科学理论 高效液相色谱法测定阿莫西林颗粒中的 高分子杂质 刘博 （哈药集团制药总厂） 摘要：目的：采用高效液相色谱法去测定阿莫西林颗粒中高分子杂质的方法。方法ｔ在测定的过程中采用的是高效液相色谱的方法。色谱柱是当前比 较常见的凝胶柱，流动相Ａ是浓度为０．１ｍｏｌ／Ｌ，ＰＨ值为７．０的磷酸盐缓冲液。流动相Ｂ为水，流动相的流速为０６－０．９ｍｔ／ｍｉ ，在测定中检测的波长为 ．２５４ｎｍ。结果：阿莫西林颗粒中的杂质含量在ｏ‘１％以内。结论ｔ高效液相色谱法在测定阿莫西林中杂质含量使具有灵活性高，准确性强和操作简便等多项 优势，这种方法也值得大力的推广和应用。 关键词：高效液相色谱法；阿莫西林颗粒：高分子杂质 阿莫西林是一种半合成广谱青霉素，这种药物本身的酸性非常强，同时 抗菌效果非常好，在临床上有着非常好的应用效果，所以也得到了广泛应用， 和其他类型的抗生素相同，在阿莫西林应用的过程中，过敏反应是非常关键 的一个问题，在研究中发现出现过敏反应是阿莫西林制剂当中含有非常多 的杂质，所以要想减少过敏反应的影响，就一定要对产品当中的高分子杂质 进行有效的控制，本文主要采用高效液相色谱法对杂质进行澳《定。 １仪器与试药 仪器：ＷａｔｅｒｓＨ１ ＬＣ仪（美国Ｗａｔｅｒｓ），１５２５泵，２４８７ＵＶ检测器，色谱工作 站（ＷａｔｅｒｓＢｒｅｅｚｅ）。 试药：阿莫西林对照品（中国药品生物制品检定所，含量为８６。２０１０）；水 为重蒸馏水；阿莫西林颗粒（商品名为再林，批号为０３１２０２、０３１２０３、０３１２０４， 海南先声药业有限公司）；蓝色葡聚糖２０００（Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司）：其他试剂均为 分析纯。 ２方法与结果 ２．１色谱条件 色谱柱：ＳｅｐｈａｄｅｘＧ一１０凝胶柱（不锈钢色谱柱，３００ｍｍｘｌ０ｍｍ）。内填 ＳｅｐｈａｄｅｘＧ．－－１０凝胶，安玛西亚生物技术（上海）有限公司提供。流动相ｌ以ｐＨ 值为７．０的Ｏ．Ｉｍｏｌ／Ｌ的磷酸盐缓冲液（取２１．８５ｇ，一二水磷酸氢二钠与６．０８ｇ 二水磷酸二氢钠溶于水中制成ｌＯ００ｍＬ，用氢氧化钠或磷酸调溶液的ＤＨ值 至（７．０￣－－０．１）为流动相Ａ；以重蒸馏水为流动相Ｂ。在下述条件下进行测定：检 测波长为２５４ｎｍ￣流速为Ｏ．６＿ｏ．９ｍＬ／ｍｉｎ；进样量为２００，Ｌ。 ２．２系统适应性试验 在试验的过程中，研究人员采用蓝色葡聚糖２０００ｍｌ的溶液对色谱柱的 理论塔板数和拖尾因子进行测定，蓝色葡聚糖的浓度为ｌｍｇ／ｍｌ，在试验的过 程中将流动相Ａ当做这一步骤采用的流动相。将流动相的流速控在０．６— ０．９ｍｌ／ｍｉｎ，检测的波长一定要控制在２５４ｎｍ。理论上的塔板数是１６９５，拖尾 因子能够为０．８６．试验当中我们精确的称取适量的林标准品两份，将二者分 别放在容积为５０ｍｌ的容量瓶当中，加入适量的重蒸馏水，对其进行溶解和 稀释，一直到标准的刻度。两份对照品按照标准的方法将流动相Ｂ当成是试 验中的流动相，将一份样品进行三次的连续进样，峰面积相对的偏差为 ０．３８％，而将二者分别进样～针，两份峰面积的相对偏差达到了０．