．４２．疫病防控 养殖与饲料２０１４年第８期 例规模化种鸡场鸡呼肠孤病毒 网状内 皮组织增殖病病毒混合感染的诊断 王玉瑾 宋辉 朱涛 １．江苏省新沂市畜牧兽医站，江苏新沂２２１４００；２．江苏省新沂踢球山种畜场，江苏新沂２２１４１８ 目前，规模化养殖场尽管非常重视病毒性疾病 正常体重为５６０～５８０ ｇ。平均每天死亡４Ｏ一６０只，采 的免疫预防，但马立克氏病、禽白血病、网状内皮组织 取多种措施均未见好转。 增殖病、呼肠孤病毒病等依然存在，严重影响着机体 免疫系统作用的发挥，是造成多种疾病继发感染、种 鸡生产性能下降、经济效益锐减的重要因素。２０１３年 ３剖检病变 对病死鸡进行剖检发现，法氏囊严重萎缩，重 ６月，江苏某种鸡场出现鸡群发育不良、羽毛粗乱、下 量减轻；胸腺充血、出血、萎缩、水肿；肝、脾、肾、心、 痢等临床症状，经实验室检查诊断为禽呼肠孤病毒 胸腺、法氏囊、胰腺等有灰白色点状结节；腺胃病变 非常明显，大部分腺胃肿胀成球状，剖开后腺胃乳 和网状内皮组织增殖病病毒混合感染所致。 １ 发病情况 该规模化种鸡场于２０１２年１１月份分别从北 头呈针尖状出血（非弥漫性出血），水肿；其他脏器 眼观无异常。 京及聊城引进１２ ０４０套、１２ ９５０套祖代种鸡，８周 群的免疫程序见表１。 ４实验室检查 在发病鸡群中随机采集发病鸡的血清１Ｏ份， 通过ＥＬＩＳＡ方法测定鸡传染性贫血病毒（ＣＩＡＶ）、 １抗体水平 龄时出现发育不良、跛行、精神沉郁等临床症状，鸡 ４．２临床症状 呼肠孤病毒（ＲＥＯ）、网状内皮组织增殖病病毒 鸡群整体表现为发育不良，精神沉郁，食欲减 （ＲＥＶ）的抗体水平（试剂盒均购自ＩＤＥＸＸ公司）。 退或废绝，羽毛粗乱，渐进性消瘦。发病鸡下痢，粪 所监测的抗体水平见表２。 便呈水样；有的鸡跛行；部分鸡踝关节不能活动；极 通过表２可发现，在发病鸡群未免疫ＲＥＯ、 个别呈“企鹅”样；个别鸡腿部鳞片脱落。鸡群增重 ＲＥＶ的情况下，鸡群中存在ＲＥＯ、ＲＥＶ抗体，且抗 情况很不理想，体重只有４３０～４５０ ｇ，而８周龄鸡的 体阳性率分别达１００％和８０％，表明鸡群中可能存 表１ ｌ一６０日龄种鸡的免疫程序 收稿日期：２叭４—０６一ｌ５ 王玉瑾，１９６８年生，本科，高级兽医师。 养殖与饲料２０１４年第８期 疫病防控．４３． 注：“ 表示结果呈阳性；ＣＩＡＶ、ＲＥＯ、ＲＥＶ判定标准依据ＩＤＥＸＸ试剂盒说明书。 在ＲＥＯ、ＲＥＶ感染；而在该鸡群尚未进行针对ＣＩＡＶ 状内皮组织增殖病病毒引起的几种禽类的一群病 的任何免疫的情况下，ＣＩＡＶ抗体阳性率为０％，表 理综合征，如矮小综合征、淋巴组织及其他组织形 明鸡群中不存在ＣＩＡＶ感染。 ４．２病原的筛查 采集患病鸡的肝脏、脾脏、肺脏、气管、肾脏、脑 等组织，加人ＰＢＳ溶液，充分研磨制成１：５的组织匀 浆液。反复冻融３次，８ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心１０ ｍｉｎ，将 上清液转移至干净的灭菌离心管。