药・剐啬哆＝ｊ＝ 。ｍ ｍ 乃 拓 ｄ ，２０ ６ 。ｔ２９Ⅳ０川 不同炮制方法对川楝子中 川楝素和异川楝素含量的影响 郭灿，曾莉 成都市第五人民医院，四川成都６１１１ ３０ ［摘要］目的：通过ＨＰＬＣ法比较川楝子不同炮制品中川楝素和异川楝素含量的差异。方法：采用ＨＰＬＣ 法对川楝子生品及各炮制品，以川楝素和异川楝素作为指标，进行含量测定。色谱条件：色谱柱（４．６ ｉｎｍｘ ２５０ ｍｍ，５ ｍ）；流动相：乙腈一水（３０：７Ｏ）；检测波长２１ ０ ｎｍ；柱温３５℃；进样量１ ０ ；流速１．０ ｍＬ／ｍｉｎ。结果： 炒品相对其他炮制品种而言，川楝素和异川楝素含量较高。结论：不同炮制方法中，炒品中川楝素和异川楝素 含量下降幅度最小。 ［关键词］川楝子；川楝素；异川楝素；炮制 ［中图分类号］Ｒ２８４ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１ ００４－６８５２（２０１６）１１－００３０—０３ Ｉｍｐａｃｔ ｏｆ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ Ｍｅｔｈｏｄ ｏｎ Ｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ ａｎｄ Ｉｓｏｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ Ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ＣｈｕａｎＬｉａｎＺｉ ｂｅｒｒｙ Ｆｒｕｉｔ ＧＵＯ Ｃａｎ，ＺＥＮＧ Ｌｉ Ｔｈｅ聊 Ｐｅｏｐｌｅ ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＣｈｅｎｇｄｕ，Ｃｈｅ，￣ｇｄｕ ６１１１３０，Ｃｈｉｎａ ＾ｂｓｔｒａｃｔ ０ｂｉｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｃｏｍｐａｒｅ ａｎｄ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ ａｎｄ ｉｓｏｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ ＣｈｕａｎＬｉａｎＺｉ ｂｙ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ ａｎｄ ｉｓｏｔｃＩｏｓｅｎｄａｎｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｌｅｖｅｌ ｉｎ ｒａｗ ａｎｄ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｐｒｅｐａｒｅｄ ＣｈｕａｎＬｉａｎＺｉ ｗｅｒｅ ｔｏｏｋ ａｓ ｉｎｄｅｘ ａｎｄ ｔｅｓｔｅｄ ｂｖ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ。Ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ： ｃｒｏｍａｔｈｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ（４．６ ｍｍｘ２５０ Ｉｎ／ｎ，５ ｍ），ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ：Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ・ｗａｔｅｒ（３０：７０），ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ２１０ ｎｌＴｌ，ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ３５℃，ｓａｍｐｌｅ ｓｉｚｅ ｗａｓ １０ Ｌ’ｆｌｏｗ ｖｅｌｏｃｉｔｙ ｗａｓ １．