课程名称(中文) 医学微生物学实验
课程名称(英文) Experiments of Medical Microbiology 课程编号 50101164 课程性质 非独立设课 课程属性 基础课
教材及实验指导书名称 《医学微生物学实验指导》 学时学分: 总学时72总学分4实验学时 30实验学分 开出时间： 二 年级 四 学期
适用专业 5年制临床、视光、麻醉、影像、法医、口腔、预防本科 先修课程 细胞生物学、组织胚胎学、生理学、生物化学、免疫学
一、 课程简介及基本要求
医学微生物学是研究病原微生物的形态、结构、生命活动规律以及与机体相互关系的一门学科，是基础医学中的一门重要学科。为学习临床各科的感染性疾病、传染病、超敏反应性疾病和肿瘤等奠定重要的理论基础；同时，也可运用所学的知识直接为控制和消灭感染性疾病、保障人民健康服务。课程学习要求掌握各种重要致病微生物的生物学特性，致病性和免疫性，微生物学检查方法和防治原则等内容，课程包括医学微生物学理论和实验两部分内容。
二、课程实验目的要求
医学微生物学实验是医学微生物学课程的重要组成部分，是医学各专业学生的必修基础课程。医学微生物学实验的形式可分为教师示教（包括多媒体、电视教学录像）和学生操作两种。《医学微生物学实验》开设实验项目41个，其中基础实验（含基本操作）32个，技能训练实验6个，综合性实验3个。实验总学时30学时。其目的在于通过实验，使学生巩固和加深所学的理论知识，掌握必要的微生物学基本技术，培养独立观察、思考和分析、解决问题的能力，为今后的医学实践打下一定的基础。
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三、适用专业
5年制临床、视光、麻醉、影像、法医、口腔、检验、预防本科
四、主要仪器设备
普通显微镜，倒置光学显微镜，暗视野显微镜，荧光显微镜，恒温温箱，恒温水浴箱，普通冰箱，生物安全柜或超净台，高压蒸汽灭菌器，过滤器。
五、实验方式和要求
1． 预习 学生在课前应按照实验课程进度表的安排预习实验指导以及教材
有关章节，对该次实验的目的要求、实验内容、基本原理和操作方法有一定的了解。
2． 讲解 教师对该实验内容的安排及注意事项进行讲解，让学生有充分的时
间按实验指导的要求进行独立操作与观察。
3． 独立操作与观察 实验一般4人一组共用一些试剂、材料，一些示教标本
必须以实验小班为单位统一组织观察，学生必须个人独立操作和观察。 在实验中要按实验指导认真操作，仔细观察，做好记录。
4． 课堂指导 实验过程中，教师密切注意学生实验过程，随时接受学生的询
问，帮助学生在有限的课堂时间内迅速掌握相关实验技能，对实验中出现的疑难问题予以解答和指导。
5． 作业 实验报告必须强调科学性，实事求是地记录、分析、综合。在实验
课后呈交。 学生应认真阅读教师批改后的实验报告，不断提高实验质量。
六、实验室规则及注意事项
医学微生物学实验的对象是致病微生物，有传染的危险性。因此，进入实验室及实验过程中必须提高警惕性，严格遵守下列规则，以防招致感染或将病原微生物传给他人。
1． 进入实验室必须穿工作衣（白大衣），不必需的物品勿携入室内。 2． 实验室内应保持安静和良好秩序，实验时要严肃认真。 3． 实验室内严禁吸烟和饮食。
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4． 如有传染性材料污染桌、凳、地面、书或衣物等，应报告老师，并用2%来苏水处理半小时，然后洗净。
5． 如有传染性材料污染手上，应将手浸泡在0.05%-0.1%新洁尔灭中5-10分钟，然后用自来水冲洗。
6． 用过的沾有传染性材料的吸管、毛细吸管、玻片等要放入来苏缸内。
7． 实验过程中，必须爱护仪器及节约材料。如有破损应报告老师，并在登记本上登记。
8． 实验完毕，需孵育的培养物放入指定的温箱，待废弃的培养物则集中送至指定地点，统一消毒处理。桌面用来苏水清拭。
9． 离开实验室前，用0.05%-0.1%新洁尔灭浸手，并用肥皂洗手，
脱去工作衣并反摺好。关好水、电、门窗，方可离开实验室。
七、考核与报告
每次实验课都将布置相关作业，并要求学生课后完成后统一上交到带教老师评阅批改。实验课的表现和作业情况将以平时成绩的方式纳入“医学微生物学”课程总成绩。
八、实验项目设置和内容
序号 实验项目 内容提要 实验学时 每组人数 实验者类别 七年制 1 1 五年制 四年制 七年制 五年制 10分钟 1 四年制 必做 开出要求 结果示教，必做 结果示教，必做 结果示教，必做 必做 必做 1 细菌的形态与结熟悉细菌的基本形态与特殊构的观察 结构 Observation of bacterial morphology and structure 显微镜油镜的使熟悉显微镜油镜的使用原理用与保护 和正确的使用方法 The usage and protection of microscopic oil lens 革兰染色法 熟悉细菌涂片的制备，掌握2 3 1 1 七年制 必做 3