２６％。 ２．３溶液制备 对照品溶液制备：精确称取２０ｍｇ：的阿莫西林对照品，将其放置在容积 为５０ｍｌ的容量瓶当中，采用流动相Ｂ对其进行溶解和稀释到容量瓶刻度的 位置，将其当做是对照品溶液。 供试品溶液制备：取本品４袋，将其按照试验的要求研细，同时还要精 确的称取适量的细粉，将其放置在容积为５０ｍｌ的容量瓶当中，加入３０ｍｌ的 流动相Ａ，采用超声溶解的方式，将其稀释到刻度的位置，此外还要以适当的 力度将其摇匀，用滤膜对其进行滤膜处理，将其当做供试品溶液 ２．４测定方法 精确吸取供试品溶液２Ｏ ，将其注入到色谱仪当中，将流动相Ａ当成流 动相对其进行测定，对色谱图进行记录，此外还要量取２Ｏ 的对照品溶液， 将其注入到色谱仪当中，将流动相Ｂ当做流动相进行测定，同时还要对色谱 图进行全面的记录。其暴露的时间要在蓝色葡聚糖２０００和阿莫西林主峰杂 质的含量之间，这一区间内都能将其计为高分子的杂质，用外标法的方式五 对供试品当中的阿莫西林高分子含量进行计算。 ２．５阿莫西林颗粒中高分子杂质的测定 使用上述色谱条件，对３批阿莫西林颗粒的高分子杂质进行了全面的 测定，在测定的过程中采用阿莫西林当做对照，使用主成分对照的方式去评 ｔ／ｍｉｎ ， ＩＯ Ｉｊ ２Ｄ ２ｊ ３０ Ｃ Ａ对照品溶液Ｂ蓝色葡聚糖２０００ Ｃ样品 图１ ＨＰＬＣ图 ３讨论 ：， 在试验的样品当中加入了质量分数为１０％的碳酸钠溶液，所以阿莫西 林比较容易出现聚合的现象，在采取自然的方式放置了３格小时之后，对其 进行了在一次的测定，发现高分子杂质的含量增加了接近一倍。因此，样品完 全溶解之后应该采取立即进样的方式，同时在每次完全溶解之后，样品只能 进一针，在试验的过程中～定要对碳酸钠溶液的加入量进行严格的控制，这 样就可以使得超声的时间有所延长，溶解也更为充分。 在对照品溶液进样的过程中，应该将水当成流动相，进样品溶液的过程 中应该将磷酸盐缓冲液当成流动相，这样也就可以充分的保证对照品主峰 ２０ 科学理论 常用药品的正确使用方法 徐明畅 摘要：平喘药、抗疟疾药物、抗抑郁药物、钾盐、钙剂等补充电解质类药物等使用不当也能导致心脏猝死 青霉素类药物、地高辛、西地兰、氯丙嗪类 药物、利多卡因、异丙肾上腺素气雾剂等使用不当会心衰。随着药品种类的日渐增多，药物不良反应的发生也有所增加，只要正确使用药物，药品不良反应 是可控的。本文对常用药品的正确使用方法进行综述。 关键词：药品；正确；使用 许多人都知道，“是药三分毒”，随着药品种类的日渐增多，药物不良反 应的发生也有所增加，只要正确使用药物，药品不良反应是可控的。抗感冒 药多为复方药，可能发生严重肝脏损害、大疱性皮疹、严重胃肠出血等。降 餐时服用的药物主要有降糖药（如阿卡波糖等）、抗真菌药（如灰黄霉 素）、助消化药（如乳酶生、淀粉酶等）、非甾体抗炎药（如舒林酸、吡罗昔康、 美洛昔康、氯诺昔康）、治疗胆结石租胆囊炎药（如熊去氧胆酸）。 ｔ 压药可能引起干咳无痰、血管神经性水肿等。青霉素可能造成皮疹、胸闷、 恶心、呕吐等不良反应，还会出现头痛头晕、精神错乱、癫痫等神经系统不 良反应。