气相色谱法测定花生脂肪酸的稳定性分析

气相色谱法测定花生脂肪酸的稳定性分析

作者：王文锋 张秀华 李 昕

来源：《山东农业科学》2010年第12期

摘要：选用固定液为FFAP的石英玻璃毛细管柱，设置合适的载气柱前压、分流比及程序升温，采用气相色谱法测定花生主要脂肪酸，平行测定的相对标准偏差为0.67％～2.11％，而且主要脂肪酸出峰时间不到10min，只需13min即可完成一次分析。 关键词：气相色谱法；脂肪酸；稳定性

中图分类号：Q503；S565.2 文献标识号：A 文章编号：1001—4942(2010)12—0085—02

油脂中的脂肪酸一般是以甘油酯形式存在，沸点较高，一般采用气相色谱法进行分离和测定。目前对植物油、鱼油、海洋生物的脂肪酸测定已有许多相关文献。气相色谱法测定脂肪酸的稳定性是准确判定脂肪酸的关键步骤。本试验根据花生中脂肪酸的主要成分设置了最佳测定条件，可为分析植物脂肪酸的成分、含量打下基础。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

试剂：0.5 mol／L NaOH-CH3OH溶液(分析纯)；1：1苯一石油醚混合溶液(分析纯)；脂肪酸甲酯标准品(Sigma公司)。

安捷伦6890气相色谱仪，氢火焰检测器；固定液为FFAP的石英玻璃毛细管柱，柱长25m，柱径0.32mm。

1.2 脂肪酸的快速甲酯化

将花生干燥后，取500mg左右，研碎后放人10ml具塞试管中，加入苯一石油醚混合溶液2ml，浸提15min后，再加入0.5moL／L NaOH-CH、OH溶液2ml，振摇后置于50水浴约

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15min，取出后沿管壁加入蒸馏水使有机层上升至试管上部，静置分层后，取上层清液1ml作气相色谱分析。

1.3 色谱操作条件

载气N2：81kPa；分流比10：1；燃气H3：30ml／min；空气：400ml／min；进样口：250℃；检测器：250℃；程序升温：180℃(2min)→220℃(3min)，每分钟升5℃。 2 结果

2.1 定性及定量分析

采用脂肪酸甲酯标准物作对照。由于各脂肪酸为同系物，可以视相对校正因子为1，采取面积归一化法可测定脂肪酸组成。从图1可看出，谱峰分离效果好，能分辨出多种脂肪酸。

2.2 方法的精密度

花生样品快速甲酯化后，连续用本方法平行测定6次，测定结果见表1。

由表1结果可看出，相对标准偏差在0.67％～2.11％之间，符合色谱定量分析的允许相对标准偏差范围，表明此方法具有较好的精密度和重复性。

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3 讨论与结论

3.1 色谱柱的选择

考虑到脂肪酸酯类的极性，根据相似相溶原理，选用交联型固定液FFAP，它不仅适于分离脂肪酸酯类，而且热稳定性较好，高温不易氧化和流失，即便在高温下操作，基线也只有很小的漂移。

由于花生的脂肪酸组成复杂，如用填充柱色谱，由于其柱效低，不能良好地分离各组分；而毛细管柱的柱径小，柱较长，因此柱效高，能使脂肪酸组分在柱内进行反复分配并得以完全分离。因此选用毛细管气相色谱法测定。

3.2 载气柱前压的设置

载气压力设置过低，会使谱峰的半峰宽增加，或出现拖尾峰，分析时间也较长；载气压力过高，又会使相邻的峰不能完全分离，甚至出现谱峰重合现象，这些情况都会影响定性定量的准确性。经过多次试验，当设置载气柱前压为81kPa时，与柱前压为50kPa时相比，出峰时间提前了近一倍，并且不影响出峰数目及分离效果，能准确地分离出30多种组分。

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3.3 程序升温的设置

由于花生的脂肪酸组成很复杂，如果采用恒温分析，谱峰无法得到良好的分离，所以需要设置程序升温，使各个组分按沸点高低依次出峰。多次试验表明，程序升温

180℃(2min)→220℃(5min)，每分钟升5℃，在此条件下，能分离出10多个组分，并且主要脂肪酸出峰时间还不到10min，只需要13min即可完成一次分析。