雌二醇对苯并(a)芘致雄性小鼠肺癌抑制作用

５４８　中国公共卫生２００８年５月第２４卷第５期　ＣｈｉｎＪＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈＭａｙ２００８　Ｖｏ１．２４Ｎｏ．５　文章编号：１００１—０５８０《２００８）０５—０５４８—０２　中图分类号：Ｒ　７３４．２　文献标志码：Ａ　【专题报道】　雌二醇对苯并（ａ）芘致雄性小鼠肺癌抑制作用　李海峰　，陶健　，陈照立　，金敏　，谌志强　，王新为　，晁福寰　，李君文　摘要：目的建立苯并（ａ）茈［Ｂ（ａ）Ｐ］诱发雄性昆明小鼠肺癌的动物模型，探讨雌二醇（Ｅ２）在该模型中对Ｂ（ａ）　Ｐ致肺癌作用的影响。方法将不同组的雄性昆明小鼠分别给予Ｂ（ａ）Ｐ、Ｅ２干预，每周１次，持续８周，恢复８周后处　死，进行形态学观察和病理学诊断，并检测血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和丙二醛（ＭＤＡ）水平。结果Ｂ（ａ）Ｐ组小鼠的　肺癌发病率和肿瘤数分别为３６．０％和１．１５４±０．５４，明显高于对照组和Ｅ２组（Ｐ＜０．０５）；Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２组小鼠的肺癌　发病率和肿瘤数分别为３２．０％和０．８８±０．３３，明显高于对照组和Ｅ２组（Ｐ＜０．０５）；Ｂ（ａ）Ｐ组小鼠的肺癌发病率和肿　瘤数高于Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２组，肿瘤数差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），而发病率差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。血清ＭＤＡ　水平以Ｂ（ａ）Ｐ组最高，Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２组及Ｅ２组次之，对照组最低；ＳＯＤ与ＭＤＡ的趋势相反。结论　建立了灌胃Ｂ（ａ）Ｐ　诱发雄性昆明小鼠肺癌的动物模型，Ｅ２可能通过抗氧化作用减少Ｂ（ａ）Ｐ诱发的肺癌肿瘤数。　关键词：苯并（ａ）芘；雌二醇；肺癌　Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｓｔｒａｄｉｏｉ　ｏｎ　ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ　ｏｆ　ｂｅｎｚｏ（ａ）ｐｙｒｅｎｅ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｌｕｎｇ　ｔｕｍｏｒｓ　ｉｎ　ｍａｌｅ　Ｋｕｎｍｉｎｇ　ｍｉｃｅ　ＬＩ　Ｈａｉ—ｆｅｎｇ，　ＴＡ０　Ｊｉａｎ．ＣＨＥＮ　Ｚｈａｏ－ｌｉ．ｅｔ　ａ１．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｍｉｌｉｔａｒｙ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　（ｎｎ　ｉｎ　３００５０，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｄｅｖｅｌｏｐ　ａ　ｌｕｎｇ　ｔｕｍｏｒ　ｍｏｄｅｌ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｂｅｎｚｏ（ａ）ｐｙｒｅｎｅ（Ｂ（ａ）Ｐ）ｉｎ　ｍａｌｅ　Ｋｕｎｍｉｎｇ　ｍｉｃｅ，ａｎｄ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｓｔｒａｄｉｏｌ（Ｅ２）ｏｎ　Ｂ（ａ）Ｐ—ｉｎｄｕｃｅｄ　ｌｕｎｇ　ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｋｕｎｍｉｎｇ　ｍｉｃｅ　ｗｅｒｅ　ｅｘｐｏｓｅｄ　ｔｏ　Ｂ　（ａ）Ｐ　ａｎｄ　Ｅ２（ｏｎｃｅ　ａ　ｗｅｅｋ）ｆｏｒ　８　ｗｅｅｋｓ，ｆｏｌｌｏｗｅｄ　ｂｙ　ａ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｐｅｒｉｏｄ　ｏｆ　８　ｗｅｅｋｓ．Ａｔ　ｔｈｅ　ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，ｍｉｃｅ　ｗｅｒｅ　ｋｉｌｌｅｄ　ｔｏ　ｈａｒｖｅｓｔ　ｌｕｎｇ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｆｏｒ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｎｄ　ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｔｏ　ｉｄｅｎｔｉｆｙ　ｌｕｎｇ　ｔｕｍｏｒｓ．Ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ｓｕ—　ｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ）ａｎｄ　ｍａ１ｏｎｄｉａ１ｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ）ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ　ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂ（ａ）Ｐ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｅ２　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜　０．０５）．Ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ　ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂ（ａ）Ｐ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２　ｇｒｏｕｐ　ｗｉｔｈ　ｓｉｇｎｉｆ—　ｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｉｎ　ｔｕｍｏｒ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙ（Ｐ＜０．０５），ｙｅｔ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｉｎ　ｔｕｍｏｒ　ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）．Ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ＭＤＡ　ｗｅｒｅ　９．５７８±１．０５９，８．９４６±１．０３７，８．７３９±１．３７４，８．５３６±０．６９５　ｉｎ　Ｂ（ａ）Ｐ　ｇｒｏｕｐ，Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２　ｇｒｏｕｐ，Ｅ２　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｗｈｉｌｅ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ＳＣ｝Ｄ　ｗｅｒｅ　１８０．５２９±１６．７７６．１８９．２０５±１６．５２２．１９３．５４８±　１３．３７６，１９８．９９２±１７．３０７　ｉｎ・ｔｈｏｓｅ　ｇｒｏｕｐｓ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ａ　ｌｕｎｇ　ｔｕｍｏｒ　ｍｏｄｅｌ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ｂ（ａ）Ｐ　ｉｎ　ｍａｌｅ　Ｋｕｎ—　ｍｉｎｇ　ｍｉｃｅ　ｗａｓ　ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ，Ｅ２　ｍａｙ　ｄｅｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ｔｕｍｏｒ　ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙ　ｏｆ　Ｂ（ａ）Ｐ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｌｕｎｇ　ｔｕｍｏｒｓ　ｉｎ　ｍａｌｅ　Ｋｕｎｍｉｎｇ　ｍｉｃｅ　ｂｙ　ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ　ｌｉｐｉｄ　ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｕｇｍｅｎｔｉｎｇ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｄｅｆｅｎｓｅ　ｓｙｓｔｅｍ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｂｅｎｚｏ（ａ）ｐｙｒｅｎｅ（Ｂ（ａ）Ｐ）；ｅｓｔｒａｄｉｏｌ（Ｅ２）；ｌｕｎｇ　ｔｕｍｏｒ；Ｋｕｎｍｉｎｇ　ｍｉｃｅ　吸烟是公认肺癌的最主要致病因素，苯并（ａ）芘［ｂｅｎｚｏ（ａ）　医学科学院动物中心），均为清洁级动物。　