EB病毒DNA水平特征在鼻咽癌预后评估中的临床意义

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󰀁󰀁王敏①

【摘要】　目的：分析EB病毒DNA检测中核酸测定的应用，分析EB病毒DNA检测结果和鼻咽癌预后的关系。方法：以笔者所在医院2017　　

年12月-2018年12月收治的60例鼻咽癌患者为观察组，另外选取50例健康者为对照组，均接受EB病毒DNA检测核酸测定，分析测定结果。结果：观察组鼻咽癌患者EBV DNA水平明显高于对照组，EBV DNA阳性率明显高于对照组（P<0.05）；观察组内病理分型级别越高，EBV DNA水平越高，EBV DNA阳性率越高，差异有统计学意义（P<0.05）；观察组出现远处转移的患者EBV DNA检测结果及阳性率明显高于未远处转移患者（P<0.05）；观察组出现复发的患者EBV DNA检测结果及阳性率明显高于未出现复发的患者（P<0.05）。结论：核酸测定EB病毒DNA检测结果与鼻咽癌预后有关，通过测定鼻咽癌患者EBV DNA水平有助于辅助判断患者预后，指导临床采取合理的干预措施。【关键词】　鼻咽癌　核酸测定　EB病毒　DNA　检测　预后　　

　　doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2020.31.071󰀁

󰀁

文献标识码　B󰀁

󰀁

文章编号　1674-6805（2020）31-0176-03

　　Clinical Significance of EBV DNA Level Characteristics in Prognosis Evaluation of Nasopharyngeal Carcinoma/WANG Min. //Chinese and Foreign Medical Research, 2020, 18(31): 176-178

　　[Abstract]　Objective: To analyze the application of nucleic acid determination in Epstein-Barr virus DNA detection and analyze the correlation between Epstein-Barr virus DNA detection results and the prognosis of nasopharyngeal carcinoma. Method: Sixty patients with nasopharyngeal carcinoma admitted to our hospital from December 2017 to December 2018 were enrolled in the observation group. Another 50 healthy subjects were selected as the control group. All of them received EB virus DNA detection nucleic acid determination and analysis. result. Result: The EBV DNA level in the observation group was significantly higher than that in the control group. The positive rate of EBV DNA was significantly higher than that in the control group (P<0.05). The higher the pathological classification level in the observation group, the higher the EBV DNA level and the EBV DNA positive, the higher the positive rate, the differences ①四川省人民医院附属成都铁路卫生学校 四川 成都 610000

进行预防

[11-12]

。本次研究对2019年本区1~6岁儿童的饮食

[2]王志国.铁补充剂联合食物疗法治疗儿童缺铁性贫血的效果[J].中国实用医药，2018，13（1）：86-88.

[3]招湛静，林丽云，徐威力，等.深圳大鹏新区0~6岁学龄前儿童缺铁性贫血患病率现状调查及其影响因素分析[J].中国优生与遗传杂志，2018，26（4）：112-114.

[4]林丽，林萍.地中海贫血和缺铁性贫血诊断中血常规检验的应用效果观察[J].中外医学研究，2019，17（2）：67-69.

[5]贺瑾，魏莉.吉安市3~6岁缺铁性贫血儿童体格发育及健康水平的调查[J].医学理论与实践，2018，31（8）：143-144.

[6]李清辉.蛋白琥珀酸铁口服溶液治疗儿童缺铁性贫血临床效果分析[J].饮食保健，2018，5（24）：35-36.

[7]李彩霞，袁新华，贾雯.小剂量铁剂在小儿缺铁性贫血治疗上的临床效果[J].中国合理用药探索，2018，15（3）：58-60.

[8]梁菠，周夭红.小儿缺铁性贫血给予小剂量间歇补铁法治疗效果分析[J].中外医学研究，2019，17（4）：32-34.

[9]邹碧霞.膳食及药物对孕期缺铁性贫血的影响及个性化营养干预的实施效果[J].中外医学研究，2018，16（23）：178-179.

[10]余忠红.德阳地区学龄前儿童缺铁性贫血的流行病学调查及影响因

素分析[J].中国妇幼保健，2018，33（23）：5573-5576.

[11]陈凛凛.蛋白琥珀酸铁口服溶液和膳食指导对儿童营养性缺铁性贫

血的疗效观察[J].中国医药科学，2018，8（10）：63-65.

[12]程真华.铁补充剂配合强化铁食物联合治疗儿童缺铁性贫血的效果

研究[J].基层医学论坛，2017，21（26）：3512-3513.