０ ｍＬ／ｍｉｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ： Ｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ ａｎｄ ｉｓｏｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ ＣＯｎｔｅｎｔ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ ｆｒｉｅｄ ＣｈｕａｎＬｉａｎＺｉ ｔｈａｎ ｏｔｈｅｒｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ ａｎｄ ｉｓｏｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｍｉｎｉｍｕｍ ｉｎ ｆｒｉｅｄ ＣｈｕａｎＬｉａｎＺｉ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｄｉｉｅｒｅｎｔｆ ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ ｍｅｔｈｏｄｓ． Ｅｅ】— ８ ＣｈｕａｎＬｉｎＺｉａ；ｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ；ｉｓｏｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ；ｐｒｏｃｅｓｓ Ｊｌｉｂ子，又名楝实、金铃子，为楝科Ｍｅｌｉａｃｅａｅ 方法对川楝子中川楝素和异川楝素含量影响的程 度。川楝子中川楝素的结构是半缩醛结构，以互变 异构体存在，并不断转换，所以要以两个峰面积之 和计算 －ｓ－。近年来，对于川楝子的研究主要侧重 于三萜类成分川Ｉ楝素的药理作用及其配伍减 毒［ ］方面，以及异川楝素的杀虫作用。 植物川楝Ｍｅｌｉａ ｔｏｏｓｅｎｄｃｍ的干燥果实，冬季果实 成熟时采收，是常用的理气止痛药，主要产地为四 川、湖北、湖南、贵州等地，因为入药以四川产的药 材为道地药材，因此称为川楝子。（（本草纲目》记载 该药入肝、胃、小肠经，性味苦寒，有小毒，并有酸 味。《中国药典》中记载其具有疏肝泄热、行气止 痛、杀虫之功效。用于肝郁化火，胸胁、脘腹痛、虫 积腹痛、疝气痛…。药典收录的炮制品只有川楝 子和炒川楝子两种。生川楝子有毒，传统入药常需 要炮制，炮制后能降低川楝子毒性，而且能增强川 楝子的理气止痛作用［ 。传统的炮制方法有炒焦 法、盐制法、醋制法等，因此对川楝子生品、炒品、 盐炙品、醋炙品进行含量测定，分析比较不同炮制 『 材料 １．１仪器 日本岛津高效液相色谱（ＨＰＬＣ）仪：包 括ＬＣ－２ＯＡＴ高压输液泵、ＳＰＤ－２０Ａ紫外检测器、 Ｎ２０１０色谱工作站；Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ－Ｃ１８色谱柱； ＲＥ一５２１０旋转蒸发仪（郑州长城科工贸有限公 司）；ＣＰ２２５Ｄ十万分之一电子天平（德国赛多利斯 集团）；ＤＺＦ－６０５０一ＭＢＥ型真空干燥箱（上海博讯实 业有限公司医疗设备厂）；高速万能粉碎机（永康 中国科技 ＼ ，一３０ ／技ｍ翱利 而｛ ．ｊｒＩ羞 ２ 年第２９卷第ＪＪ期 市天祺盛世工贸有限公司）；ＫＯ一２２０型医用超声 波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；ＤＫ—Ｓ２型 电热恒温水浴锅（郑州长城科工贸有限公司）； ＺＫＪ一１０１型循环水真空泵（郑州长城科工贸有限 公司）。 方药・剐利互 分别精密称取川Ｉ楝 ２．３溶液制备 ２．３．１标准品溶液的制备素和异川Ｉ楝素对照品各２ ｍｇ，加１０ ｍＬ色谱级甲 醇溶解，用０．２２ ｍ微孔滤膜滤过后，转移定容至 ｌ０ ｍＬ量瓶中，作为标准品储备液。 ２．３．２供试品溶液的制备川楝子生品和各炮 １．２试药川Ｉ楝子饮片（成都中医大惠康中药饮 片公司，批号：１００３０１）：川Ｉ楝素标准品（批号： １１１８４２）；异川Ｉ楝素标准品（中国食品药品检定研 究院，批号：２００５０２）；甲醇、乙腈均为色谱纯；水为 制品粉碎、过４０目筛，干燥后的各川Ｉ楝子炮制品 粉末精密称定约１．５ｇ，放置到具塞锥形瓶中，加 入２５ ｍＬ色谱甲醇，称量，记录数据，开始超声提 超纯水；其他试剂均为分析纯；炮制辅料（盐、米 取３０分钟，放冷，再称一次重量，用甲醇补足到超 醋）：市售。 声前的重量，摇匀，用０．２２ ｍ微孔滤膜过滤。滤 己方法与结果 液定容至２５ ｍＬ量瓶中，摇匀，即得。 ２．１ 川楝子炮制品的制备生品：称取已经捡去 ２．３．