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使用等位基因特异的反应性引物的核酸扩增方法[发明专利]

2021-04-01 来源:个人技术集锦
专利内容由知识产权出版社提供

专利名称:使用等位基因特异的反应性引物的核酸扩增方法专利类型:发明专利发明人:安城皖,吴泰祯申请号:CN201380077114.X申请日:20130416公开号:CN105247071A公开日:20160113

摘要:本发明涉及一种使用被设计成解决传统等位基因特异性PCR的问题的等位基因特异的反应性引物(ASRP)来扩增核酸的方法,更具体地,本发明涉及靶核酸的检测方法,包括具有校对活性的DNA聚合酶和与靶核酸互补的碱基序列,其中在ASRP存在下扩增靶核酸,所述ASRP被修饰为使得位于来自与引物5’方向上不互补的核苷酸紧邻的核苷酸到位于引物5ˊ端的核苷酸的区域中的一个或多个修饰核苷酸,在3ˊ端存在不互补的核苷酸时,该不互补的核苷酸将被DNA聚合酶的校对活性除去,以使等位基因特异的反应性引物中的核苷酸不能作为聚合酶反应的引物。根据本发明的使用ASRP的检测方法由于ASRP和校对DNA聚合酶的特性而成为具有非常高特异性的技术,并且能够有效地检测包括单核苷酸多态性(SNP)在内的突变(点突变、插入、缺失)。此外,该方法也可以用于检测亚硫酸氢盐处理后的CpG甲基化的存在,或者扩增并检测DNA文库中从所需核苷酸序列开始的靶DNA。

申请人:基因特力株式会社

地址:韩国大田广域市

国籍:KR

代理机构:北京律诚同业知识产权代理有限公司

代理人:徐金国

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