Gram’s stain 革兰染色法及其意义 五年制 四年制 必做 必做 必做 必做 必做 结果示教，必做 结果示教，必做 选做 结果示教，必做 结果示教，必做 选做 结果示教，必做 结果示教，必做 选做 结果+操作示教，必做 结果示教，必做 选做 实物示教，必做 实物示教，必做 选做 实物示教，必做 实物示教，必做 选做 结果+操作示教，必做 结果示教，必做 4 细菌接种法 熟悉细菌接种工具，掌握平The inoculation 板划线接种法的技术要领 of bacteria 溶菌酶试验 Lysozyme test 了解溶菌酶的溶菌现象及其杀菌机制 七年制 1 1 五年制 四年制 七年制 1 1 五年制 四年制 5 吞噬作用试验 了解吞噬细胞的吞噬作用 Phagocytosis test 6 七年制 30分钟 3～5 五年制 四年制 7 外毒素的毒性作1．观察破伤风外毒素对小白用及其抗毒素的鼠的毒性作用。 中和作用 2．了解小白鼠的肌肉注射和Toxic effect of 腹腔注射的操作方法。 exotoxin and neutralization by antitoxin 七年制 30分钟 五年制 3～5 四年制 8 紫外线杀菌试验 1．观察紫外线杀菌作用及其Sterilization by 特征。 UV 2．掌握紫外线杀菌的原理。 50分钟 3．熟悉紫外线杀菌的应用范围。 高压蒸汽灭菌法 掌握高压蒸汽灭菌法的原理Autoclaving 和使用方法。 七年制 3～5 五年制 四年制 七年制 9A 30分钟 3～5 五年制 四年制 9B 滤过除菌法 Filtration sterilization 掌握滤过除菌法的原理和使用方法。 七年制 30分钟 3～5 五年制 四年制 10 噬菌体的特异性了解噬菌体对宿主菌的特异溶菌作用 溶菌现象。 Special bacteriolysis of 4
40分钟 七年制 3～5 五年制
bacteriophage 细菌接合试验 Bacterial conjugation test 1．掌握耐药质粒在耐药性变异发生中的作用。 2．掌握细菌耐药质粒传递的机理。 四年制 七年制 2.5小时 3～5 五年制 四年制 结果示教，必做 结果+操作示教，必做 结果示教，必做 结果示教，必做 必做 必做 选做 必做 必做 选做 必做 必做 选做 必做 必做 选做 必做 必做 选做 必做 11 12 细菌的分布试验 1．了解细菌在自然界以及人Bacterial 体的分布情况。 distributing test 2．巩固无菌和无菌操作观念。 药敏试验 drug sensitivity test 使用一定的实验方法在体外测定细菌对抗菌药物的敏感性，包括K-B法、稀释法、E试验。 七年制 40分钟 3～5 五年制 四年制 七年制 1 3～5 五年制 四年制 七年制 2 3～5 五年制 四年制 七年制 30分钟 1 五年制 四年制 30分钟 七年制 3～5 五年制 四年制 七年制 13 14 血标本鉴定 1．讨论病例 Detecting of 2．标本肉汤接种增菌 blood specimen 3．菌液接种血平板 4．对血平板的菌落进行鉴定：革兰染色、触酶试验、血浆凝固酶试验 链球菌菌落 Streptococcus’ colony 抗O试验 Antistreptolysin O test 细菌代谢产物检查 Examining metabolic products of bacteria 观察甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、丙型链球菌在血平板上的菌落形态、溶血特性。 学习检测病人血清中抗链球菌溶素“O”抗体滴度的方法。推荐胶乳法。 1．细菌的糖发酵试验 2．靛基质产生试验 3．甲基红试验 4．V-P试验 5．枸橼酸盐利用试验 6．硫化氢产生试验 7．细菌菌落的色素及溶血现象观察 15 16 17 1 1 五年制 必做 四年制 七年制 30分钟 1 五年制 四年制 1 1 七年制 五年制 必做 选做 选做 选做 必做 必做 18 数字编码鉴定技了解数字编码鉴定技术的原术 理、临床意义、技术操作及Identify 结果判断。 technology in number 肠道杆菌在选择鉴别培养基的生掌握肠道杆菌的鉴别程序和所用培养基。掌握肠道杆菌5
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长情况 在常用选择鉴别培养基的生enterobacteria 长情况。 growth in differential medium 粪标本鉴定 1．讨论病例 Detecting of 2．粪标本SS平板接种 feces specimen 3．可疑菌落双糖铁培养基、半固体培养基接种 4．诊断血清鉴定菌落 肥达试验 Widal test 检测病人血清中是否存在特异性的抗沙门菌属抗体，可作为伤寒或副伤寒的辅助诊断。 1．几种厌氧培养法 2．破伤风梭菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、艰难梭菌的镜下形态 3．产气荚膜梭菌双层溶血环、“汹涌发酵”现象 1．结核杆菌的培养、菌落形态 2．