血清葡萄糖测定标准操作规程

1 检验申请

单独检验项目申请：空腹血清葡萄糖测定(缩写GLU)，餐后2h葡萄糖测定，各种体液葡萄糖测定；组合项目申请：葡萄糖耐量试验(缩写OGTT)。临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理

2.1 标本采集

2.1.1 常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。 2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 2.1.3 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 2.1.5 下列标本为不合格标本

2.1.5.1 标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。 2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。 2.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。 2.1.5.4 抽血后室温放置超过4h以上的标本。 2.1.5.5 静脉滴注大剂量维生素C后立即抽血的标本。 2.1.5.6 其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2.2 标本保存

2.2.1 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清，并及时将血清与血球分离。

2.2.2 标本保存时间：不抗凝血标本如血清未与血块分开，共存同一试管中，室温（15～25℃）下血清葡萄糖很不稳定，普通冰箱中（2～8℃）稳定1天。加氟化钠的血液标本室温（15～25℃）下稳定4h。 2.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，单独分离出血清后，密闭置4～8℃冰箱内保存7天。 2.3 标本采集的注意事项

2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。检查空腹血清葡萄糖的须在禁食12h以上早晨抽血。

2.3.2 餐后2h葡萄糖检查，受检者于餐后2h准时抽血。

2.3.3 葡萄糖耐量试验检查的血液标本，在服用75克葡萄糖后，分别于0.5h、1h、2h及3h准时抽血。 2.3.4 为了避免葡萄糖被酵解，单独测定葡萄糖时，血标本可氟化钠-草酸钾抗凝，氟化钠用量为1.5mg/ml血。

3 方法原理

在己糖激酶（HK）催化下，葡萄糖和三磷酸腺苷（ATP）发生磷酸化反应，生成葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）

编写 李永臣 制定日期 2010-09-15 审核 李永臣 审核日期： 2011-07-01 核准 章林华 执行日期 2011-07-01 玉环县人民医院检验科 主题内容 生化室作业指导书 文件编号：JYK-3-SH-023 版本/修订号：C/0 生效日期：20110701 第 2 页 共4 页 和二磷酸腺苷（ADP）。G-6-P在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）催化下脱氢，生成6-磷酸葡萄糖酸内脂（6-PGA），同时使NADP还原成NADPH +H。反应式如下： GLU + ATP  G-6-P + ADP

G-6-P + NADP6-PGA +NADPH + H

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HKG6PD反应中NADPH的生成速率和生成量与葡萄糖浓度成正比，在波长340nm监测吸光度的升高值(ΔA)，可计算血清中葡萄糖浓度。

4 试剂及其他用品

4.1 试剂：葡萄糖测定（HK法）试剂盒（货号GL6211），由北京利德曼生化股份有限公司出品。 4.2 试剂盒保存：未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定14天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀，或空白吸光率＞0.5时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.3 试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。

4.4 试剂盒主要成分： ATP 4 mmol/L ，NAD3 mmol/L ，己糖激酶 ＞100U/ｍL ，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 ＞300U/ｍL ，同时含有稳定剂与保护剂。

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5 校准品与校准模式

5.1 校准液： Beckman-Coulter SYNCHRON LX MULTI 校准液(P/N442600）,其浓度可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料。

5.2 校准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。

5.3 校准周期：校准间隔时间不限。但在：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。

5.4 校准液重建方法：Beckman-Coulter SYNCHRON LX MULTI 校准液即开即用，无需特殊准备。

6 质控品与室内质控规则

6.1 质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。 6.2 质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。 6.3 质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。

6.4 质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。

7 适用仪器

适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器。

8 标本检测步骤

装载试剂 → 进行校准 → 进行质控 → 输入标本检测项目 → 加载标本 → 标本测定 →结果复核 → 报告。

9 主要分析参数

编写 李永臣 制定日期 2010-09-15 审核 李永臣 审核日期： 2011-07-01 核准 章林华 执行日期 2011-07-01 玉环县人民医院检验科 主题内容 参见说明书。