ｐｙｒｅｎｅ，Ｂ（ａ）Ｐ］是香烟烟雾中所含的主要致癌物。流行病学　１．２主要试剂Ｂ（ａ）Ｐ，Ｅ２（美国Ｓｉｇｍａ公司）；ＳＯＤ及ＭＤＡ　调查表明，女性对吸烟引起的肺癌比男性更敏感，在吸烟量相　检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）。　同的情况下，女性更容易引发肺癌ｕｊ，这可能与女性体内雌激　１．３动物分组小鼠随机分为４组，每组２５只，即对照组，Ｂ　素水平较高有关。不过也有学者持相反的观点，他们认为女　（ａ）Ｐ组，Ｅ２组和Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２组。Ｂ（ａ）Ｐ组小鼠给予Ｂ（ａ）Ｐ　性对肺癌的高敏感性与女性长期暴露于烹饪油烟有关［２ｊ，油　灌胃，３　ｕｍｏｌ／只，每周１次。Ｅ２组小鼠给予皮下注射Ｅ２，３６　烟中含有Ｂ（ａ）Ｐ等致癌物。在外源性雌激素作用下（如口服　ｇ／只，每周１次。Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２组小鼠同时给予Ｂ（ａ）Ｐ灌胃和　避孕药、雌激素替代疗法），女性患啼癌的危险性不但没有增　皮下注射Ｅ２。溶剂对照组，通过相应途径给予橄榄油。处理　加，反而降低ｂ　］。关于雌激素在肺癌发生过程中的作用，目　８周以后，给予８周的恢复期，共１６周。对所有小鼠每天进　前尚无明确结论。本试验建立以Ｂ（ａ）Ｐ灌胃诱发雄性昆明　行检查，每周测量体重。　小鼠肺癌的动物模型，观察皮下注射雌二醇（１７　８一ｅｓｔｒａｄｉｏｌ，　１．４形态学及病理学诊断见文献［５］。　Ｅ２）对小鼠肺癌发病率及肿瘤数的影响。同时检测小鼠血清　１．５肿瘤发病率和肿瘤数计算　肿瘤发病率（％）＝每组发　中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及丙二醛（ＭＤＡ）水平，探讨Ｅ２在Ｂ　生肿瘤的小鼠数／该组存活的小鼠总数×１００％；肿瘤数＝每　（ａ）Ｐ诱发肺癌中的作用，为进一步研究Ｂ（ａ）Ｐ诱发肺癌的作　组肿瘤结节总数／该组存活的小鼠总数。通过检测表明，小鼠　用机制提供论依据。　肺癌模型成功。　１材料与方法　１．６氧化及抗氧化指标检测血清ＳＯＤ采用黄嘌呤氧化酶　１．１动物５周龄雄性昆明小鼠１００只，体重１８～２０ｇ（军事　法测定，血清ＭＤＡ采用硫代巴比妥酸法测定。　作者单位：１．军事医学科学院卫生学环境医学研究所．天津　１．７统计分析　采用ＳＰＳＳ　１０．０软件进行统计分析。对肿　３０００５０；２．西北农林科技大学食品科学与工程学院　瘤数、血清ＳＯＤ及ＭＤＡ值用方差分析进行检验，肿瘤发病率　作者简介：李海峰（１９８２一），男，山西运城人，硕士在读，研究方向：　苯并（ａ）芘致肺癌机制研究。　用Ｙ　检验。　通讯作者：李君文　维普资讯 http://www.cqvip.com 中国公共卫生２００８年５月第２４卷第５期　２结果　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｐｕｂｌｉｃ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｍａｙ２００８　Ｖｏ１．２４　Ｎｏ．５　５４９　病率和肿瘤数均明显高于对照组表明建立的灌胃Ｂ（ａ）Ｐ诱　所有动物对实验于预适应良好，无实验　２．１　小鼠体重变化发雄性昆明小鼠肺癌的动物摸型成功。　雌激素是一类具有广泛生物活性的甾体激素，有关其在　肺癌发生过程中的作用，目前尚无明确结论。Ｎｏｒｏｎｈａ等　］　观察到在应用二甲基亚硝胺致肺癌的雄鼠中应用雌激素后患　病率由６０％降至１７％，其肺内肿瘤数也由３．２个降至１．６２　个／鼠。Ａｎｄｒｅｅｓｃｕ等　］将几种天然或人工合成的雌激素作用　因素直接导致的小鼠死亡。对照组小鼠体重增长最高，Ｅ２组　和Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２组次之，Ｂ（ａ）Ｐ组最低。Ｂ（ａ）Ｐ组小鼠体重从　第２周开始，明显低于对照组和Ｅ２组（Ｐ＜０．０５）；其他各组　小鼠体重比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。　２．