分枝杆菌、麻风分枝杆菌镜下形态 四年制 选做 七年制 五年制 1 3～5 四年制 七年制 1 3～5 五年制 四年制 七年制 五年制 1 1 四年制 七年制 30分钟 1 五年制 四年制 七年制 1 五年制 四年制 七年制 五年制 1 1 四年制 七年制 五年制 1 四年制 七年制 五年制 必做 必做 选做 必做 必做 选做 必做 必做 20 21 22 厌氧菌 Anaerobic bacteria 必做 必做 必做 必做 必做 必做 选做 必做 必做 选做 必做 必做 必做 必做 必做 23 分枝杆菌 Mycobacteria 24 白喉棒状杆菌 1．白喉棒状杆菌镜下形态：Corynebacterium Neisser stain、Gram stain 30分diphtheriae 2．白喉棒状杆菌在含亚碲酸钟 盐血平板上的菌落形态 痰标本抗酸染色 1．掌握抗酸染色的原理、方Acid-fast stain of 法、步骤、所用试剂、结sputum 果观察 2．抗酸染色与革兰染色的比较 螺旋体 prirochete 25 26 1．钩端螺旋体、梅毒螺旋体、回归热螺旋体的镜下形30分态 钟 2．暗视野显微镜观察钩端螺旋体 1．熟悉梅毒螺旋体非特异性、特异性血清学试验方1 27 RPR试验 RPR test 3～5 6
法 2．快速血浆反应素（RPR）试验的原理、方法、结果观察及其意义 28 支原体菌落 掌握镜下支原体油煎蛋菌落Colony of 的典型特征，了解支原体的mycoplasma 菌落鉴别方法。 衣原体包涵体 通过对衣原体镜下示教标本Inclusion body 的观察，掌握衣原体始体、of chlamydia 原体、包涵体的基本特征，理解衣原体特殊的生命周期特点。 立克次体观察 Observing rickettsia 通过对恙虫病东方体镜下示教标本的观察，掌握立克次体在被感染细胞中的形态特点。熟悉立克次体的细胞内寄生生活方式。 了解大培养法与小培养法及其不同的用途。 通过对真菌小培养示教标本的镜下观察，掌握大分生孢子、小分生孢子等各种孢子与各种菌丝等镜下形态结构。 通过对真菌大培养示教标本的观察，掌握三种真菌菌落的基本形态特点。 10分钟 1 四年制 必做 七年制 五年制 四年制 七年制 五年制 1 四年制 七年制 必做 必做 必做 必做 必做 必做 必做 必做 必做 必做 必做 29 15分钟 30 10分钟 五年制 1 四年制 七年制 五年制 真菌培养的观察 Observing the cultures of fungus 31 40分钟 1 四年制 必做 32 新隐墨汁负染 掌握新生隐球菌墨汁负染检20分Indian ink stain 查法，熟悉酵母型真菌（芽钟 of C. neoformans 生孢子等）的镜下形态特点。 真菌皮屑试验 熟悉真菌的不染色标本直接Detecting test of 镜检法，了解真菌感染阳性fungal scurf 标本的镜下形态与观察方法。 细胞培养 Cell culture 熟悉病毒严格细胞内寄生的特性及实验室常用的病毒培养方法，了解单层细胞的制备等病毒培养技术。 20分钟 七年制 1 五年制 四年制 七年制 3～5 五年制 四年制 七年制 必做 必做 必做 必做 必做 选做 录像，选做 录像，选做 录像，选做 示教，必做 示教，必做 选做 示教，必做 33 34 1 1 五年制 四年制 七年制 35 病毒包涵体观察 熟悉病毒包涵体的形态特征Observing 及其检查的实际用途。 inclusion body of chlamydia 病毒CPE 熟悉病毒CPE的形态特征及10分钟 10分1 五年制 四年制 36 1 七年制 7
Cytopathic virus 37 of 其检查的实际用途。 钟 五年制 四年制 七年制 示教，必做 选做 必做 必做 选做 必做 必做 选做 必做 必做 选做 必做 必做 选做 讨论＋操作，必做 讨论＋操作，必做 选做 病毒血凝试验 掌握病毒红细胞凝集试验的hemagglutination 原理及用途，熟悉其结果判test 断。 血凝抑制试验 掌握病毒红细胞凝集抑制试hemagglutination 验的原理及用途，熟悉其结inhibition test 果判断。 登革病毒ELISA熟悉ELISA快速检测登革病试验Detecting 毒抗原的原理、操作及应用 dengue virus by ELISA HIV感染的检查 熟悉抗HIV-I抗原和抗体的Detection of HIV 检测方法及结果判断。 infection 病例讨论 Case discussing 通过对一些常见的感染性疾病的病例分析，进一步掌握微生物学的常用检查方法。 1 3～5 五年制 四年制 七年制 38 2 3～5 五年制 四年制 七年制 五年制 四年制 39 2 3～5 40 30分钟 七年制 3～5 五年制 四年制 七年制 41 各2 3～5 五年制 四年制
修订人: 晏辉钧、梁瑜、陶剑平、周俊梅、周经姣 审核人: 赖小敏 批准人: 江丽芳
修订日期：2005年12月15日
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