抗肿瘤药临床主要有恶心、呕吐、便秘、胃炎等消化道反应，严重时 出现消化道出血，少数患者会出现延迟性进行性心肌病变。平喘药（如氨茶 碱）、抗疟疾药物（氯喹及氯喹磷酸盐）、抗抑郁药物（如丙米嗪）、钾盐、钙剂 等补充电解质类药物等使用不当也能导致心脏猝死【 －３１。抗精神病药、抗狂 躁药、抗焦虑药、抗抑郁药、抗菌药、抗溃疡药、抗癌药、抗癫痫药使用不当 可能会引起癫痫。青霉素类药物；地高辛、西地兰、洋地黄毒甙等洋地黄类 药物；氯丙嗪类药物：奎尼：利多卡因；异丙肾上腺素气雾剂等使用不当会 心衰 。本文对常用药品的正确使用方法进行综述。 １服药时间概念 １．６顿服法 指病情需要一次性服药，如肾病综合症、顽固的支气管哮喘等。 ２需要嚼碎服用的药品 部分药品需要嚼碎后服用，如复方胃舒平、氢氧化铝片，嚼碎后进入胃 中很快地在胃壁上形成一层保护膜，从而减轻胃内容物对胃壁溃疡的刺 激；咀嚼片（如西咪替丁咀嚼片、铝镁加咀嚼片、孟鲁司特咀嚼片），更需要 咀嚼细碎后而发挥作用。 ３不可嚼碎服用的药品 不可嚼碎服用的药品主要有肠溶片、缓释片、控释片等。 肠溶片到了肠道药物才溶解，主要是为了保护胃不受刺激。这样的药 在服用的时候千万不能掰碎。否则既影响了药效又伤害了身体。缓释片用 药后能较长时间持续释放药物，已达到延长药效的目的与普通片比较，缓 释片具有作用持久，服用次数少等优点控．若嚼碎服用，不能起到缓慢释放 药物的作用。控释片是将药物置入一种人工合成的优质惰性聚合物中，口 服后，药物按要求缓慢恒速或接近恒速地释放，因此也不能嚼碎服用。 ４不宜用热水送服的药品 １．１清晨空腹服药 因空腹时，胃和小肠已基本没有食物，药物可迅速到达小肠，吸收充 分，作用迅速有效。如抗结核药、驱虫药、盐类泻药等。清晨空腹服用的药物 主要有免疫抑制剂（如青霉胺）、肾上腺皮质激素（如泼尼松、泼尼松龙、地 塞米松等）、抗抑郁药（如氟西汀、瑞波西汀、氟伏沙明等）、长效降压药（如 氨氯地平、依那普利、拉西地平、索他洛尔、复方降压平）、盐类泻药（如硫酸 镁、硫酸钠）、驱虫药（如四氯乙烯、甲硝唑）。 １．２饭前服药 不宜用热水送服的药品主要有维生素类（维生素中的维生素ｃ、维生 素Ｂ１等受热后易失去药效）、止咳糖浆类（若用热水冲服，会稀释糖浆，不 能在呼吸道形成一种保护性的“薄膜”，影响药效）、助消化药（如胃蛋白酶 合剂、胰蛋白酶、淀粉酶，受热后即凝固变性而失去作用） ５宜多喝水的药品 指饭前３Ｏ一６０分钟前服药。饭前胃的食物少，有利于药物与胃壁充分 接触，发挥最大的治疗作用。饭前服药的药物主要有降血糖药（如甲磺丁 脲、格列本脲、格列喹酮）、止泻药（如鞣酸蛋白、药用炭）、抗生素（如头孢拉 定、氨苄西林、阿莫西林、克拉霉素、异烟肼、利福平）、胃黏膜保护剂（如氢 氧化铝或其复方制剂、复方铝酸铋）、滋补药（如人参、鹿茸等）、利胆药（如 小剂量硫酸镁、胆盐）、促进胃动力药（如甲氧氯普胺、多潘立酮、莫沙必 利）、止吐药（如吐来抗）、抗酸药（如碳酸氢钠）。 １．