２　形态学与病理学诊断　肺表面可以看到明显的肿瘤结　节，质地较坚硬。所有ＨＥ染色确诊的肿瘤均为腺瘤，肺组织　内可见较大肿块，与正常肺组织分界清楚。肿瘤组织呈腺样　于Ａ５４９肺癌细胞后，细胞活性和细胞增殖均受到明显抑制。　细胞色素Ｐ４５０１Ａ（ＣＹＰ１Ａ）是体内代谢Ｂ（ａ）Ｐ的重要酶，Ｅｌ—　排列，肿瘤问质少，瘤细胞胞体呈圆形，胞浆粉红色，瘤细胞核　圆形，深染，染色质呈粗颗粒状，主要位于核膜下。　２．３小鼠的发病率和肿瘤数（表１）Ｂ（ａ）Ｐ组的肺癌发病率　和肿瘤数最高，与对照组及Ｅ２组比较，差异有统计学意义（Ｐ　＜０．０５）。Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２组的肺癌发病率和肿瘤数仅次于Ｂ（ａ）　Ｐ组，与对照组及Ｅ２组比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）ｉ　与Ｂ（ａ）Ｐ组比较，肿瘤数差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），而发　病率差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。Ｅ２组与对照组的肺癌　发病率和肿瘤数比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。　表１不同组别小鼠肿瘤发病率和肿瘤数（　±ｓ）　注：与对照组比较ａ　Ｐ＜Ｏ．０５；与Ｅ２组比较，ｂ　Ｐ＜Ｏ．０５；与Ｂ（ａ）　Ｐ＋Ｅ２组比较，Ｃ　Ｐ＜０．０５。　２．４血清ＳＯＤ及ＭＤＡ水平测定（表２）Ｂ（ａ）Ｐ组小鼠血清　ＯＳＤ和ＭＤＡ水平与对照组比较，差异有统计学意义（Ｐ＜　０．０５）；其他组血清ＳＯＤ和ＭＤＡ水平比较，差异无统计学意　义。血清ＭＤＡ以Ｂ（ａ）Ｐ组最高，Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２组及Ｅ２组次　之，对照组最低；ＳＯＤ与ＭＤＡ的趋势相反。　表２不同组别小鼠血清ＳＯＤ及ＭＤＡ水平ｆ　±ｓ）　注：与对照组比较，ａ　Ｐ＜０．０５。　３讨论　Ｈｅｃｈｔ等【６］应用Ａ／Ｊ小鼠，通过灌胃、腹腔注射及皮下注　射或气管滴注等方法成功建立了Ｂ（ａ）Ｐ诱发肺癌的动物模　型。由于Ａ／Ｊ小鼠在国内很难大量获得且价格昂贵，本实验　采用雄性昆明小鼠建立动物模型，发现Ｂ（ａ）Ｐ组小鼠肺癌发　ｓｋｕｓ￣　发现雌二醇能够抑制Ｂ（ａ）Ｐ诱导的ＣＹＰ１Ａ活性，从而　降低Ｂ（ａ）Ｐ的毒性。提示雌激素可能具有抑制肺癌发生的　作用。本实验结果表明，Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２组小鼠的肺癌肿瘤数　（０．８８±０．３３）明显低于Ｂ（ａ）Ｐ组小鼠（Ｐ＜０．０５），表明Ｅ２减　少了Ｂ（ａ）Ｐ诱发的肺癌肿瘤数。但未观察到２组小鼠肺癌发　病率的差别，这可能与本次实验的动物数较少有关。在本实　验中，Ｂ（ａ）Ｐ组ＭＤＡ含量最高，Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｅ２组及Ｅ２组次之，　对照组最低；ＯＳＤ的结果则与ＭＤＡ相反。进一步提示Ｅ２可　能通过减少Ｂ（ａ）Ｐ导致的氧化损伤来发挥作用。　参考文献　［１］　Ｚａｎｇ　ＥＡ，Ｗｙｎｄｅｒ　ＥＬ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｒｉｓｋ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｍｅｎ　ａｎｄｗｏｍｅｎ：ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｖｉｄｅｎｃｅ［Ｊ］．Ｊ　Ｎａｔｌ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎｓｔ，　１９９６，８８；１８３—１９２．　［２］张扬，陈坤，张海蕾，等．非吸烟女性肺癌发病危险因素的Ｍｅｔａ　分析［Ｊ］．中国公共卫生，２００１，１７（１０）：８６９—８７０．　［３］　Ｅｎｉｏｔｔ　ＡＭ，Ｈａｎｎａｆｏｒｄ　ＰＣ．Ｕｓｅ　ｏｆ　ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ　ｈｏｒｍｏｎｅｓ　ｂｙ　ｗｏｍｅｎ　ｎａｄ　ｌｎｕｇ　ｃａｎｃｅｒ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ｒｏｙａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｇｅｎｅｒａｌ　Ｐｒａｃｔｉ—　ｔｉｏｎｅｒｓ’Ｏｒａｌ　Ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｏｎ　Ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｏｎ，２００６，７４　（４）：３３１—３３５．　