按照Ｔｒｉｚｏｌ Ｒｅａｇｅｎｔ说明书和酚／氯仿／异戊醇法提取ＲＮＡ和 ＤＮＡ，用ＰＣＲ或ＲＴ—ＰＣＲ法检测禽流感病毒 （ＡＩＶ）、新城疫病毒（ＮＤＶ）、ＣＩＡＶ、ＲＥＯ、ＲＥＶ、传染 性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、鸡白血病病毒（ＡＬＶ）等。病 原筛查的结果见表３。 表３发病鸡群病原筛查结果 病原————一一 —————— ｌ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ＮＩ）Ｖ——————— — ———— （ ＩＡＶ 一 一 一 一 一 一 一 ＲＥＯ ＋ ＋ ＋ ＋ 一 ＋ ＋ ＋ ＲＥＶ ＋ ＋ 一 ＋ ＋ ＋ ＋ ＩＢＶ—．—．—．—．—．———— ＡＩ Ｖ 一 一 一 一 ～ 一 一 ＡＩＶ 一 一 一 一 ～ 一 一 沣：“＋”表示结果呈阳性，“一”表示结果呈阴性。 通过应用ＰＣＲ或ＲＴ—ＰＣＲ方法对病原进行筛 查，ＡＩＶ、ＮＤＶ、ＣＩＡＶ、ＡＬＶ、ＩＢＶ全部阴性，表明患鸡 群并没有上述病毒的感染；所检的７份样品中ＲＥ— Ｏ、ＲＥＶ几乎全部呈阳性，表明患病鸡群中存在 ＲＥＯ、ＲＥＶ感染。 ５诊 断 结合发病情况、临床症状、剖检病变和实验室 检查结果，可诊断该鸡群存在禽呼肠孤病毒、网状 内皮组织增殖病病毒的混合感染。 ６讨论 １）网状内皮组织增殖病是由反转录病毒科网 成的慢性肿瘤、急性网状细胞肿瘤等。ＲＥＶ可感染 火鸡、鸭、鸡和其它禽类，且呈世界分布，但并非无 处不在。 ＲＥＶ的传播方式呈现多样性，包括水平传播、 垂直传播、通过被污染的疫苗等生物材料传播等。 水平传播受宿主种类和病毒毒株的影响，通过与感 染的鸡、火鸡和鸭的直接接触而传播。有持续病毒 血症的鸡、火鸡、鸭能将感染性病毒垂直传播给后 代，但与禽白血病病毒相比，其传染率比较低。 尽管ＲＥＶ可造成巨大的经济损失，但目前尚 无商品化的疫苗用于预防。正在研究的候选疫苗主 要有表达ＲＥＶ的ｅＨＶ基因的重组禽痘病毒和转染 的ＱＴ３５鹌鹑细胞系产生的空ＲＥＶ颗粒，研究表明 鸡免疫接种后能对ＲＥＶ感染起到一定的保护作 用。目前对ＲＥＶ的防控主要是通过严格的生物安 全手段在禽类生物安全保障和ＳＰＦ动物中实现的。 商业性养禽业可借鉴控制禽白血病的方法来控制 ＲＥＶ，即通过淘汰携带病毒的种鸡的方法来消除垂 直传播，并且在能够消除水平传播的隔离条件下饲 养子代。 ２）禽呼肠孤病毒在商品禽中很常见，且大部分 毒株无致病性，但从病鸡的各种组织和器官中可分 离到禽呼肠孤病毒，这些疾病包括病毒性关节炎、 矮小综合征、呼吸道疾病、肠道疾病、免疫抑制性疾 病、吸收不良综合征等。禽呼肠孤病毒引起的疾病 很大程度上取决于宿主年龄、免疫状态、病毒的致 病性以及感染途径等；当呼肠孤病毒与其他传染性 病原体相互作用时，可使呼肠孤病毒引起的疾病和 严重程度有所不同。禽呼肠孤病毒可垂直和水平传 播，常通过机械方式传播，而且对外界环境的抵抗 力较强，因此，在现代高密度的饲养条件下，要消除 病毒感染似乎是不可能的。 良好的管理制度和生物安全措施以及免疫预 防是控制禽呼肠孤病毒感染的主要方法。