Tat_TTA1_PEG共修饰明_省略_跨血脑屏障及对胶质瘤的靶向性研究_张龙

Tat-TTA1-PEG共修饰明胶-硅氧烷纳米粒跨血脑屏障及

对胶质瘤的靶向性研究

112222

张龙，胡洋，林晓宁，魏峰，丰伟，田新华Δ

(1.厦门大学医学院，福建厦门361004;2.厦门大学附属中山医院，福建厦门361004)

［siloxane摘要］目的观察经Tat多肽，适配体TTA1，聚乙二醇（PEG）联合修饰的新型纳米载体明胶硅氧烷纳米粒子（gelatin-nanoparticles，GSNPs）跨血脑屏障及靶向到达胶质瘤的能力。方法通过两步溶胶-凝胶法合成GSNPs，然后在其表面依次修饰上PEG、TTA1、Tat，NHS标记。建立胶质瘤裸鼠原位模型20～25只，GSNPs组，PEG-GSNPs组，并以荧光染料Cy5.5-分为空白对照组，

TTA1-PEG-GSNPs组，Tat-TTA1-PEG-GSNPs组。尾静脉注射各种修饰的纳米粒子，观察其在大鼠体内分布情况；将裸鼠处死后取脑、Tat-PEG-GSNPs在脑部的荧光强于Tat-PEG-GS肝、脾，观察纳米粒子在各器官的分布。结果活体成像及统计分析结果显示TTA1-NPs、PEG-GSNPs、GSNPs组，Tat-PEG-GS且在肿瘤部位的荧光强于脑内其他部位，而在肝脏脾脏的荧光弱于其他3组。结论TTA1-NPs能够逃逸内皮网状吞噬系统（reticuloeendothelinsystem，ＲES）的吞噬，还能跨过血脑屏障，而且对胶质瘤具有靶向性，是一种潜在的胶质瘤治疗基因及药物的靶向载体。［关键词］胶质瘤；纳米粒子；血脑屏障；靶向给药系统［［［中图分类号］Ｒ739.4文献标识码］A文章编号］1005－1678（2014）08－0043－05

ＲesearchofTat-TTA1-PEGmodifiedgelatin-siloxanenanoparticles

acrossblood-brainbarrieranditstargetingtoglioma

ZHANGLong1，HUYang1，LINXiao-ning2，WEIFeng2，FENGWei2，TIANXin-hua2Δ

（1.MedicalCollegeofXiamenUniversity，Xiamen361004，China；2.ZhongshanAffiliatedHospitalofXiamenUniversity，

Xiamen361004，China）

［Abstract］ObjectiveToobservethepropertyofTat-TTA1-PEGmodifiedgelatin-siloxanenanoparticlesacrosstheblood-brainbarrierandgliomatargeting.MethodsGSNPswerepreparedbytwo-stepsol-gelmethod，andthenlabbledbyCy5.5-NHS.Afterthat，PEG，aptamerTTA1andTatpeptidewereconjugateontoGSNPsrespectively.Establishorthotopicimplantationmodelofglioma（20～25），andtheyweredividedinto5groups：blankcontrolgroup，GSNPsgroup，PEG-GSNPsgroup，TTA1-PEG-GSNPsgroupandTat-TTA1-PEG-Gsgroup.GSNPs，PEG-GSNPs，TTA1-PEG-GSNPsandTat-TTA1-PEG-GSNPswereinjectedrespectivelyintoanimalmodel，andtheirdistributionviavivoimagingsystemweredetected.Tocomparetheirdistributioninmajororgan，thebrain，liverandspleenwereremovedandvisualizedbyvivoimagingsystem.ＲesultsComparedwithothergroups，Tat-TTA1-PEG-GSNPsinjectedmicehadmuchfluorescentphotonsinbrain，butlessinliverandspleen.ConclusionTat-TTA1-PEG-GSNPscouldnotonlyescapethecaptureofＲESbutalsopenetratetheblood-brainbarrierandtargettoglioma.