（收稿日期：2020-09-03）　（本文编辑：郎序莹）

Chinese and Foreign Medical Research Vol.18, No.31 November, 2020

情况进行调查，发现1~6岁缺铁性贫血儿童饮食堪忧，奶量摄入不够，红肉类摄入不足，营养不均衡，红肉类摄入不足，这与辅食添加时咀嚼训练不足相关，家长辅食添加技能不足，红肉类烹饪较单一，缺少多样化，孩子饮食兴趣欠缺，家长未重视蛋白质摄入，以上均会导致缺铁性贫血，因此，要强化家长的健康教育，重视铁的补充和缺铁性贫血的监测，保证儿童生长发育。

　　本研究显示，试验组患儿治疗效果明显优于对照组（P<0.05），试验组治疗2个月后TS、SF、Hb均高于对照组（P<0.05），试验组治疗后半年Hb优于对照组（P<0.05）。试验组家长接受贫血饮食指导，懂得丰富烹饪方式，增加食物多样性，营养较均衡，重视对补铁食物进行强化，因此血红蛋白水平较稳定，贫血后续疗效良好。而对照组家长未重视铁剂治疗后续饮食调整的重要性，在铁剂治疗停止后，指标有回复治疗前的趋势，治疗后的效果相对不稳定。

　　综上所述，本区1~6岁儿童可由于饮食情况影响发生缺铁性贫血，针对患儿实施强化铁食物和铁补充剂联合方案可达到满意的治疗目标，建议推广，同时应加强普及辖区内婴幼儿及学龄前儿童膳食营养指导，合理膳食，均衡营养。

参考文献

[1]刘佳欣，罗洲，刘玖，等.儿童早期综合发展在社区儿童保健中的推广应用[J].中外医学研究，2018，16（36）：170-172.

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《中外医学研究》第18卷 第31期（总第471期）2020年11月　　综合医学 Zongheyixue

were statistically significant (P<0.05)； the EBV DNA test results and the positive rate in the patients with distant metastasis were significantly higher than those in the distant metastasis patients (P<0.05). The EBV DNA test results and positive rate in patients with recurrence in the observation group were significantly higher than those without recurrence (P<0.05). Conclusion: The detection of EBV DNA by nucleic acid has a correlation with the prognosis of nasopharyngeal carcinoma. The determination of EBV DNA level in patients with nasopharyngeal carcinoma can help to judge the prognosis of patients and guide clinical intervention.

　　[Key words]　Nasopharyngeal carcinoma　Nucleic acid assay　Epstein-Barr virus　DNA　Detection　Prognosis

　　First-author’s address: Chengdu Railway Health School Affiliated to Sichuan Provincial People’s Hospital, Chengdu 610000, China

　　鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）这类恶性肿瘤的恶性程度非常高，作为一类头颈部恶性肿瘤，存在非常高行。EBV DNA阳性标准为病毒载量>500 copy/ml，阴性标准为病毒载量≤500 copy/ml[5]。的转移率及非常严重的侵袭性，临床主要采取放射疗法治疗，但存在较高的远处转移率、局部复发率，所以治疗成功率无法保证[1]。临床要求接受放疗后的NPC患者必须定期进行复查，确保能够早期发现复发的病灶或者小的转移灶，及时制订合适的治疗方案，改善患者预后[2]。研究发现，NPC和EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）存在非常紧密的联系，临床对于NPC的诊断，EBV相关抗体、EBV DNA检测是一类重要方法[3]，随着检验技术水平的不断进步，核酸测定受到的重视程度不断提升，研究发现将其用于EB病毒DNA检测中有良好应用价值。本研究以笔者所在医院2017年12月-2018年12月60例鼻咽癌患者及50例健康受检者为对象，具体分析EB病毒DNA检测对鼻咽癌预后的预测价值，现报告如下。1　资料与方法1.1　一般资料

　　以笔者所在医院2017年12月-2018年12月收治的60例鼻咽癌患者为对象为观察组，纳入标准：患者均确诊为鼻咽癌，全部患者均经病理检查确诊[4]。排除标准：妊娠期或哺乳期妇女；其他癌症、血液系统疾病、免疫系统疾病等疾病者；合并患有肝肾功能不全、心脑血管疾病。所有患者均签署知情同意书。其中男32例，女28例；年龄43~67岁，平均（54.28±7.36）岁；病理学分类：高分化型12例，中等分化型19例，低分化型29例。另外选取50例健康者为对照组，其中男26例，女24例；年龄41~67岁，平均（52.59±7.14）岁。两组年龄、性别比较，差异无统计学意义（P>0.05），有可比性。1.2　方法

