氨氮和亚硝酸氮对南美白对虾的毒性研究

２００２拄　水产养殖　第１期　氨氮和亚硝酸氮对南美白对虾的毒性研究　孙国铭霸建华仲霞铭　江苏省海洋水产研究所，南通　２２６００７）　摘要用通常的生糟毒性试验方法进行了氨氟卸亚硝酸氮对体长５ｃｍ南美自对虾的惠性毒性试验　在海　水ｐＨ８　ｌ５、水温Ｔ＝２７℃、盐度ｓ＝２０　Ｏ‰条件下．求得了两种物质对南美白对虾２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ、９６ｈ的半死浓　度，提出总氨氟和非高子氨氟对南美自对虾的安全堆度分别为２　６６７ｍｇ／Ｌ和０．２０１　ｍｇ／Ｌ，亚硝酸氟的安全进　度为５．５５１　ｍｇ／Ｌ。氨氟对南美白对虾的毒性强于亚硝酸氟，并提出降低氨氟和亚硝酸氟含量的措施。　关键词南美白对虾　氨氟亚硝酸氟惠性毒性试验　半致死浓度　安全浓度　Ｔｏ￣ｃｌｔｙ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　Ａｍｍｏｎｉａ　Ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ａｎｄ　Ｎｌ￣ｉｔｅ　Ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｔｏ　Ｐｅｎａｅｕｓ　Ｖａｎｎａｍｅｉ／Ｓｕｎ　Ｇｕｏｍｉｎｇ，Ｔａｎｇ　Ｊｌａｎｈｕａ，Ｚｈｏｎｇ　Ｘｌａｍｉｎｇ（Ｍａｒｉｎｅ　Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｊｊａｎｇｓｕ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｎｕｎｔｏｎｇ　２２６００７）／／　Ｊ．Ａｇｕａｃｕｌｔｕｒｅ－２００２．１：２２—２４　Ａｅｕｌｅ　ｔｏｘｉｃｉｔｅ　ｌｅｓｔ　ｏｆ　ａｍｍｏｎｉａ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ａｎｄ　ｎｉｔｒｉｔｅ　ｍｔｒｏｇｅｎ　ｌ０　Ｐ　ｒＩｎｅ出　Ⅲｍ　Ｉ　ＷａＳ　ｍａｄｅ　ｂｙ　ｕ　“ｇ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｅｄ　ｏｆ　ｕｓｕａｌ　ｂｌｏｌｏｇｉｃａｌ　ｔｏｘｉｃｉｔｙ　ｌｅｎ．ｔｈｅ　２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ、９６ｈ　ｍｅｄｉａｎ　ｌｅｄｕｄ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　ｔＯ　Ｐｅａａｅｔｔｓ　Ｖａｎ—　ｎａｍｅ／ＷａＳ　ｆｏｕｎｄ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｅａｗａ￣ｒ　ＤＨ　８．０５、Ｔ＝２７℃、Ｓ＝２０．０‰ｔｒａｔｌｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ａｍｍｏａｉａ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　．