［Keywords］glioma；nanoparticles；blood-brainbarrier；targetdrugdeliverysystem

胶质瘤为原发于脑部的恶性肿瘤，占了脑部肿瘤的80%，目

［1］

前仍是最致命的癌症形式。胶质瘤常呈浸润性生长，且多处于脑部重要结构，手术无法做到真正的彻底切除，极易复发，传统治疗采用手术切除大瘤体，术后采用放化疗等手段杀灭残存瘤细胞，但治疗效果及预后均欠佳。现今基因治疗正成为胶质瘤治疗的研究热点，但血脑屏障的存在限制了大部分基因载体

及98%可用于胶质瘤治疗的药物进入脑到达胶质瘤部位

［2］

，只

有摩尔质量低于150g/mol的亲水化合物和摩尔质量低于400g/mol的疏水化合物能由被动扩散进入大脑［3］，加上网状内皮系统（ＲES）和溶酶体对药物的吞噬降解及P-gp蛋白对药物的外排作用，使得治疗基因和药物很难到达肿瘤部位，严重影响治疗效果。且多数基因载体和化疗药物具有很大的不良反应，缺乏肿瘤靶向性，这使得人们急需一种载体来运载基因或药物到达肿瘤部位。

当前人们使用的载体主要分为病毒载体与非病毒载体，病毒载体主要用于基因治疗方面，具有很高的基因转染率，但其在DNA装载量有限、存在的免疫原性，外源目的基因整合率不高、宿主靶向特异性低和花费高

［4］

资助项目：国家自然科学基金（30970733）

mail：作者简介：张龙，男，硕士，研究方向：胶质瘤的基因治疗，E-zhangyanlongy@163．com；田新华，通信作者，男，博士，主任医师，研究方向：胶E-mail：txhmd@163．com。质瘤的基因治疗，

，而且无法转运化疗药物进行胶

—43—

论著基础研究中国生化药物杂志2014年第8期总第34卷

及其潜在的致癌性限制了其应用，特别是质瘤的靶向性治疗，

“杰辛格反应”事件后，其应用受到很大限制。目前人们所用的非病毒载体主要包括纳米载体和干细胞载体。干细胞载体对肿瘤具有较好的靶向迁移性及肿瘤反应性

［5］

震荡反应4h以活化PEG表面的羧基，将得到的反应液加入制COOH备的荧光染料修饰的GSNPs溶液（pH7.5～8.0）中使得-（PEG）：NH2（GS）为1∶4，20避光共振4h后离心（14000r/min，min，25℃）洗涤2次，而后重新分散于pH7.5～8.0缓冲液中得PEG-GSNPs的合成：在得到的到PEG修饰的GSNPs。④TTA1-PEG-GSNPs溶液中加入3-（2-吡啶二巯基）丙酸n-巯基琥珀酸GSNPs上PEG外端的氨基为亚胺酯（SPDP）使得SPDP∶PEG-0.5∶1。避光震荡反应0.5h后离心（14000r/min，20min，25℃）洗涤2次而后重新分散于pH7.5～8.0缓冲液中，加入DNA适配体TTA1（5'-CCTGCACTTGGCTTGGATTTCAGAA-GGGAGACCC-3'）使得TTA1∶GSNPs为2.0nmol∶1mg。震荡20min，25℃）即得到反应4h后离心洗涤2遍（14000r/min，

TTA1-PEG-GSNPs。⑤Tat-TTA1-PEG-GSNPs的合成：将得到的TTA1-PEG-GSNPs溶液离心后重悬与pH7.5～8.0缓冲液中，在其中加入Tat使得Tat∶GS表面剩余氨基∶EDC∶NHS为0.3∶1∶3∶3，20min，25℃）震荡反应5h，离心洗涤（14000r/min，2遍即得到Tat-TTA1-PEG-GSNPs。

将制备的的材料高速离心后重新分散于缓冲液中，用MALVEＲNZetasizerNano-ZS仪器测定其粒径和Zeta电位。透射电镜（TEM）观察其形态，分散度和粒径。

1.2.2

胶质瘤裸鼠模型的构建

取4～6周BALB/c裸鼠

25只，雌雄不限，购买于厦门大学动物实验中心。动物饲养1周

，但外源干细胞载体

的潜在致瘤性、干细胞来源、外源基因的稳定表达等难题制约了干细胞载体在临床治疗中的应用。而纳米载体因其在血浆中不被降解，能够逃避内皮-网状系统的捕捉，且能够直接通过血脑屏障靶向肿瘤部位，而不用人工开放，并且能够穿过肿瘤基质屏障和肿瘤血管屏障且脑胶质瘤对纳米粒有EPＲ效应（选择性高通透性和滞留性）使其被动靶向胶质瘤部位

