《操作步骤》
1、过滤:严格过滤色谱醇流动相,根据需要选择不同的滤膜。
2、超声:对抽滤后的流动相进行超声脱气20~30分钟,最好将滤芯放入流动相中一起超声。3、软件安装:LC210液相色谱仪器安装完成后,打开电脑,安装色谱工作站,点击LC210安装光盘的readme文本,按照安装说明逐步安装,安装完毕后,找到C:\\WINDOWS\\system32\\HWFrequence,更改20,20为12,12后,并保存。
4、电源开关顺序:【电脑→色谱柱恒温箱→高压恒流泵→紫外检测器】。听到蜂鸣器响两声后,表示机器通信正常。等待紫外检测器进去采集模式后,打开桌面【LC210液相色谱仪工作站V3.0.3】上位机软件
5、排气:管路连接完毕后,扭开放空阀,点击软件中【
6、检查通信:打开软件后,观察氘灯能量(如S:500,R:400)或者基线是否有数据,在电脑软件控制栏里设置波长、流量、恒温箱温度,观察仪器是否按照设置的命令执行。
7、检测管路:设置流量1ml/min,观察压力(一般情况下,应该在3.5~7MPa),管路是否有阻塞、漏液现象,废液排出口是否畅通。
8、清洗六通进样阀:使用微量平头进样针,抽取流动相,分别在六通进样阀LOAD、INJECT状态下,注入流动相后,来回扳动一次,清洗3次;
9、测试同步性:点击【
10、基线平衡:在软件控制栏里,点击【
11、进样分析:观察基线稳定后,开始进样,首先点击上位机【
即可等待观察实验结果。菜单栏可以设置图谱是否自动保存、保存路径、保存时间,亦可点击【
12、图谱处理:找到保存的HW格式的文件,点击进去后,点击【
13、清洗关机:清洗六通进样阀,另把注射器等工具清理整洁。先关检测器,泵不要关掉,应改用流动相冲洗泵,不同的流动相冲洗时间不同,一般冲洗30min以上,若是缓冲盐作流动相应先用20%甲醇水溶液冲洗30min,再用80%甲醇水溶液冲洗30min最后用纯甲醇冲洗30min,然后关闭液相泵;
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