３饭后服药 宜多喝水的药品主要有利胆药（如苯丙醇、曲匹布通、去氢胆酸和熊去 氧胆酸等）、ＨＩＶ蛋白酶抑制剂、双膦酸盐（阿仑膦酸钠、帕屈膦酸钠等）、平 喘药（如茶碱或茶碱控释片、氨茶碱、二羟丙茶碱等）、抗痛风药（如磺吡酮、 丙磺舒等）、抗尿结石药、电解质。■ 参考文献 【１］毛争春，李颖，谢强敏，陈本川．哮喘药物治疗的成就及新对策［Ｊ］．国 外医药（合成药生化药制剂分册），２０００（５）． 指饭后１５—３Ｏ分钟后服药。大部分药品可在饭后服，饭后服药食物会 影响药物与胃壁接触，所以对胃壁刺激性大的药物易饭后服用。刺激性药 品主要有阿司匹林、呋喃丙胺、醋酸钾、多西环素、亚砷酸钾溶液、水杨酸 钠、保泰松、硫酸亚铁、碘化钾、吲哚美辛、布洛芬、溴化钠、黄连素。 １．４唾前服药 指睡前１５—３０分钟服药。睡前服用的药物主要有降血脂药（洛伐他汀、 辛伐他汀、氟伐他汀等）、催眠药（如咪达唑仑、司可巴比妥、异戊巴比妥、硝 西泮、苯巴比妥）、抗过敏药（苯海拉明、异丙嗪、特非那定、酮替芬）、平喘药 （如沙丁胺醇、氨茶碱）、缓泻药（比沙可啶、液状石蜡）。 １．５餐时 【２］中华医学会呼吸病学分会哮喘学组．支气管哮喘防治指南（支气管 哮喘的定义、诊断、治疗及教育和管理方案）｝Ｊ］．中华结核和呼吸杂志，２００３ （３）． ［３］田硕涵，周颖，张慧琳，崔一民．抗支气管哮喘药物的进展与评价［Ｊ】 ．中国医院用药评价与分析，２００６（４）． ｆ４】向晋涛．（２００８年ＥＳＣ急性和慢性心力衰竭诊断和治疗指南》中胺 碘酮使用的适应证［Ｊ］．中国心脏起搏与心电生理杂志，２００８（６）． ［５】黄兴福，杨艳敏，朱俊，谭慧琼，王国干，袁贤奇，梁岩．静脉胺碘酮的 主要不良反应分析［Ｊ】．中国心脏起搏与心电生理杂志，２００７（６）． 产工艺，成功地将成品中的杂质控制在＜０．１％以下，从而确保了该制剂的疗 效和安全性。■ 参考文献 的保留时间和样品的高分子杂质保留的时间具有高度的一致性 到目前为止，阿莫西林及青霉素类抗生素的高分子杂质尚无标准品。以 ＨＰＬＣ分析相关物质，在没有杂质对照品的情况下，《中国药典》采用主成分 对照法评价相关物质的含量，故在参照相关文献的基础上，木研究采用自身 对照法进行了测定，结果表明本法简便、易行，能有效地检测到阿莫西林颗粒 中的杂质含量。 『１１马萍，程玉宝，王德刚，钟雅妮，熊渊＿５可莫西林颗粒中特定杂质的研究 及控制叨．今日药学，２０１４（９）． 【２】李绪伦，任学毅，李霞，李宁－５可莫西林胶囊聚合物杂质测定中的异常 情况研究叨．中国药业，２００８（１ ２）． ［３］顾立素，胡昌勤，周进东，罗兴洪，赵耀军－５可莫西林颗粒中高分子杂质 随着免疫学和分子生物学技术的迅速发展，目前对阿莫西林过敏机制 有了较明确的认识。阿莫西林木身没有抗原性，不直接引发过敏反应，引起 过敏反应的是制剂中高分子聚合物杂质。对于口服阿莫西林，原料药中高分 子杂质＜０．１％、制剂中高分子杂质＜Ｏ．２％时，一般不会产生青霉素过敏反应。 上最优质的阿莫西林原料（西班牙Ｂｉｏｃｈｅｍｉｅ公司）和先进的生 含量和生产工艺的相关性评价【Ｊ】．药品评价，２００５（２）． ［４］朱康玲，康月菊，尹翠英，焦瑞恒．关于阿莫西林中聚合物杂质的研究 们．石家庄职业技术学院学报，２００６（２）．