［6］

，加之纳米载体较高

的基因装载量，较低的细胞毒性，及其对药物和基因的保护作用，使其成为运载药物或基因到达胶质瘤肿瘤部位的理想载体。

本实验将通过两步溶胶-凝胶法合成GSNPs首先修饰上荧NHS，光染料Cy5.5-然后逐步修饰上延长载体体内循环时间的

［7］

亲水性聚乙二醇（PEG），可特异性与胶质瘤细胞高表达的肌

C）结合的适配体TTA1［8］，腱蛋白C（TN-具有增强纳米载体跨血

［9］脑屏障跨细胞膜能力的小分子多肽Tat，内皮系可避免网状-

统（ＲES）吞噬作用。然后将得到的纳米粒子通过尾静脉分别注入载瘤裸鼠体内，通过活体成像仪定点观察纳米载体的体内分布，跨血脑屏障的能力以及对胶质瘤的靶向性。

11.11.1.1

材料与方法材料实验试剂

3-（2，3-明胶购自美国BBI公司，环氧丙

后在屏障环境内将麻醉后的裸鼠固定于立体定向仪上，常规消毒铺巾后在头顶正中沿正中线做一1cm切口，然后在冠状缝下0.5cm矢状缝右侧2cm用牙科钻做一骨窗［11］。在立体定向仪的引导下将处于对数生长期的C6胶质瘤细胞（悬浮于无血清的

6

DMEM培养基中，细胞数为10）5μL，用微量注射器20min接种

（三甲氧基硅烷）丙胺氧）丙基三甲氧基硅烷（GPSM）与3-（APTMS）购自美国ACＲOSOＲGANICS公司。1-3-（3-乙基-二甲N-基氨丙基）-碳化二亚胺（EDC），羟基琥珀酰亚胺（NHS），聚乙Tat多二醇（PEG）购自上海化学试剂有限公司。TTA1适配体，NHS购自上海西宝肽购自上海生工生物工程有限公司。Cy5.5-生物科技有限公司。DMEM高糖培养基和小牛血清购自美国Hyelone公司。大鼠C6胶质瘤细胞购于上海美轩生物科技有限公司。裸鼠购买于厦门大学动物实验中心，动物许可证号：SCXK（沪）2012-0002，所做动物实验均遵循《实验动物保护条例》有关内容。

1.1.2

主要实验仪器

Varian7T磁共振成像仪（美国

VarianLtd），小动物活体成像系统（美国剑桥科研仪器公司），粒径分析仪及ZETA电位分析仪（英国MalvernInstrumentsLtd），透射电子显微镜（日本JEM公司）。

1.21.2.1

方法

材料的制备与表征

TTA1-Tat-PEG-GS的合成分为

于大脑尾状核。术后每天观察其行为改变并测量体质量，每周行MＲI检测胶质瘤成型情况。

1.2.3的评测

材料的体内分布及其跨血脑屏障靶向胶质瘤能力取已构建好的裸鼠原位胶质瘤模型25只，均分为空白

GSNPs组，PEG-GSNPs组，TTA1-PEG-GSNPs组，TAat-对照组，

TTA1-PEG-GSNPs组。分别经尾静脉注射Cy5.5-NHS标记的GSNPs，PEG-GSNPs，TTA1-PEG-GSNPs，Tat-TAA1-PEG-GSNPs，1、2、4h通过活体成像仪注射量为200μL。注射后分别于0.5、

4h后于CO2处定点观察纳米材料在载瘤动物体内的动态分布，

死箱内处死实验裸鼠，取脑、肝、脾，观察器官内纳米粒子分布并测量其荧光强度。

1.3

统计学方法

采用SPSS1.9.0统计软件处理数据，正

“x±s”态计量资料以珋来表示，采用比较各样本均数的t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

22.1

结果

各种纳米材料的表征

TEM下PEG-GSNPs，TTA1-

5个阶段：①通过两步溶胶凝胶法合成GSNPS，具体合成方法参

［10］

NHS修饰的考Yin等及Wang等方法。②荧光染料Cy5.5-

GS的合成：提前1天冻干5mLGS，计算GS浓度，根据GS的量NHS溶于二甲基亚砜（DMSO）中使得Cy5.5-NHS取适量Cy5.5-的量与所取的GS表面氨基量1∶5，将得到的反应液与GSNPs（pH7.5～8.0）溶液混合避光共振8h后离心洗涤2遍（14000r/min，20min，25℃）得到Cy5.5-NHS修饰的GSNPs。③连接PEG（PEG合成时已经修饰氨基和羧基修饰）：将PEG与EDC、NHS分散于pH7.5～8.0缓冲液中使得EDC∶NHS∶PEG为3∶3∶1，