Ｉｔ　Ｗ，Ｋ８　ｓｈｏｗｎ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｓａｆｅ　ｅｏｎｃｅｌｌ—　ｎｏｎｉｏｎｉｃ　ａｍｍｏｎｉａ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｓｅｐａｒａｔａｌｙ　ｉｓ　２．６６７ｍｇ／Ｌ　ａ．ｄ　０　１６２ｍｇ／Ｌ．ｎｉｔｒｉｔｅ　ｎｉ—　ｔｒｏｇｅｎ　ｉｓ　５．５５１　ｍｇ／Ｌ．Ｔｈｅ　ｔｏｘｉｘｌｔｙ　ｏｆ　ａｍｍｏｎｉａ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｔｏ　Ｐｅｎａｅ￣Ｖａｎｎａｍｅｉ　ｉｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｎｉｔｒｉｔｅ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　Ｔｈｅ　ｎ　ａ—　ｓｕｒ　ｓ　ｏｆ　ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ａｒ　Ｋｅｙ　ｗｏｒ出ａ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　Ｍ　ｉｔｎｒｉｔｅ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　ｗｅｒｅ　ｐｕｔ　ｆｏｒｗａｒｄ．　Ａｍｎｍｎｉ￣ｔ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　Ｎｉｔｒｉｔｅ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ　Ａｃｕｔｅ　Ｉｏｘｉｅｉｔｙ　ｔｅｓｔ　Ｍｅｄｉａｎ　ｌｅｔａｌｈ　Ｐｅｎａｅ￣　ＣＯＩ＇Ｒ￣ｎｔｒａｔｉｏｎ　Ｓａｆｅ　ＣＯｌｉＣ㈣ｔｒａｔｉ　ｎ　南美白对虾由于具有抗病力较强的特　点，近年来在我国沿海和内地，其养殖生产有　了较快发展．但还是不同程度受到病害困　Ｉ　材料与方法　１．Ｉ　试验材料　２００１年８月份在江苏省海洋水产研究所　养殖试验场进行了本试验。取该场养殖池内　体质健壮、大小均匀、规格基本一致、平均体　长５ｅｍ的南美白虾，在室内用试验海水暂养　２天后试验。试验海水为该场经沉淀、消毒、　曝气的当地自然海水，试验时ｐＨ８　１５、水温　２７℃、比重１．０１３、盐度２０．Ｏ‰、溶解氧　扰。特别是在夏季高温时，水体中积累了较高　浓度的氨氮和亚硝酸氮，往往发生白对虾死　亡。是否是氨氮和亚硝酸浓度过高所致？其浓　度控制在多大范围内合适？为此，我们进行了　氨氮和亚硝酸氮对南美白对虾的急性毒性试　验，以找出其安全浓度，为加强养殖期的水质　管理、促进养殖生产稳定健康发展提供科学　依据。　７．Ｏｗｇ／Ｌ，氨氮、亚硝酸氮和余氯均末检出。　试验容器为直径２７ｃｍ、高１４ｅｒａ的无毒无昧　收稿日期—２００１—０４—０９　２２一　维普资讯 http://www.cqvip.com

