档春医学工程２０１３年３月第２０卷第３期 ・２８３・ ・论著・ （实验研究） 抑癌基因蛋白ＰＴＥＮ，Ｐ１６和Ｐ２７在乳腺癌中 表达及其临床病理意义 赵宋礼，余洁，严智敏，杨迪，李璇，陈俊忠，刘文辉 （南方医科大学附属南海医院，广东佛山５２８２００） 【摘要】 目的研究抑癌基因蛋白ＰＴＥＮ，Ｐ１６和Ｐ２７在乳腺癌中的表达情况并探讨其临床病理意义。方法运用免疫组织化 学染色ｓ—Ｐ法。检测８０例乳腺癌和３０例乳腺纤维腺瘤组织中ＰＴＥＮ、Ｐ１６和Ｐ２７表达情况并分析其与淋巴结转移的关系。结果 ８Ｏ例乳腺癌组织的ＰＴＥＮ阳性表达率为５３．７５％（４３／８０），阴性表达率为４６．２５％（３７／８０）；Ｐ１６阳性表达率为３６．２５％（２９／８０）， 阴性表达率为６３．７５％（５１／８０）；Ｐ２７阳性表达率为４５．００％（３６／８０），阴性表达率为５５．００％（４４／８０）。三种抑癌基因蛋白的阳性 表达率明显低于乳腺纤维腺瘤组织（Ｐ＜０．Ｏ１）。淋巴结未转移组ＰＴＥＮ阳性率４５．００％（３６／８０），Ｐ１６阳性率２５．００％（２０／８０）， Ｐ２７阳性率３５．【】０％（２８／８０）显著高于淋巴结转移组ＰＴＥＮ阳性率８．７５％（７／８０），Ｐ１６阳性率１１．２５％（９／８０），Ｐ２７阳性率 １０．００％（８／８０） （Ｐ＜０．０５）。结论乳腺癌组织中抑癌基因蛋白ＰＴＥＮ、Ｐ１６和Ｐ２７表达明显低于对照组且淋巴结未转移组的阳性 率显著高于淋巴结转移组．ＰＴＥＮ、Ｐ１６和Ｐ２７为乳腺癌预后因子，可以作为判断乳腺癌预后的指标。 【关键词】ＰＴＥＮ；Ｐ１６；Ｐ２７；乳腺癌 中图分类号：Ｒ７３７．９ 文献标识码：Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９０．ｉｓｓｎ．１６７４—４６５９．２０１３．０３．０２８３ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ ｏｆ ＰＴＥＮ，Ｐ１６ ａｎｄ Ｐ２７ ｉｎ Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ ＺＨＡ０ Ｓｏｎｇｌｉ，ＹＵ ｅ，ＹＡＮＺｈｉｍｉｎｇ，ＹＡＮＧ Ｄｉ，ＬＩＸｕａｎ，ＣＨＥＮＪｕｎｚｈｏｎｇ，ＬＩＵ Ｗｅｎｈｕｉ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｎｏｎｈａｉ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ａｆｆｉｌｉｔａｅｄ ｔｏ Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｏｓｈａｎ ５２８２０￣Ｃｈｉｎａ） 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ＰＴＥＮ，Ｐ１６ ａｎｄ Ｐ２７ ｉｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ，ａｎｄ ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＰＴＥＮ．Ｐ１６ ａｎｄ Ｐ２７ ｉｎ ８０ ｃａｓｅ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ３０ ｃａｓｅ ｏｆ ｍａｍｍａｒｙ ｉｆｂｅｒ ａｄｅｎｏｍａ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｍｅａｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｗｉｔｈ ｌｙｍｐｈａｔｉｃ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ血ｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ＰＴＥＮ，Ｐ１６ ｎａｄ Ｐ２７ ｗｅｒｅ ５３．７５％（４３／８０），３６．２５％（２９／８０），４５．００％（３６／８０），ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｗｅｒｅ ４６．２５％（３７／８０），６３．７５％（５１／８０），５５．００％（４４／８０）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｈｔ ｈｔｅ ｔｉｓｓｕｅ ｏｆ ｍａｍｍａｒｙ ｉｆｂｅｒ ａｄｅｎｏｍａ，ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ＜０．