PEG-GSNPs，TAT-TTA1-PEG-GSNPs的照片见图1，GS可见PEG-NPs、TTA1-PEG-GSNPs、TAT-TTA1-PEG-GSNPs呈球形，粒径在80～100nm之间。Zeta电位仪测量结果显示，GS表面修饰PEG和TTA1后表面电位由30mV左右降至接近电中性，这是由于GS表面的氨基被消耗。血脑屏障在整体上表现为负电位［12］，与

—44—

中国生化药物杂志2014年第8期总第34卷论著基础研究

TTA1、Tat修饰的GSNPs表面电TTA1-PEG-GSNPs相比经PEG、位有所增加，这有利于纳米载体运载质粒并提高通过其血脑屏障的能力。

2h可见脑部肿瘤注经TTA1PEG联合修饰后其体内代谢减慢，

4h时此高荧光信号仍射点出现高于脑部其他部位的荧光信号，

TTA1、PEG联合修饰后纳米载体体内循环时间然存在。经Tat、

2、4h脑部肿瘤注射部位同样出现高于脑部其他部位的荧延长，

PEG-GSNPs组相比信号更强范围更大。光信号，且与TTA1-

图1Fig.1表1Tab.1

种类GSNPsPEG-GSNPsTTA1-PEG-GSNPsTat-TTA1-PEG-GSNPs

TEM下各种纳米粒子表征图片PicturesofeachNPsunderTEM

4种纳米粒子的粒径和Zeta电位（n=22）ThesizeandZetapotentialoffourNPs（n=22）

粒径仪测得粒径（nm）

85.67±8.6486.23±9.5288.46±7.6594.42±7.42

Zeta电位（mV）29.22±1.663.34±0.453.67±0.8328.94±2.43

胶质瘤移植手术中裸鼠初

期因麻醉后低温死亡2只，注意保温后均成活。裸鼠术后1d内

2d后恢复正常，逐步恢复活动和饮食，术后1周内无明显行为1周后逐步出现精神萎靡，改变，嗜睡，体重下降反应迟钝等症

2周后出现眼球突出，3周后状，偏瘫等症状，体质量下降明显，明显恶病质，所有手术裸鼠均于4周内陆续死亡。由胶质瘤原位模型构建后连续3周MＲIT2加权象的图片（见图2），可见模型构建1周后微量注射器穿刺部位（定位于尾状核）有环形高密度影，穿刺部位为囊性暗区。2周后可见1周前的囊性暗区已为高密度影所替代，高密度影范围有所扩大。3周后可见高密度影明显扩大。结果显示模型成瘤效果显著，成瘤率高达90%。

2.2MＲI增强扫描观察结果

图3Fig.3

纳米载体经尾静脉注入胶质瘤模型动物后活体成像观察结果Dynamicimagingofnudemiceaftertheinjectionofnanoparticles

纳米载体在主要器官内的分布及跨血脑屏障靶向胶

质瘤能力的评价图4为纳米材料尾静脉注入胶质瘤模型动物4h后取肝脏和脾脏活体成像观察的结果，NHS由图可见Cy5.5-荧光染料标记的GSNPs尾静脉注入模型动物后在肝脏和脾脏中均表现为较高信号。与GSNPs相比，经PEG修饰后的纳米载体在肝脏和脾脏中的荧光信号大大减弱。这表明经PEG修饰后的GSNPs能够在一定程度上逃避内皮-网状系统的吞噬。

2.4

图2

Fig.2

各组胶质瘤种植后MＲI增强扫描的结果

图4

纳米载体尾静脉注入模型动物4h后取肝、脾、脑活体成像结果A：对照组；B：GSNPs；C：PEG-GSNPs；D：TTA1-PEG-GSNPs；

E：Tat-TTA1-PEG-GSNPs

Fig.4

Imagingresultsofremovedliver，spleenandbrainafternanoparticles

injectionof4h

A：controlgroup；B：GSNPsgroup；C：PEG-GSNPsgroup；D：TTA1-PEG-GSNPsgroup；E：Tat-TTA1-PEG-GSNPsgroup

