医院检验中心过敏原检测操作规程

QD过敏原检测原理：

当具有过敏抗原固化于表面的载体与病人血清培养在一起后，血清中特异性IgE（一抗）就会特异地结合到抗原上，此特异结合的抗体可被酶联的二抗所识别，加入显色剂后，二抗所联的酶使显色剂由橘黄色变成蓝色。显色的深度与血清中特异性IgE成正比；能定性/半定量地检测血清中特异性IgE的浓度。 一、检测盒组成

1． QD过敏原检测板：5支，每支检测板中的各个无

色检测片段之间均有白色隔离片段分开，在这些无色检测片上，分别结合了各种不同过敏原。例如：猫狗毛皮屑，螨虫，屋尘，霉菌，各种花草树，鱼虾蟹，牛奶，蛋，肉类，花生大豆小麦等。其中二片分别为阳性和阴性对照反应片，用以鉴定最终结果的可靠性。

2． QD洗涤缓冲液（试剂1）：一瓶，60毫升，白

色大瓶。

3． QD酶联抗体（试剂2）一瓶，4毫升，红色。 4． QD显色剂（试剂3）：五瓶，2.5毫升/瓶，橘

黄色（如发现本试剂呈浅兰色，应弃去，不能使用）。

5． 1毫升一次性注射器：5支；与检测板末端连接，

用于吸入血清、试剂和清洗剂。

6． 10毫升一次性塑料杯：5只；用于清洗操作过程

分装清洗剂。 7． 说明书一份。

本盒未提供大所需材料：自来水及水槽，吸水纸或纱布，定时钟。 二、操作步骤

操作前准备：（1）按常规获得1毫升病人的血清。（2）测试前把所有试剂和检测板平衡到室温（20-25℃）.(3)操作时戴上橡胶手套。

1． 除去检测板两端密封塞，装上1ml注射器，推出

管内液体，然后将病人血清吸入检测板，如发现检测板有气泡，排出后重吸，

在室温下培养100分钟200分钟。

2． 推出检测板内血样，拉出注射器推杆，用1号试

剂（白色大瓶）灌满注射器，任试剂流尽，装入注射器推杆，用自来水冲洗检测板尖端并用纱布或吸水纸擦干尖端。

3． 吸入二号试剂（红色），检查无气泡，在室温下

培养100分钟-200分钟。

4． 用注射器推出检测板内试剂，拉出注射器推杆，

用1号试剂灌满注射器，任试剂流尽（步骤1）。装入注射器推杆，将少量1号试剂装入小塑料

杯，用注射器将其吸入检测板后，拉出注射器推杆，任试剂流尽（步骤2）。重复洗涤步骤1和2一次后，再用1号试剂灌满注射，任其流尽。（共洗五次！）装入注射器推杆，用自来水冲洗检测板尖端并用纱布或吸水纸擦干尖端。 5． 吸入三号试剂（橘黄色），检查无气泡在室温下

培养30分钟后观测结果。

试剂盒储存及注意事项

1． 本试剂盒应保存在2-8℃，仅供体外检测用。失

效期后的产品请勿使用。

2． 试剂盒使用前，从冷藏环境中取出，应先置室温

平衡后方可使用。

3． 检测板不能重复使用，也不能供一个以上的样品

同时使用。

4． 所有操作均应按照本说明书的步骤进行，固相酶

联反应中抗原抗体反应是不可逆的，要严格注意加样顺序，不能颠倒。

5． 在检测操作过程有3次加样步骤，即加标本（血

清），加酶联抗体，加显色剂，每次加样均用与检测板相连接的1毫升注射器平稳吸入，一般加样至注射器接口，加入标本或酶联抗体后应仔细检查，如发现在检测片段表面有气泡，应将试剂排回试剂瓶后直接重新加样。

6． 检测过程靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶

标记物目的，通过洗涤以清除残留在检测板中的没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中吸附于固相载体的干扰物质（蛋白质等），洗涤是检测操作的关键步骤，为防止因清除不彻底导致游离酶残留在管内，而造成非特异性显色，操作者应严格按要求洗涤。