２００２仨　塑料盆。　１　２试验方法　水产养殖　第１期　丧１　氨氟对南美白对　的息性毒性试验结果　根据预试验结果确定试验液氨氮（ＮＨ　～　Ｎ）及亚硝酸氮（ＮＯ　一Ｎ）浓度的上、下限，然　后按等对数间距…分别设７个（ＮＨ　．Ｎ）和８　个（ＮＯ　一Ｎ）浓度组及一个对照组，每一浓度　均设两个平行组。以分析纯ＮＨ　ＣＬ和ＮａＮＯ　用万分之一分析天平准确称量配制成所设尝　试浓度的试验液。用比色法测定调整其浓　度。每盆盛试验液５　０００ｍｌ，并放入试验虾１０　尾，塑料盆用网遮盖好以防虾逃逸。为使试验　液中ＮＨ　一Ｎ和ＮＯ　一Ｎ浓度保持稳定并有　充足的溶氧，试验期间连续曝气，每隔１２ｈ吸　污一次．及时剔除死亡个体．每隔２４ｈ换水一　次，换水量为１００％，并按时监测各试验液中　ＮＨ，～Ｎ、ＮＯ　—Ｎ浓度以及水温、ｐＨ值。定时　观察白对虾的活力及存活情况，记录２４ｈ、　４８ｈ、７２ｈ、９６ｈ白对虾的死亡尾数。　将试验结果按直线内插法求出两种毒物　对南美白对虾的２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ、９６ｈ的半致死　浓度ＬＣ一“，并按下式求出其安全浓度ｃｓ：　Ｃｓ—Ｏ．１×９ｆｉｈＬＣ　。　注：袁中数据为两翅平行试验姑果平均值　死亡，在９６ｈ内只有１尾死亡。但当总氨氨浓　度达到并超过２６．６７ｍｇ／Ｌ后，虾的７２ｈ和　９６ｈ死亡率剧增，表明氨氮浓度递增至一定　敏感值时，南美白对虾的耐受性剧烈下降，便　引起大量死亡。　根据试验结果，按直线内插法求得总氨氮　对体长５ｅｍ左右南美白对虾的２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ、　９６ｈ的半致死浓度分别为６２．２３ｍｇ／Ｌ、　４０．７４ｍｇ／Ｌ、３１．４４ｍｇ／Ｌ、２６．６７ｍｇ／Ｌ．安全浓　度为２．６６７ｍｇ／Ｌ。由转换公式得到相应的非离　子氨氮２４ｂ、４８ｈ、７２ｂ、９６｝２的半致死浓度分别　为４．６８６ｍｇ／Ｌ、３．０６８ｍｇ／Ｌ、２．３６８ｍｇ／Ｌ、　非离子氨氮（Ｎ地一Ｎｍ）在总氨氮（ＮＨ，一Ｎｔ）　中所占的比例，与ｐＨ值、水温及盐度有关。测　出总氨氮后，可按下式求出非离子氨氮浓度：　ＣＨ　一　一ＣＨ　一Ｎｔ／Ⅱ＋ａｎｔ１］ｏｇ（Ｄ　ｋａ　一ｐＨ）］　Ｄｋ　．２　４　５＋０　Ｏ０　２９４雏＋ｏ．０３２４　９８－Ｔ）　２．００８ｍｇ／Ｌ，安全浓度为０．２０１ｍｇ／Ｌ。　Ｚａｎｇ　Ｗｅｉｌｉｈｎｇ等　研究指出，非离子氨　氮对中国对虾幼虾（Ｌ＝２　６１ｅｍ）的２４ｈ、４８ｈ、　和９６ｈ的半致死浓度分别为２．８０ｍｇ／Ｌ、　１．６７ｍｇ／Ｌ和０．９７ｍｇ／Ｌ．安全浓度为９．７×　式中，ｐｋａ　为ＮＩ－Ｉ，在温度为Ｔ（Ｔ：　２７３＋ｔ）、盐度为ｓ的海水中的离解常数。　２结果与讨论　１０～ｍｇ／Ｌ。周光正　研究指出．非离子氨氮对　斑节对虾后期幼虾的安全浓度为０．１０４ｒａｇ／　Ｌ。本试验受试虾为Ｌ＝５ｃｍ的南美自对虾．它　２．１　氨氮对南美自对虾的急性毒性作用　氨氮对南美白对虾的急性毒性试验结果　见表１。从表１可看到，在一定试验时间内，氨　的半致死浓度均高于中国对虾和斑节对虾上　述相应值，安全浓度也较中国对虾和斑节对　虾高约２倍。可见，南美白对虾对氨氮的耐毒　能力强于中国对虾和斑节对虾。　２．２　亚硝酸氮对南美白对虾急性毒性作用　亚硝酸氮对南美白对虾的急性毒性试验　结果见表２。从表２可看到．与氨氮的急性毒　氮浓度越高，虾的死亡数也越多，说明氨氮毒　性作用越强；同一浓度组随着试验时间延长，　虾的死亡数也逐渐增加。从表１还可以看出．　当总氨氮浓度低于２６．６７ｍｇ／Ｌ（￣离子氨氮　２．００８ｍｇ／Ｌ）时，在试验的７２ｈ内，未见有虾　维普资讯 http://www.cqvip.com