MＲIimagesofnudemiceintracerebralglioblastomamodel

由尾静脉注射经荧光染

料标记的纳米材料后定点活体成像仪观察到的结果（见图3），NHS标记的GS经尾静脉注射后很快在肾脏富集并可见Cy5.5-4h时脑部荧光信号消失。经PEG修饰后其肾脏富集现象代谢，

4h时脑部荧光信号仍然存在。大大减弱，体内循环周期延长，

—45—

2.3活体成像动态观察的结果

论著基础研究中国生化药物杂志2014年第8期总第34卷

未经修饰的纳米粒子在到达脑部之前很快会被ＲES吞噬降［13］

解。由纳米材料尾静脉注入胶质瘤模型动物4h后取脑活体成像的结果可以看到未经修饰的GSNPs只有少量能够聚集在脑部。经PEG修饰后脑部荧光增强且范围有所扩大。经TTA1-PEG联合修饰后脑部荧光强度和范围进一步增强，且在肿瘤部位的荧光强度强于脑部其他部位。证明与GSNPs相比经TTA1-PEG-GSNPs有较大优势进入脑且对胶质瘤具有靶向性。Tat、TTA1、PEG修饰后，脑部肿瘤部位出现最高强度的荧光信号，几PEG-GSNPs相比，乎整个脑部都被荧光所覆盖。证明与TTA1-Tat-TTA1-PEG-GSNPs到达脑组织和脑部肿瘤的能力都有所增PEG联合修饰的纳米载体可以透过血强。已有文献报道经Tat-脑屏障到达脑部

2.5

［14］

TTA1-PEG-GSNPs不仅在肝脏、比，脾脏中的含量有所下降，脑

部含量有所提升，而且在脑部胶质瘤部位有所集中，这说明TTA1-PEG-GSNPs不仅能够逃逸内皮网状吞噬系统的吞噬，透过血脑屏障，而且对胶质瘤具有靶向性。本实验室之前的研究GSNPs相比，PEG、Tat共修饰的GSNPs尾静脉注入证明与PEG-胶质瘤皮下动物模型后对胶质瘤的靶向性更高

［15］

。实验结果

GSNPs经PEG-TTA1-Tat联合修饰后在肝表明：与其3组相比，

TTA1-脏和肾脏中的含量最低，而在脑部的含量最高，而且Tat-PEG-GSNPs在脑部胶质瘤部位有非常明显的集中。以上结论

TTA1适配体、PEG联合修饰后的GSNPs不仅表明：经Tat多肽、

能够逃逸网状内皮系统的吞噬，而且能够跨过血脑屏障靶向到

达胶质瘤。这些优势使得GSNPs能够携带治疗基因或药物，并保护其靶向到达胶质瘤细胞对胶质瘤进行有效的治疗。

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的、原发性恶性肿瘤，即使给予传统的手术联合放化疗的综合治疗，低级别胶质瘤患者的平均存活时间仅为3～5年，而高级别胶质瘤为1～2年。其治疗一直是神经外科领域的难点热点。血脑屏障的存在使很多药物难以进入脑部，大大限制了治疗效果。GSNPs不仅能够通过血脑屏障，经过靶向修饰后能够定向到达胶质瘤部位释放化疗药物与基因，它还具有低免疫原性、高容量性、对目的基因和药物具有保护作用，防止其被提前代谢。并且GSNPs在携带药物、基因进行治疗时不需要开放血-脑脊液屏障，且本身能够通过EPＲ效应滞留于胶质瘤部位，这些都给胶质瘤的治疗带来了极大优势。参考文献

［1］

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Jordan，Andreas，Scholz，etal.Theeffectofthermotherapyusingmagneticnanoparticlesonratmalignantglioma［J］.Journalofneuro-oncology，2006，78（1）：7-14.

。

未经修饰的GSNPs

在肝脏和脾脏中的荧光光子量分别达到了4731276.7和873792.3，经PEG修饰后纳米载体在肝脏和脾脏中的荧光光子

体内器官分布半定量分析结果

量则分别下降到了3263552.3和300515.7，而脑部的荧光光子

TTA1联合修饰后量则由35440.5提升到了91137.4。经PEG、

肝脏和脾脏中的荧光光子量进一步下降而在脑部的含量则有所

TTA1、PEG修饰后的纳米载体其在肝脏和脾脏提升。经Tat、

中的荧光光子量下降到最低点而脑部光子量则达到最高，差

TTA1-PEG-GSNPs在异有统计学意义（P＜0.01）。证明Tat-肝脏和脾脏中的含量低于其他组，而在脑组织中的含量高于

其他组。

图5Fig.5

将纳米载体尾静脉注入模型动物4h后的体内器官分布图DistributioninvivoofdifferentNPsafterinjectingintomicefor

4hviathetailvein

［5］ShahK，BureauE，KimDE，etal.Gliomatherapyandreal-timeimagingofneuralprecursorcellmigrationandtumorregression［J］．Annalsofneurology，2005，57（1）：34-41.

