影响酶促反应速度的因素生化实验

【目的】

观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。 【原理】

唾液淀粉酶催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。

在不同温度，不同PH值下，唾液淀粉酶活性不同，催化淀粉水解程度不一，生成的产物也就不同。此外，激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性，影响淀粉的水解。因此可根据在不同反应条件下，溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度，从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。

淀粉 I2 呈蓝色 淀粉酶 糊精 I2蓝色、紫色、红色 淀粉酶麦芽糖+葡萄糖 I2 无色? 【操作】

1. 温度对酶促反应速度的影响 取3支试管，编号，按下表操作：

试管号1 加入物（滴） pH6.8缓冲液 1%淀粉溶液 稀释唾液 碘液 现象 20 10 置37℃水浴5分钟 5 置37℃水浴10分钟 1 20 10 置沸水浴5分钟 5 置沸水浴10分钟 1 20 10 置冰水浴5分钟 5 置冰水浴10分钟 1 2 3 2. PH对酶促反应速度的影响 取3支试管，编号，按下表操作：

试管号1 加入物（滴） pH3.0缓冲液 pH6.8缓冲液 pH8.0缓冲液 20 － － － 20 － － － 20 2 3 1%淀粉溶液 稀释唾液 10 5 10 5 10 5 摇匀，置37℃水浴保温，每隔1分钟从2号管中吸取1滴反应液于白瓷板上，加碘液1滴检查反应进行情况，直至反应液不与碘液反应时，向各管各加入1滴碘液，摇匀，观察并记录颜色变化。 现象 3．激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响 取4支试管，编号，按下表操作：

试管号 1 加入物（滴） 1%淀粉溶液 pH6.8缓冲液 1% NaCl溶液 1% CuSO4溶液 1%Na2SO4 蒸馏水 稀释唾液 10 20 － － － 10 5 10 20 10 － － 5 10 20 － 10 － 5 10 20 10 5 2 3 4 混匀，置37℃水浴中保温10分钟，取出，各管加入碘液各1滴，观察并记录颜色变化。 现象 【结果及分析】

观察各管颜色变化，说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。

【实验注意事项】