０１）．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｎｏｎ—ｌｙｍｐｈａｔｉｃ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ（Ｐ＜Ｏ．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｔｈｅ ａｌｌ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｍａｒｋｅｒｓ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｉｓ ｓｉｎｇｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｈｔｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｎｏｎ－ｌｙｍｐｈａｔｉｃ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｉｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｌｙｍｐｈａｔｉｃ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ａｓ ａ ｒｅｓｕｌｔ，ＰＴＥＮ，Ｐ１６ ａｎｄ Ｐ２７ ａｒｅ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ．ｗｈｉｃｈ Ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｈｔｅ ｉｎｄｉｃａｔｏｒｓ ｔｏ ｅｓｔｉｍａｔｅ ｔｈｅ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ＰＴＥＮ；Ｐ１ ６：Ｐ２７；Ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａ 乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一．占女性所有恶性肿 的发生发展过程中起重要作用，Ｐ２７基因及其表达产物在人体 瘤的２２％…，是严重威胁女性生命健康的罪魁祸首。肿瘤抑制 多种恶性肿瘤细胞增殖和分化的调控中起非常重要作用＿４。 基因ＰＴＥＮ是具有磷酸脂酶功能的肿瘤抑制基因，该基因位于 人类１Ｏ号染色体的长臂（１０ｑ２３．３），是迄今为止被发现的第一 １材料与方法 个具有磷酸脂酶活性的肿瘤抑制基因［ ．具有诱发细胞凋亡、 １．１材料收集我院１９９５年至２００５年乳腺癌根治术或改良根 调节细胞周期、抑制细胞迁移、铺展和局部粘附等功能。ＦＦＥＮ 治术病例共８０例，年龄３１～７６岁，中位年龄４８岁，有完整 在多种肿瘤中均存在突变，与肿瘤的发生、发展密切相关＿３］。 的临床资料和随访资料，术前均未进行化、放疗或内分泌治 Ｐ１６是一种ＣＤＫ４和ＣＤＫ６的特异性抑制基因，其作用机制是 疗。按照２００１年版ＷＨＯ乳腺肿瘤组织学分类方法重新分类。 与ＣＤＫ４或ＣＤＫ６直接结合，抑制周期素Ｄ与ＣＤＫ４或ＣＤＫ６的 淋巴结转移组２８例，未转移组５２例。对照组选取同一时段的 结合，机制是抑制细胞周期依赖性激酶（ＣＤＫｓ），负性调节细 乳腺纤维腺瘤３０例，年龄２１～５２岁，中位年龄３５岁。 胞周期。Ｐ２７基因是一个新发现调节细胞周期的基因，在肿瘤 １．２方法①收集样本的ＨＥ切片，在光学显微镜下，重新阅 片，选取典型病变所对应的蜡块，并对患者进行随访。②采用 收稿日期：２０１２—１０—２１ 修回日期：２０１２—１２—０７ 免疫组化ｓ—Ｐ法。用公司提供的已知阳性切片作阳性对照． 基金项目：佛山市医学科学技术研究计划项目（项目编号：２０１１２６１） ＰＢＳ代替一抗作阴性对照，每例均以ＨＥ染色切片作对照观察。 作者简介：赵宋礼，男，副主任医师。 按照试剂盒说明书进行，对８０例乳腺癌组织进行ＰＴＥＮ、Ｐ１６ ・２８４・ Ｉ曙；京医学工程２０１３年３月第２０卷第３期 和Ｐ２７染色。③染色结果判断标准：以乳腺癌和乳腺纤维腺瘤 和Ｐ２７在乳腺癌中的表达情况，进一步分析其与临床病理因素 导管内上皮细胞及肿瘤细胞中ＰＴＥＮ、Ｐ１６、Ｐ２７特定的位置出 关系，旨在探讨乳腺癌中抑癌基因ＰＴＥＮ、Ｐ１６和Ｐ２７的表达 现黄色或棕黄色颗粒为阳性染色。 １．３统计学分析采用ＳＰＳＳ ｌ １．５软件对数据进行统计学分析， 各组问阳性率的比较采用ｘ 检验，Ｐ＜０．０５视为显著性差异。 在临床评估预后中的作用。 