & Helga Köhler A validated method for quantitation of psilocin in plasma by LC–MS/MS and study of stability ［J］ Int J Legal MedDOI 10.1007/s00414-011-0652-8（2011）

检索方法：

数据库：springerlink 检索词：LC-MS

［4］陶敬奇; 闻莹莹; 王辉; 王三永; 陈洪伟; 五指毛桃指纹图谱的高效液相色谱-质谱联用研究 华南师范大学学报（自然科学版）［J］，2011，（02）.

检索方法：

数据库：中国知网 高级检索主题词是LC-MS并含中药

时间限制2010.12.31至今天

［5］Juanjuan Zhao, Xiao Han, Xu Zhao, Chao Wang, Qing Li, Xiaohui Chen and Kaishun Bi A sensitive liquid chromatographic–mass spectrometric method for simultaneous determination of dehydroevodiamine and limonin from Evodia rutaecarpa in rat plasma Analytical and Bioanalytical Chemistry ［J］2011，（05Volume 401, Number 1, 289-296, DOI: 10.1007/s00216-011-5072-6 2011）

检索方法：

数据库：springerlink

时间限制：2011年 ，关键词LC-MS and traditional Chinese medicine

［6］田宏哲; 赵瑛博; 周艳明; 高效液相色谱-质谱法测定牛奶中6种氨基甲酸酯农药

残留 食品科学［J］2011, Vol. 32, No. 02

检索方法：

数据库：中国知网

主题词：LC-MS并含农药残留

［7］Monica Scordino · Leonardo Sabatino · Pasqualino Traulo · Giacomo Gagliano ·Maria Gargano · Valentina Pantò · Grazia Laura GambinoLC/MS/MS detection of fungicide guazatine residues for quality assessment of commercial citrus fruit［J］European Food Research and Technology, 2008, Volume 227, Number 5, Pages 1339-1347

检索方法：关键词pesticide residue and LC-MS 数据库：springerlink

课程学习心得：通过本课程的学习，使自己加深了对ppt的了解，更加重视ppt，因为在以后的学习和工作中，ppt都将会是一种普遍的宣讲方式，使别人了解自己的想法，希望自己能将ppt做的熟练些。学会同学之间的合作，这样才可以接触更多的知识，学习到不同的思维方式。

液质联用已日臻成熟，对于一篇综述，写了这方面的内容，可能不是很新鲜了，可是液质联用技术，并竟是一项成熟且应用广泛的分析技术，会在以后的实验和工作中经常用到，借此机会多看一些这方面的文献，了解其最新动态，在以后的实验和工作中就可以更好地适应与开展工作。