目前市场 ．４４．疫病防控 养殖与饲料２０１４年第８期 种鸡群在开产前使用活疫苗可以为１日龄雏 上已有商品化的呼肠孤病毒疫苗，如ｓ１１３３株、 ２１７７株等。值得注意的是Ｓ１ １３３株与马立克氏病疫 鸡提供母源抗体的保护，降低垂直传播的可能性。 苗同时免疫１日龄雏鸡时，会干扰马立克氏病疫苗 当野毒株与商品疫苗的血清型明显不同时，建议使 的免疫效果；而无致病性的２１７７株可避免干扰马 用自家苗。 立克氏病疫苗的效果。 ＾＇ Ｉ ’ Ｉ ｌ ’ ＼ 蛋鸡生产中常用的免疫方法及注意事项 ： ： ＾ ¨ ： 蛋鸡生产中常用的免疫方法有滴鼻、点眼、饮水、气雾、注射、刺种等。弱毒苗主要用滴鼻、点眼、气： ：雾、饮水等免疫方法；灭活苗主要采取注射免疫，生产中常用胸部皮下免疫。下面详细介绍其免疫方法 ｊ及注意事项。 １气雾免疫 Ａ １）气雾免疫遵循的原则是利用气压使稀释的疫苗雾化，并均匀地悬浮于空气中，随呼吸进入鸡体： ：呼吸道。 ： ２）气雾免疫时环境温度应控制在１８—２４ ｏＣ，相对湿度在７０％左右，免疫前清水降尘。 ： ２ ３）气雾免疫前停止使用药物，气雾免疫与其他免疫间隔应不少于７ ｄ，以免产生免疫干扰；免疫前： ２后７ ｄ不得使用抗病毒药物，免疫前１ ｄ不得消毒。 ４）气雾免疫速度一般为２００ ｍＬ的疫苗要在１ ｍｉｎ内喷完。 ： Ａ＾ ５）疫苗稀释用塑料瓶、玻璃瓶等非金属器皿作容器，稀释液用量以１ ０００只鸡为单位，稀释后的： ：疫苗在１ ｈ内用完。 ６）气雾免疫方法：气雾免疫前应加大通风量并保持３￣５ ｒａｉｎ，以降低鸡舍粉尘含量、保证舍内空气： ２清新，之后要关闭舍内门窗和通风设备，气雾后１５ ｒａｉｎ再打开所有门窗和通风换气设备。 ： ２ ７）气雾免疫优点是省时省力，适用于密集饲养的鸡群；对呼吸道有亲嗜性的疫苗特别有效。缺点 ；是对鸡群应激大，可加重慢性呼吸道疾病、大肠杆菌性气囊炎的发生。 ： ；２点眼和滴鼻免疫 ； ２ 点眼免疫是将要接种鸡的头部固定在水平状态，用滴嘴向其眼内滴１滴疫苗，当疫苗扩散后放开： ｊ接种鸡。滴鼻免疫是将鸡嘴紧闭，盖住一例鼻孔，向另一侧鼻孔滴入疫苗液，吸入后放开接种鸡。滴鼻 ：时遏有鸡的鼻孔堵塞、疫苗不易吸进鼻孔内时，可换滴另一侧鼻孔。 ： ：３注射免疫 ： ２ 油苗一般采用胸部皮下注射，注射时抓鸡人员一只手抓住鸡翅、另一只手抓住双腿，将鸡固定，胸 部向上，平行抓好；注射人员用手将胸部羽毛扒开，针头呈１５。将疫苗注入，同时用拇指按压注入部 ：位，使疫苗扩散，防止漏出。 ： ２ ４注意事项 ： ２ 疫苗接种前应预先检查鸡群的健康状况，对正在发病的鸡群不宜接种疫苗（紧急预防接种除外）， ：在恶劣气候条件下也不应接种疫苗。使用疫苗时，要严格按照说明书及瓶签上的各项规定进行操作，： ２不得任意改变；同时，应进行详细登记，注明疫苗名称、批号、使用方法和剂量等。 ： ｊ 来源：河北畜牧服务网 ｔｌｔｔｌ｜ｌ－ｌ｜ＩＩｔＩｌｌＩｔｌ｜ｌＩｔＩｌｔＩｌ＿ＩｌｌＩｔｌｌＩ【｜ＩｌｌｌＩｌｔｌｔ｜ｌｌｔｌＩｔ【ＩｔｌＩｔｔｌＩｌＩＩ【ｌｌＩｌＩｔｌｌＩ