３线性关系考查取适量川楝素和异川楝 杂质后的川楝子２００ ｇ，晒干，切厚片。清炒品：称 素对照品溶液，以甲醇配制为浓度０．５４０、０．２７０、 取已经捡去杂质的川楝子２００ ｇ，晒干，切厚片，置 ０．１３５、０．０６７ ５、０．０３３ ７５和０．０１６ ８７５ ｍｇ／ｍＬ的 热锅内，用中火翻炒，炒至果皮微黄，取出，放冷。 梯度，在已知色谱条件下进行测定，以峰面积和浓 醋制品：称取已经捡去杂质的川楝子２００ ｇ，晒干， 度进行回归处理，得川Ｉ楝素回归方程： 切厚片，加入５０ｍＬ酿造米醋浸润，待米醋吸尽后， Ｙ＝２ ０６４．２ ＋ｌ ０３４．３（ｒ＝０．９９９ ９），在０．０１６ 用文火炒至色泽微黄，取出，放冷。盐炙品：称取已 ８７５～２．７０ ｐ．ｇ范围内呈现良好的线性关系。异川Ｉ 经捡去杂质的川楝子２００ ｇ，晒干，切厚片，加２０％ 楝素：Ｙ＝Ｉ３４．４Ｘ＋２６７．５ ０．９９９ ９），在０．０１６ ８７５－ 盐，加适量水稀释拌润，待盐水吸尽后，用文火炒 ２．７０ ｇ范围内线性关系良好。 至色泽微黄，取出，放冷。 ２．３．４精密度试验重复进样标准品混合溶液６ ２．２川楝素和异川楝素的含量测定 次，进行含量测定，结果ＲＳＤ分别为０．１６２％、 ２．２．１ 色谱条件色谱柱Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ—Ｃ１８ ０．１３３％，精密度结果良好。 柱（４．６ ｍｍｘ２５０ ｍｉｌｌ，５ ｍ）；流动相：乙腈一水（３０：７０）； ２．３．５稳定性试验同一样品分别于０、２、４、６、 柱温３５℃；检测波长２１０ ｎｍ；流速ｌ＿０ ｍＬ／ｍｉｎ；进 ８、１２小时进样，测得川Ｉ楝素和异川Ｉ楝素峰含量， 样量ｌ０ 。川楝素和异川楝素的对照品和川楝 计算ＲＳＤ为２．３４１％、２．０３２％，稳定性结果良好。 子样品中川楝素和异川楝素分离的色谱图见图１。 ２．３．６ 重现性试验按照上述供试品溶液的制 备方法，取一批样品分别平行制备６份供试品溶 液，测定川１楝素和异川Ｉ楝素的含量，计算ＲＳＤ为 １．５２２％、１．８３１％，结果表明重现性良好。 ２．３．７加样回收率试验精密称定川楝子炒制 品６份各１．５ ｇ，分别精密加入１ ｍｇ的川Ｉ楝素对照 品，按含量测定方法进行测定，计算川楝素和异川 楝素加样回收率，结果平均回收率分别为９８．４６％、 １ ５ ２０ ２６ ９６．７８％，ＲＳＤ分别为１．０９６％、１．２３３％。 ２．３．８样品含量测定按上述色谱条件，测定川Ｉ Ｂ 楝子样品中川楝素和异川楝素的峰面积，分别计 算川楝素和异川Ｉ楝素的含量。结果见表１。 表１川楝子生品及不同炮Ｓｔｉｌｌ＠Ｉｌｌ楝素和异川檩素的含量（ｎ＝６） １５ ２０ ２５ 注：Ａ为对照品；Ｂ为样品；１—２为川楝素；３为异川楝素。 图１ 川Ｉ楝子样品与对照品的ＨＰＬＣ图 十固斜技 ＼ ３ Ｉ／— 技ｍ期彳｛ 方 药－剐利互笔 。 ￡ ｍ如 ， 参考文献 ‰ ｄ ’２０ ６ ．２９Ⅳ０ ］讨论 中药与其他植物药的重要区别特征是中药材 的炮制工艺，川楝子是有毒中药材，按传统入药要 求，应该用炮制品，Ｊｌｉｂ素是川楝子众多成分之一。 川Ｉ楝素既是活性作用成分，也是毒性成分。异ＪＩ『楝 素主要有杀虫作用 “］。本研究发现，由于川楝素 紫外吸收不强，因此只能在末端吸收处进行测量， 结果造成准确度下降。通过比较不同炮制方法样 品中川楝素和异川楝素含量，发现各炮制品中，生 品中川Ｉ楝素和异川楝素含量最高，其他经过炮制 后Ｊｆｉｂ素和异川楝素含量均有所下降，炒品的综 合指标均优于其他炮制品，为规范炮制品品种提 供了科学依据。其中醋品与盐品的川楝素和异川 楝素含量较低，可能炮制过程中闷润时间过长，炮 制时加热需较长时间，且加大火候才能干燥，因此 使成分破坏。另外各种炮制品中所含川楝素含量 醋品最低，表明在高温下，酸对川楝子中川楝素含 量有较大影响。但是川楝子成分复杂，虽然川楝素 是其主要活性成分，但不能以单个成分含量判断 产品质量［】 。 不同炮制品炮制前后的成分含量有变化，与 其功效不同有一定关系。炒川楝子可降低苦寒之 性、毒性，能疏肝理气止痛，适用于肋胁痛、胃脘痛； ［１】 国家药典委员会．中华人民共和国药典：一部［Ｍ】．北京：中 国医药科技出版社，２ ０１Ｏ：３９． ［２］纪青华，陆兔林．川Ｉ楝子不同炮制品镇痛抗炎作用研究［Ｊ］． 中成药，１９９９，２ｌ（４）：１８１—１８３． ［３】钟炽昌，谢晶曦，陈淑凤，等．