生化室作业指导书 文件编号：JYK-3-SH-023 版本/修订号：C/0 生效日期：20110701 第 3 页 共4 页 10 结果计算

葡萄糖浓度（mmol/L）＝

标本A（340380）nm×校准液葡萄糖浓度（mmol/L）

校准液A（340380）nm仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。

11 检验结果的报告及范围

11.1 结果的报告

11.1.1 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。

11.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。

11.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。

11.2 报告范围：0～38.9 mmol/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。A

12 操作性能

12.1 精密度：批内CV＜5.0%,总CV＜6.0%。 12.2 准确度：回收率99.4%～101.6%。 12.3 线性范围: 0～38.9 mmol/L。

12.4 方法的有限性及干扰因素：特异性相当高，干扰少。是葡萄糖测定的参考方法。严重溶血（Hb2～5.12g/L）使红细胞内有机磷酸酯及一些酶类释放，消耗NADP，可致葡萄糖测定值下降6.6～32%。

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13 参考范围及医学决定水平

13.1 参考范围

空腹血糖： 3.9～6.1 mmol/L

脑脊液：儿童2.8～4.5 mmol/L；成人2.5～4.5 mmol/L 尿液葡萄糖：24h尿糖为0.56～1.67mmol。 13.2 医学决定水平

血糖浓度6.12～7.00mmol/L（110～126mg/dl）为空腹血糖受损；≥7.0mmol/L（126mg/dl）为糖尿病诊断标准；随机血糖浓度>33.3mmol/L（600 mg/dl）为糖尿病非酮症高渗综合症，<2.8 mmol/L（50 mg/dl）考虑低血糖症。

14 临床意义

14.1 1997年ADA（WHO）的糖尿病诊断标准中，空腹血浆GLU（FPG）≥7.0 mmol/L，或OGTT 2h血浆GLU≥11.1 mmol/L，是糖尿病的实验室诊断指标。FPG浓度如超过参考范围的上限6.1 mmol/L，但低于7.0 mmol/L，称为空腹血糖异常。

编写 李永臣 制定日期 2010-09-15 审核 李永臣 审核日期： 2011-07-01 核准 章林华 执行日期 2011-07-01 玉环县人民医院检验科 主题内容 生化室作业指导书 文件编号：JYK-3-SH-023 版本/修订号：C/0 生效日期：20110701 第 4 页 共4 页 14.2 除糖尿病外，血糖浓度升高还可发生在垂体前叶功能亢进、生长激素或促肾上腺皮质激素分泌过多、或肾上腺髓质肿瘤等情况中。

14.3 血液葡萄糖浓度测定是糖尿病的诊断指标，但并不是糖尿病人的较好的或必做的监测指标。诊断明确的糖尿病人如需评价降糖药物的疗效或调整剂量，对病情作监测，可选用其他检查项目例如定期监测糖化血红蛋白等。

14.4 病理性低血糖可因胰岛β细胞增生或瘤等，使胰岛素分泌过多所致；也可见于对抗胰岛素的激素分泌不足的情况，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退而使生长激素、肾上腺皮质激素分泌不足等。严重肝病患者可因肝脏储存糖原及糖异生功能下降，肝脏不能有效地调节血糖而出现低血糖。

15 结果审核以及分析与相关项目的联系

15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。

15.2 认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。

15.3 相关项目：审核与糖化血白蛋白、糖化血清蛋白等的关系，其他一些应用Trinder反应的检测项目如胆固醇、甘油三酯、尿酸等是否有共同降低的情况(如有此现象应排除维生素C干扰的可能)。如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。

16 威胁生命的“紧急值”及报告规定：按危急值报告制度执行。

16.1 血糖浓度＞33.3mmol/L。有可能是因胰岛素缺乏引起的糖尿病性昏迷，发展为渗透性多尿伴严重的脱水和酮中毒。

16.2 血糖浓度＜2.78 mmol/L。引起低血糖性昏迷。

17 有关引用程序与文件

17.1 Abbott自动生化分析仪仪器标准操作规程。 17.2 生化检验室内质控标准操作程序。 17.3 检验结果审核程序。 17.4 标本送检和接收程序。

18 参考文献

18.1 陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004. 18.2 北京利德曼生化股份有限公司葡萄糖测定试剂盒说明书.

编写 李永臣 制定日期 2010-09-15 审核 李永臣 审核日期： 2011-07-01 核准 章林华 执行日期 2011-07-01