　　两组受检者均接受EB病毒DNA检测，在治疗进行前抽取患者5 ml静脉血液，进行乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝血血浆分离处理，选择DNA提取试剂盒，通过核酸测定方法进行EBV DNA水平的测定：（1）引物、探针设计、合成、纯化：在genbank中调出EB病毒Bam H1-W序列，设计扩增EB病毒DNA段的引物序列。下游引物为5’-TACCACCTCCTCTTCTTGCT-3’，上游引物为5’-GCCAGAGGTAAGTGGACTTT-3’，同时完成对应荧光探针的设计，探针序列为5’-CACACCCAG-GCACACACTACACAT-3’。扩增仪扩增：经专人进行标准曲线建立及反应体系的设计。

　　对病毒拷贝数进行准确计算，全部操作严格依据说明书进

Chinese and Foreign Medical Research Vol.18, No.31 November, 2020

1.3　观察指标

　　比较观察组、对照组EBV DNA检测水平及阳性率。分别比较观察组内不同鼻咽癌病理分型患者、发生远处转移与未发生远处转移患者、局部复发与未出现局部复发患者EBV DNA检测及结果阳性率。1.4　统计学处理

　　本研究数据采用SPSS 22.0统计学软件进行分析和处理，计

量资料以（-x±s）表示，采用方差分析、t检验，计数资料以率

（%）表示，采用字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1　EBV DNA检测水平及阳性率

　　观察组鼻咽癌患者EBV DNA水平明显高于对照组，EBV DNA阳性率明显高于对照组（P<0.05），见表1。

表1　两组EBV󰀁DNA检测水平及阳性率比较组别EBV DNAEBV DNA阳性

（×104

 copy/ml）

例（%）观察组（n=60）9.25±1.2449（81.67）对照组（n=50）

0.73±0.144（8.00）t/字2值48.29359.280P值

<0.001

<0.001

2.2　不同鼻咽癌病理分型EBV DNA检测水平及阳性率

　　观察组内病理分型级别越高，EBV DNA水平越高，EBV DNA阳性率越高，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

表2　观察组不同病理分型EBV󰀁DNA检测水平及阳性率比较病理分型EBV DNA水平EBV DNA阳性

（×104 copy/ml）例（%）高分化型（n=12）10.26±2.0712（100）中等分化型（n=19）  9.56±1.5316（84.21）低分化型（n=29）

  9.11±0.2421（72.41）F/字2值3.5724.402P值

0.035

0.036

2.3　观察组远处转移与否患者EBV DNA检测水平及阳性率　　观察组60例患者中，26例出现远处转移，34例未出现远处转移，远处转移的患者EBV DNA检测水平及阳性率明显高于未远处转移患者（P<0.05），见表3。

2.4　观察组复发与否患者EBV DNA检测水平及阳性率

　　观察组60例患者中，20例出现复发，40例未出现复发，复发患者EBV DNA检测水平及阳性率明显高于未出现复发的患

- 177 -

（2）PCR《中外医学研究》第18卷 第31期（总第471期）2020年11月综合医学 Zongheyixue　　者（P<0.05），见表4。

表3　观察组远处转移与否患者EBV󰀁DNA检测结果及阳性率比较远处转移情况远处转移（n=26）未远处转移（n=34）

t/字值

2

相关，EB病毒DNA水平升高提示鼻咽癌患者预后差，通过测定鼻咽癌患者EBV DNA水平有助于辅助判断患者预后，有良好应用价值。

参考文献

[1] Lin D，Gong T X，Hong Z Y，et al.Metal carbonyls for the Biointerference-Free ratiometric Surface-Enhanced raman Spectroscopy-Based assay for Cell-Free circulating DNA of Epstein-Barr virus in blood[J].Anal Chem，2018，90（12）：7139-7147.

[2]翟斌.鼻咽癌患者唾液，血清和外周血白细胞中EB病毒DNA的定EBV DNA水平（×10 copy/ml）10.17±2.13  8.36±1.873.498<0.001

4

EBV DNA阳性

例（%）25（96.15）24（70.59）6.4320.011

P值

表4　观察组复发与否患者EBV󰀁DNA检测结果及阳性率比较EBV DNA水平EBV DNA阳性

复发情况（×104

 copy/ml）例（%）复发（n=20）10.56±2.2120（100）未复发（n=40）

  8.41±1.6929（72.50）t/字2

值

4.1846.735P值

<0.001

0.009

3　讨论

　　鼻咽癌患者血清中存在针对不同EBV抗原的抗体谱，含潜伏期、溶解期表达的抗原，本研究鼻咽癌患者EBV DNA水平明显高于健康对照组，阳性率明显高于健康对照组。分析是由于鼻咽癌患者机体EBV基因组和健康者有着差异性的活动状态、复制模式，另外表达的相关蛋白也有差异性[6]。也有研究认为，是由于机体免疫系统对EB病毒相关抗原有着差异性的应答，使得机体生成的抗体有着差异性的复杂性，进而导致两者结果上有明显差异[7]