川楝素的化学结构［Ｊ］．化学学 报，１９７５，３３（１）：３５—４７． 【４】舒国欣，梁晓天．关于川楝素的化学结构的修正【Ｊ］．化学学 报，１９８０，３８（２）：１９６－１９８． ［５］窦志英，李迎春，郑蓓蓓．醋烘制川楝子炮制工艺［Ｊ］．天津 中医药，２０１１，２８（４）：３３８－３４０． ［６］李振华，鞠建明，华俊磊，等．中药川楝子研究进展［Ｊ】．中国 实验方剂学杂志，２０１５，２１（１）：２１ ９－２２ ３． 【７】程蕾，雷勇，梁媛媛，等．川楝子不同提取部位药效及毒性的 比较研究［Ｊ］．中药材，２００７，３０（１０）：１２７６－１２７９． ［８］刘红亚，崔红梅，周钧．ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定川楝子药材中川楝素 的含量［Ｊ］．世界科学技术：中医药现代化，２００８：１０（３）：５２—５４． ［９］李丰，朱训，陈敏，等．川Ｉ楝子化学成分研究［Ｊ］．中药材，２０１ ０， ３３（６）：９１０－９１２． 【１０】纪从兰，桂双英，左坚．不同川楝子炮制品的比较研究【Ｊ】． 现代中药研究与实践，２Ｏ１２，２６（２）：５卜５ ３． ［１１】Ｘｕ Ｈ，Ｚｈａｎｇ儿．Ｎａｔｕｆａ１ ｐｒｏｄｕｃｔ ｓ—ｂａｓｅｄ ｉｉｌｓｅｃｔｉｃｉｄａ１ ａｇｅｎｔｓ ９ ｄｅｓｉｇｎ，ｓｅｍｉｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ ａｃ— ｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ２８－ａｃｙｌｏｘｙ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ ｔｏｏｓｅｎｄａｎｉｎ ａｇａｉｎｓｔ Ｍｙｔｈｉｍｎａ ｓｅｐａｒａｔａ Ｗａｌｋｅｒ ｉｎ ｖｉｖｏ［Ｊ】．Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ，２０１１，２１（７）：１９７４—１９７７． ［１２］周浓，杨敏，白志川，等．ＨＰＬＣ测定不同来源川楝子中阿魏酸 的含量［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２０１２，１８（３）：８４—８７． 【ｌ３］王尚科．川楝子应加醋拌炒一项的建议【Ｊ］．时珍国药研究， １９９７，８（１）：５７． 醋川楝子行气散痞，能增加疏肝理气止痛功效１３－１４］ 盐川Ｉ楝子能引药下行，长于疗疝止痛。各炮制品在 药理中均表现出抗炎作用，其中盐制品的镇痛抗 炎作用效果最好［１引。 本研究比较川楝素和异川楝素含量的差异， 结果表明ＪＩｌ楝子饮片质量受到炮制方法的影响， 但炮制过程中，成分如何转变及炮制原理等深入 问题仍未解决，需进一步深入研究。 ［１４］周乐华，李迎春，寞志英．川楝子及其炮制品中川楝素含量 测定研究【Ｊ】．天津药学，２０１１，２ ３（１）：２０—２２． ［１５】纪青华，陆兔林．川楝子不同炮制品镇痛抗炎作用研究［Ｊ】． 中成药，１９９９，２１（４）：１８１－１ ８３． 收稿日期：２ ０１ ５－１０－２ ７ 作者简介：郭灿（１ ９６９一），女，副主任中药师。研究方向：中药 文后参考文献著录格式示例（二） 含外文期刊） 任者（作者为３位以下全部著录，３位以上著录前３位，后加“，等”） （期）：起页一止页． ，刘组舜．家兔迷路破坏眼震电图描记［Ｊ］．中华耳鼻喉头颈外科杂志 ｒｂｉｎ ＭＢ，Ｍｅ１ｉｃｋ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｔｅｒ ｓｔｉｔｉａ１ ｅｘｃｉｔａｔｏｒ ａｆｔｅｒ ｃｏｒｔｉｃａｌ ｃｏｎｔｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ【Ｊ］．Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ，２００２，９３５（１／２） 式中文全文文献格式的设计与研究［Ｊ／０Ｌ］．情报学报，１９９９，１８（４）：１一 ｏｄｉｃａ１．ｗａｎｆａｎｇｄａｔａ．ｃｏｍ．ｃｎ／ｐｅｒｉ０ｄｌｃａ１／ｑｂｘｂ／ｑｂｘｂ９９／／９９０４０７．ｈｔ ．肝脏言行甲流的超生造影表现［Ｊ／ＣＤ］．中华医学超声杂志：电子版，２ ｃ ０ 、 十国科技 ＼ ，一ＳＺ／ ／ 拉ｍ翱利