［6］Kawano，Kumi，Watanabe，etal.Enhancedantitumoreffectofcamptothecinloadedinlong-circulatingpolymericmicelles［J］．Journalcontrolledrelease，2006，112（3）：329-332.

3讨论

［7］

胶质瘤为原发于脑部的恶性肿瘤，传统的治疗方法疗效有限，而基因治疗提供了另一种途径。但是由于血脑屏障的存在，多数的基因载体和超过98%的可以用来治疗胶质瘤的药物都不能到达脑组织。GSNPs具有粒径小，毒性低及生物相容性高的特点，是理想的基因与药物载体。活体成像的结果显示与GSNPs相比，GSNPs经PEG修饰后在载瘤裸鼠体内的代谢速度减慢，半定量分析结果显示，纳米粒子在肝脏和脾脏中的含量大幅GSNPs能够在一定程度下降，而脑部含量有所增加，说明PEG-上逃逸内皮网状吞噬系统的吞噬，延长血浆半衰期，继而能使更GSNPs相多的纳米载体到达脑部血管透过血脑屏障。与PEG-—46—

［8］

LocatelliE，FranchiniMC.BiodegradablePLGA-b-PEGpolymericnanoparticles：synthesis，properties，andnanomedicalapplicationsasdrugdeliverysystem［J］.JournalofNanoparticleＲesearch，2012，14（12）：1-17.

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（下转第49页）

中国生化药物杂志2014年第8期总第34卷论著基础研究

HSP27阳性细胞染色强度明显增高。研究结果与其相一致。槲皮素是一种具有多种生物活性且无明显毒副作用的黄酮类化合物，广泛存在于蔬菜及水果中，具有抗肿瘤、抗氧化、清除氧自由基、抗感染、抗血栓和抗病毒等多种活性，特别是抗肿瘤

［4，12］

。然而槲皮素对作用逐渐被人们所认识并引起广泛的重视

前列腺癌的作用知之甚少。故此，本研究旨在讨论槲皮素对

PC-3细胞HSP27mＲNA表达和凋亡的影响。结果发现，槲皮素可以抑制HSP27mＲNA的表达，而且随着剂量增加，抑制作用增

3细胞增殖具强，具有剂量依赖性。另外还发现，槲皮素对PC-3细胞HSP27mＲNA的表达和有显著抑制作用。槲皮素抑制PC-3细胞凋亡可能是其抗前列腺癌的机制之一。诱导PC-PC-3细胞HSP27mＲNA表达水平明显增高，综上所述，而槲

3细胞HSP27mＲNA表达，皮素可以抑制PC-高浓度的槲皮素抑制作用更强，为寻找治疗治疗靶位奠定了基础。同时，槲皮素还

3细胞凋亡，3细胞凋亡的具体作用诱导PC-然而槲皮素诱导PC-机制有待深入研究。参考文献

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图3Fig.3

3细胞凋亡（SP，×200）槲皮素诱导PC-*

P＜0.05，与对照组相比

PC-3cellapoptosisinducedbyquereetin（SP，×200）

*

P＜0.05，comparedwithcontrolgroup

3讨论

HSP是应激条件下产生的高度保守的分子伴侣［9］，是组织

和器官受到刺激或应激时表达的主要蛋白质，可参与细胞损伤、

［10］防御、修护产生而控制细胞功能。HSP27作为小HSP亚家族中的重要一员，近年来研究HSP27与肿瘤的关系成为热点。正常组织细胞内HSP27的表达水平很低。应激状态可致胞内HSP27

HSP27表达上调，磷酸化并致其寡聚体解聚，参与肿瘤的发生、侵

［11］

袭以及转移过程。本研究结果显示空白对照组和阴性对照组

（编校：谭玲）

（上接第46页）

［9］GabathulerＲ.Approachestotransporttherapeuticdrugsacrossthe

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（编校：吴茜，刘路路）

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