Ｂｏｓｅ等ｌ５对乳腺癌抑癌基因ＰＴＥＮ蛋白进行检测发现抑 癌基因ＦｒＥＮ蛋白表达情况与疾病类型、ＥＲ缺失表达、淋巴 结转移密切相关。Ｌｅｅ等 在研究乳腺癌预后关系与抑癌基 ２结果 因ＰＴＥＮ时发现，ＰＴＥＮ可作为乳腺癌的一个独立预后因素。郭 ２．１乳腺癌和乳腺纤维腺瘤肿ＰＴＥＮ。Ｐｌ６和Ｐ２７抑癌基因蛋 洪斌等［７Ｊ研究结果表明，随着ＴＮＭ分期的进展、淋巴结发生 白的表达情况Ｉ￣ＦＥＮ阳性染色主要定位于细胞质中．呈棕黄色 转移，Ｐ１６蛋白表达逐渐下降。陈建武与王佩飞［ｓｊ报道Ｐ１６ 颗粒。在乳腺癌组织中的阳性表达率为５３．７５％，表达缺失率为 蛋白表达与病理类型、淋巴结转移有关，而与肿瘤大小、５年 ４６．２５％。在乳腺纤维腺瘤组织中阳性表达为９３．３３％，表达缺 生存率无明显关系。Ｋｏｕｖａｒａｋｉ等 研究发现，Ｐ２７正常组织 失率为６．６７％。 ＥＮ表达缺失率在乳腺癌和乳腺纤维腺瘤两组 比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。Ｐ１６阳性染色主要定位于细胞 核中．在乳腺癌组织和乳腺纤维组织中阳性表达率分别为 ３６．２５％和８６．６７％，两组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。Ｐ２７阳 性染色主要定位于细胞核中，在乳腺癌组织和乳腺纤维腺瘤组 织中阳性表达率分别为４５．００％和８３．３３％，两组比较有显著性 差异（尸＜０．０１）。见表１。 表１ ＰＴＥＮ．Ｐ１６和Ｐ２７在乳腺癌和乳腺纤维腺瘤中的表达情况 ２．２ ＰＴＥＮ．Ｐｌ６和Ｐ２７抑癌基因蛋白与淋巴结转移的关系Ｐ１１ＥＮ 在淋巴结未转移组中阳性率为４５．００％，在淋巴结转移组中的阳 性率８．７５％，两组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。Ｐ１６在淋巴结 未转移组和淋巴结转移组的阳性率分别为２５．００％和１１．２５％， 两组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。Ｐ２７在淋巴结未转移组和 淋巴结转移组的阳性率分别为３５．００％和１０．００％，两组比较有 显著性差异（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）。见表２。 表２乳腺癌组织中ＰＴＥＮ，Ｐｌ６和Ｐ２７抑癌基因蛋白与 淋巴结转移关系的表达情况 ３讨论 肿瘤的分子生物学研究揭示肿瘤发生的重要机制是癌基因 的激活和抑癌基因的失活。多种癌基因异常激活和／或抑癌基 因失活是乳腺癌的发生发展的累积效应结果。目前国内外关于 研究抑癌基因ＰＴＥＮ、Ｐ１６和Ｐ２７各自在乳腺癌组织中的表达 状况也有少量文献报道，但同时检测三者并且研究它们与临床 预后的关系尚未见报道。本研究主要观察抑癌基因ＰＴＥＮ、Ｐ１６ 中表达非常高，而在恶性肿瘤中的表达显著下降；表明Ｐ２７蛋 白表达情况与乳腺癌肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、病理学分 级、术后局部复发呈负相关，Ｐ２７表达水平对乳腺癌的预后有 一定的评估价值。 综合国内文献及本研究结果，提示ＰＴＥＮ、Ｐ１６和Ｐ２７在 乳腺癌组织中存在异常表达，且在淋巴结转移组和淋巴结未转 移组中表达也具有显著差异，因此，ＰＴＥＮ、Ｐ１６和Ｉ？２７可作为 乳腺癌的预后指标。 参考文献 ［１］Ｐａｒｋｉｎ ＤＭ，Ｂｒａｙ Ｆ，Ｆｅｒｌａｙ Ｊ，ｅｔ ．Ｅｓｔｉｍａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｗｏｒｌｄ ｃａｎｃｅｒ ｂｕｒ－ ｄｅｎ：Ｇｌｏｂｏｃａｎ ２０００ ＩＪＩ．／ｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，２００１，９４（２）：１５３—１５６． ［２］ ¨Ｊ，Ｙｅｎ Ｃ，Ｌｉａｗ Ｄ，ｅｔ ０１．ＦＦＥＮ，ａ ｐｕｔａｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｐｈｏｓ ｐｈａｔａｓｅ ｇｅｎｅ ｎｍｔａｔｅｄ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｂｒａｉｎ，ｂｒｅａｓｔ，ａｎｄ ｐｒｏｓｔａｔｅ ｃａｎｃｅｒ 『Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９７，２７５（５３０８）：１９４３—１９４７． ［３］ Ｇｉｍｍ Ｏ，Ｐｅｎ＇ｅｎ Ａ，Ｗｅｎｇ ＬＰ，ｅｔ ０１．ＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉＮ ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｄ ｃｙｔｏｐｌａｓ— ｍｉｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＰＴＥＮ ｉｎ ｎｏｒｍａｌ ｔｈｙｒｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅ，ａｎｄ ｂｅｎｉｇｎ ａｎｄ ｍａ— ｌｉｇｎａｎｔ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｔｈｙｒｏｉｄ ｔｕｍｏｒｓ［ＪＪ．Ａ ｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ，２０００，１ ５６（５）： １６９３—１７００． ［４］ Ｎｏｈａｒａ Ｔ，Ｒｙｏ Ｔ，１ｗａｍｏｔｏ Ｓ，ｅｔ ０１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ—ｃｙｃｌｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ ｐ２７ ｉｓ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ＥＲ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｃｉ ｎｏｍａ ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ】．Ｏｎｅｏｌｏｇｙ，２００１，６０（１）：９４—１００． ［５】 Ｂｏｓｅ Ｓ，Ｃｒａｎｅ Ａ，Ｈｉｂｓｈｏｏｓｈ Ｈ，ｅｔ ０１．Ｒｅｄｕｃｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＰＴＥＮ ｃｏｒ ｒｅｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｈｕｍ Ｐａｔｈｏｌ，２００２，３３ ｆ４１：４０５－４０９． ［６］Ｌｅｅ ＪＳ，Ｋｉｍ ＨＳ，Ｋｉｍ ＹＢ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｄｕｃｅｄ ＰＴＥＮ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｓ ａｓｓｏｃｉ ａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｐｏｏｒ ｏｕｔｃｏｍｅ ａｎｄ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎ ｉｎｖａｓｉｖｅ ｄｕｃｔａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｏｆ ｔｈｅ ｂｒｅａｓｔ［Ｊ】．Ａｐｐｌ Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍ Ｍｏｌ Ｍｏｒｐｈｏｌ，２００４，１ ２ （３）：２０５－２１０． 【７］ 郭洪斌，张培，王斌，等．Ｐ１６蛋白、Ｃ－ｅｒｂＢ一２在乳腺癌中表达状况 及生物学意义［Ｊ］．中国老年学杂志，２００５，２５（６）：７１８—７１９． ［８１ 陈建武，王佩飞．乳腺癌相关基因蛋白的表达及意义【Ｊ】．现代实 用医学，２００３，１５（１１）：２３３—２４１． ［９１ Ｋｏｕｖａｒａｋｉ Ｍ，Ｇｏｒｇｏｕｌｉｓ ＶＧ，Ｒａｓｓｉｄａｋｉｓ ＧＺ，ｅｔ ０１．Ｈｉｇｈ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｐ２７ ｃｏｒｒｅｌａｔｅ ｗｉｔｈ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ ｓｔａｔｕｓ ｉｎ ａ ｓｕｂｓｅｔ ｏｆ ａｄｖａｎｃｅｄ ｉｎｖａｓｉｖｅ ｂｒｅａｓｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ：ｒｅｌａｔｉｏｎ ｔｏ Ｅ－ｅａｄｈｅｆｉｎ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ，ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ａｃｔｉｖｉ・ ｔｙ，ａｎｄ ｐｌｏｉｄｙ ｏｆ ｔｈｅ ｔｕｍｏｒｓ ｌ Ｊ１．Ｃａｎｃｅｒ，２００２，９４（９）：２４５４－２４６５． （责任编辑：钟婷婷）