专利名称:含有IGF2b基因的慢病毒载体的构建方法专利类型:发明专利发明人:袁新华,董在杰,徐跑申请号:CN201110155364.3申请日:20110610公开号:CN102250912A公开日:20111123
摘要:本发明涉及一种含有IGF2b基因的慢病毒载体的构建方法,包括以下步骤:获取鲤的肝脏组织,提取RNA,后反转录为cDNA,根据基因库中公布的鲤IGF2b基因序列开放阅读框设计引物;在目的片段的5’端和3’端设计内切酶,测序检测是IGF2b基因后,用BamHI和NheI双酶切含有IGF2b基因的PCR回收产物及载体pLenti6.3-IRES-EGFP,然后回收酶切后的载体pLenti6.3-IRES-EGFP及IGF2b基因片段;将酶切回收的IGF2b基因片段与pLenti6.3-IRES-EGFP连接,获得含有IGF2b基因的慢病毒载体。本发明的有益效果为:无毒性且不易诱发宿主免疫反应,安全性较好,不仅能感染分裂细胞,且能转染终末分化细胞和非分裂细胞;是获取转基因鲤的一项关键技术,可在短期内确定具有目的基因的品系,缩短鱼类育种时间。
申请人:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
地址:214081 江苏省无锡市滨湖区大浮镇漆塘北村1号
国籍:CN
代理机构:北京纽乐康知识产权代理事务所
代理人:史静
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