［４］　Ｓｃｈａｂａｔｈ　ＭＢ，Ｗｕ　Ｘ，Ｖａｐｏｒｃｉｙａｎ　ＡＡ，ｅｔ　ａ１．Ｈｏｒｍｏｎｅ　ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ　ｔｈｅｒａｐｙａｎｄｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｒｉｓｋ：ａ　ｃａｓｅ—ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．ＣｌｉｎＣａｎ—　ｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００４，１０：１１３—１２３．　［５］　杨杰，袁振丽，姜丽娜，等．昆明小鼠被动吸烟肺癌模型的建立　［Ｊ］．解放军预防医学杂志，２００６，２４（２）：９９—１０２．　［６］ＨｅｃｈｔＳＳ，Ｉｓａａｃｓ　Ｓ，Ｔｒｕｓｈｉｎ　Ｎ．Ｌｕｎｇ　ｔｕｍｏｒ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　Ａ／Ｊ　ｍｉｃｅ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｔｏｂａｃｃｏ　ｓｍｏｋｅ　ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｓ　４一（ｍｅｔｈｙｌｎｉｔｒｏｓａｍｉｎｏ）一ｌ一（３　一ｐｙｒｉｄｙ１）一ｌ—ｂｕｔａｎｏｎｅ　ａｎｄ　ｂｅｎｚｏ［ａ］ｐｙｒｅｎｅ：ａ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌｌｙ　ｕｓｅｆｕｌ　ｍｏｄｅｌ　ｆｏｒ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ　ａｇｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅ—　ｓｉｓ，１９９４，１５（１２）：２７２１—２７２５．　［７］　Ｎｏｒｏｎｂａ　ＲＦＸ，Ｇｏｏｄａｌｌ　ＣＭ．Ｅｎｈａｎｃｅｍｅａｎｔ　ｂｙ　ｔｅｓｔｅｒｏｎｅ　ｏｆ　ｄｉｍｅｔｈｙｌｎｉｔｒｏｓａｍｉｎｅ　ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｔ　ｉｎ　ｌｎｎｇ，ｌｉｖｅｒ　ａｎｄ　ｋｉｄｎｅｙ　ｏｆ　ｉｎ　ｂｒｅｄ　ｆｅｎａｌｅ　ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｃａｒｃｉｎｏｇ　Ｅｎｅｓｉｓ，１９８３，２８３：７５１．　［８］　Ａｎｄｒｅｅｓｃｕ　Ｓ，Ｓａｄｉｋ　ＯＡ，ＭｃＧｅｅ　ＤＷ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｎａｔｕｒａｌ　ｎａｄ　ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｅｓｔｒｏｇｅｎｓ　ｏｎ　ａ５４９　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ：ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔｒｕｃ—　ｔｕｒｅｓ　ｗｉｔｈ　ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ　ｅｆｆｃｅｔｓ［Ｊ］．Ｃｈｅｍ　Ｒｅｓ　Ｔｏｘｉｅｏｌ，２００５，１８（３）：　４６６—４７４．　［９］　Ｅｌｓｋｕｓ　ＡＡ．Ｅｓｔｒａｄｉｏｌ　ａｎｄ　ｅｓｔｒｉｏｌ　ｓｕｐｐｒｅｓｓ　ＣＹＰ１Ａ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｉｎｂｏｗ　ｔｒｏｕｔ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ［Ｊ］．Ｍａｒｉｎｅ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｒｅ—　ｓｅａｒｃｈ，２００４，５８：４６３—４６７．　收稿日期：２００７—０８．１３　（文涛编辑郭长胜校对）