。

　　通常，当机体出现鼻咽癌相关症状表现时，医院会进行EBV血清学检查，以判断受检者是否需要接受进一步的鼻咽癌确诊检查，EBV检查结果能够对临床后续处理进程起到有用指导[8]

。因为鼻咽癌症状表现缺乏足够特异性，仅有少数患者后续发现需要实施进一步确诊检查，所以早期进行EBV检测有助于辅助排除鼻咽癌[9]

。有报道认为，接受放疗后的鼻咽癌患者EBV DNA水平紧密联系肿瘤的转移及复发，同时认为对EBV DNA水平进行监测可以考虑作为肿瘤转移、复杂早期检测的方法[10-11]。有研究显示，接受放疗后近期疗效为完全缓解的鼻咽癌患者，放疗进行后的2~5周基本无法检测到EBV DNA[12]

。另有研究显示，鼻咽癌患者接受治疗后1年之内发生复发、转移的患者，EBV DNA水平要较无瘤生存患者明显更高

[13]

。

　　本研究结果显示鼻咽癌患者病理分型越严重，则EBV DNA水平越高，阳性率越高，表明对于确诊后的鼻咽癌患者，通过进行EBV DNA水平测定，能够辅助进行临床分型，对于临床诊疗工作开展有重要指导作用。本研究鼻咽癌患者中在治疗后出现远处转移者、出现复发者，EBV DNA水平较无远处转移、无复发者明显升高，EBV DNA阳性率同样明显更高。表明测定鼻咽癌患者的EBV DNA水平，能够指导临床进行预后的判断，患者预后与EBV DNA水平具有正相关性，EBV DNA水平越高，提示患者预后越差，所以做好患者EBV DNA水平监测，控制患者EBV DNA水平非常重要

[14]

。

　　综上所述，核酸测定EB病毒DNA检测结果与鼻咽癌预后- 178 -

量检测分析[J/OL].临床检验杂志：电子版，2019，8（3）：65-66.[3]吴博文，邹光美，黄朝任.EB病毒衣壳抗原IgM抗体，衣壳抗原IgA抗体，衣壳抗原IgG抗体，EBV-DNA检测在鼻咽癌早期诊断中的临床应用[J].当代医学，2019，25（11）：162-163.

[4] Ramayanti O，Juwana H，Verkuijlen S A，et al.Epstein-Barr virus mRNA profiles and viral DNA methylation status in nasopharyngeal brushings from nasopharyngeal carcinoma patients reflect tumor origin[J].International Journal of Cancer，2017，140（1）：149-162.

[5]张扬，邓芳，陈少华.单个核细胞EB病毒DNA载量在鼻咽癌患者中的变化初探[J/OL].中华临床实验室管理电子杂志，2019，7（01）：22-25.

[6]李晓，杨永泉，廖海平.定量检测EB病毒VCA-IgA抗体及EB病毒DNA对鼻咽癌筛查和诊断的价值[J].生物技术通讯，2018，29（5）：683-686.

[7]赵淼，陈晓鸿.血清EB病毒基因，癌胚抗原联合铁蛋白检测在鼻咽癌诊断中的临床价值[J].中国医学创新，2018，15（23）：134-137.

[8]刘艳石，刘璐.EB病毒抗体及其DNA在鼻咽癌复发患者血清中的表达水平及其临床意义[J/OL].中国医学前沿杂志：电子版，2017，9（12）：115-119.

[9]刘春霞，林炜，周小娟.咽拭子EBV-DNA和EB病毒抗体联合检测对鼻咽癌筛查价值[J].当代医学，2018，24（4）：55-56.

[10]何矣然，游义彬.鼻咽癌患者鼻咽分泌物EB病毒DNA的临床应用

价值分析[J/OL].临床检验杂志：电子版，2017，6（4）：689-690.[11] Kim K Y，Quynh-Thu L，Yom S S，et al.Clinical utility of Epstein-Barr virus DNA testing in the treatment of nasopharyngeal carcinoma patients[J].Int J Radiat Oncol Biol Phys，2017，98（5）：996-1001.[12]黄燕凤，梁盛，陆雪冬.鼻咽癌综合治疗后复发或放射性颅底骨坏

死患者治疗前后EB病毒DNA，病毒衣壳蛋白抗原-IgA和早期抗原-IgA的表达及意义[J].实用临床医药杂志，2017，21（23）：64-67.

[13]凡任芝.血浆EB病毒DNA浓度检测在初诊鼻咽癌患者分期中的应

用[J].临床输血与检验，2017，19（5）：462-465.

[14]王晖，毕晓辉，杨坤禹.EB病毒核酸及抗体动态检测对鼻咽癌的

诊疗作用[J].临床血液学杂志：输血与检验，2017，30（5）：739-742.

（收稿日期：2020-04-30）　（本文编辑：郎序莹）

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