２００２拒　水产养殖　第１期　性作用相似，亚硝酸氮浓度越高，在一定试验　时间内，虾的死亡数增加，说明亚硝酸氮毒性　作用增强；同一浓度组随着试验时间延长，虾　的死亡数也逐渐增加。从表２中也可看出，当　亚硝酸氮浓度低于５５．５１ｍｇ／Ｌ时，在试验的　７２ｈ小时内，未有虾死亡，只是晨９６ｈ内有２　总氪氮中所占的比例随口Ｈ值和水温的升高　而增大　亚硝酸氮是三态氮中不稳定的中间　形式，溶氧充足时，在硝化菌的作用下可转化　为无毒的硝酸氮，而在缺氧条件下在反硝化　菌的作用下，又可能转化为毒性更强的氨氮。　据此，我们认为采取以下措施，将能有效地降　养殖水体中氮氮和亚硝酸氮含量：（１　Ｊ选择适　宜的放养密度，避免放养密度过高。（２　Ｊ控制　投饵量，采取少量多次方式，以减少残饵。（３）　尾死亡。当亚硝酸氮浓度达到５５．５１ｍｇ／Ｌ后，　虾的死亡数开始增加，这说明南美白对虾对　亚硝酸氮也有一敏感值，只是敏感程度没有　氨氮明显。根据试验结果，按直线内插法求得　控制ｐＨ值和水温在适宜范围内，避免ｐＨ值　亚硝酸氮对体长５ｅｍ左右南美白对虾的２４ｈ、　４８ｈ、７２ｈ、９６ｈ的半致死浓度分别为　２１２．１６ｍｇ／Ｌ、　１３１．５７ｍｇ／Ｌ、８５　４１ｍｇ／Ｌ、　５５　５ｌｍｇ／Ｌ．安全浓度为５．５５ｌｉｎｇ／Ｌ。与氨氮　对南美白对虾的急性毒性作用相比，亚硝酸　氮对南美白对虾的半致死浓度和安全浓度均　高于氨氮的半致死浓度和安全浓度。也就是　说，氨氮对南美白对虾的毒性强于亚硝酸氮。　表２　亚硝酸氟对南美白对虾的急性毒性试验结果　注：表中数据为两蛆平行试验结果平均值　２．３　降低养殖水体中氨氮和亚硝酸氮含量　的措施在养殖池塘中，对虾排泄物、残饵等　的腐烂分解都会产生氨氮和亚硝酸氮。总氨　氮中有毒害作用的主要是非离子氨氮　１，它在　一２４一　和水温过高而使毒性强的非离子氨氮比例上　升。（４）保证足够的曝气时间，保持充足的溶　解氧。（５）当氨氮和亚硝酸氮含量升高时，逐　渐加大换水量，使其保持在安全浓度范围　内。（６）在集约化养殖条件下，应增设适合于　水质净化的菌群，通过生物的转化作用来降　低氨氮和亚硝酸氮的含量。在净化区种植水　生植物，通过水生植物来吸收氨氮和硝酸氮，　也不失为效果好、投资省的好方法。　３　结语　３．１　氨氮与亚硝酸氮对南美自对虾均有致　毒作用，氨氮毒性强于亚硝酸氮。　３　２在海水ｐＨ８．１５、水温２７℃、盐度２０．０　‰条件下，总氮氮和非离子氨氮对南美白对　虾的安全浓度分别为２．６６７ｍｇ／Ｌ和　０．２０１ｍｇ／Ｌ，亚硝酸氮对南美白对虾的安全　浓度为５．５５ｌｍｇ／Ｌ。　参考文献　［１］郜擞云，翁恶琪，环境毒理学概论，厦门大学出版　社．１９９３．５７—６０．　【２１　ＺａｎｇＷｅｌｌｉｎｇ　ｅｌ　ａｌ，Ｔｏｘｉｃ　ｅｆｅｃｔｓ　０ｆｚ　、ｃ　、ｃｆ】］　ａｎｄ　Ｍ　０ｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｄｒ椰ｎ　Ｃ　ｈｉｎ．Ｊ　０ｃｅａｎ　Ｌｉｍｏｌ　１９９３，１１ｆ３）：２５４—２５９　【３］中华人民共和国海水水质标准，ｃＢ３ｏ９７一ｌ９９７。　【４Ｊ周光正，氨和亚硝醢盐对对虾幼悼的毒性，海洋期　滔通报．１９９１（２）：９５—９８＝　【５　Ｊ减雏玲等，亚硝酸盐和氨和对罗民沼虾幼体的毒　性，上海水产太学学报．１９９６（１）：Ｉ５—２２