欧阳与创编 2021.03.08
SDSPAGE
时间：2021.03. 08
创作：欧阳与
30%聚丙烯酰胺溶液30% fw/vj Acrylamide
【组分浚度】
各种组分名称 配制不同体积所需各成分的体积（mL咸质虽：（g） 100ml 29g lg 30%AcrBis(29:l) 1000ml 290g 29%Acrylamide(丙烯酰 胺) 10g 1%BIS（NN亚甲丙烯酰 胺） 【配制方法】 将29克丙烯酉先胺和1克 N,N'亚甲丙烯酰胺溶于 愆体釈为60ml温热
C37°C左右丿 的去离孑水中，充 分搅拌溶解，补力口水至终体釈为100mlo 0.45pm 激孔 滤勝过滤除菌和杂质，储于棕匡瓶，4°C邀充C用钮 箔纸包扎
起来丿 保存。严格核实PH不得超过7.0,因 可叹发主脫氨基反应是充傕7匕更破催7匕的。便用期不 得逑过两个戸，隔几个戸须重新配制。如有沉淀，可 叹辽滤。 【保存条件】
4°C避充C用钮箔茨包扎起来丿保存【注意事 项】
丙烯酰胺具有很强的神经奉牲养可通过皮肤吸 收，其乍用具有累釈性。秫量丙烯酉先腆和 N,N'亚甲丙 烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无零， 便也应逢慷操年，因为它还可能舍有少量未聚合材 料。
欧阳与创编
2021.03.08
欧阳与创编 2021.03.08
lMTrisHCL CpH6.8J （浚缩胶 buffer）
【组分浓度】lMTrisHCL
名称 Tris 去离子水 浓盐酸 去离子水 用量 备注 12.1g 80ml 9ml （36%的浓盐酸）预实验已确定 加入去藹子水泄容至100ml后，室温保存 【配制方法】 称量121.1gTris蹶溶于800mL的去离子水，充分 搅拌溶解，加
＞0.7mL的浚 HCL调节所需要的pH值
（7.4 大约 0.7mL , 7.6 大约 0.6mL , 8.0 大约 0.42mL丿,将溶液定容
至1L,高温宫压灭菌后，室 温保存。应便溶液冷卯至室温后再调定pH 值，因为 Tris溶液的pH值随温度的变7匕差异很大，温覆每升 宫1 °C ,溶液的
pH值大约降低0.03个单伍。
【保存条件】
室温保存。 【注意事项】
对人体有剌激性，请注意适为防护。
1.5MTrisHCL CpH8.8J （分离胶 buffer）
【组分浚度】1.5MTrisHCL
名称 Tris 去离子水 浓盐酸 去离子水 用量 备注 18.17g 80ml 3ml (36%的浓盐酸)预实验已确定 加入去离子水泄容至100ml后，室温保存 【配制方法】1L 称量181.7gTris M溶于800mL的去离子水，充分 搅拌溶解，加恣
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HCL调节所需要的pH值=8.8,密溶 液定容至 1L ,高温高压灭菌后，室温保
存。
( 1,5mmol/LTrisHCL(pH8.8): 1 & 15gTris
和
48mllmol/LHCL混合，加水稀释彩100ml终体釈。过 滤后40C保存。丿
【保存条件】
室温保存 【注意事项】
应T更溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶 液的pH T直随溫度的变T匕差舁眼大，温袞每升高1°C, 溶液的pH值大约降低0.03个单辰。
10%十二烷基硫酸钠SDS溶液10%(w/v)SDS
【组分浚度】10%(w/v)SDS
名称 SDS 去离子水 用量 10g 80ml 备注 加入去离子水左容至100ml后，室温保存 【配制方法】
称取2g高纯度的SDS置于100〜200ml饶杯中，
加入约16ml的去离子水，68C加热溶解，滴加浚盐 酸调节PHS 7.2,定容至20ml后，室温保存 【保存条件】
室温保存 【注恿事顼】 保
存
条
T牛：
欧阳与创编
2021.03.08
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4 °C
保 存 注意事项：
易燃，有腐饬牲，请注意防护。
易挥发 , 便用后请葢紧瓶葢。
为了您的安全和逐康，请穿实验服养戴〜次惟手套 操 乍。
保 存 条 件： 4 °C
保
存
注意事项： 易燃，有腐7虫惟，请注意彷护。
易捧发，便用后请葢紧瓶葢。
为了您的安全和罐康，请穿实验服养戴〜次性手套对人体有害，请注竜防护。
10%辽硫酸铁溶液10%(w/v)AP
［组分滚度】10%(w/v)过硫酸按 名称 用量 备注 过硫酸钱 O.lg 去离子水 1ml 现配现用 【配制方法】
秫取O.lg IX硫酸绥置于1.5ml离心营，加ImL去离子 水吹打溶解，4°CT呆存 【保存条件】
4°C保存
【注意募项】
10%葱硫酸铁溶液在4°C保存时，可茨用2周左
右，超葱期阻会失去KTtTt用
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5xTris 甘氨酸电泳皴冲液 5xTrisGlycine buffer CSDSPAGE电泳缓冲液丿
【组分浓度】
各种组分需称 配制不同体积所需各成分的体积(mL)或质®(g) 1000ml 15.1g 94.0g 5.0o 500ml 0」25M Tris 1.25Mglycine(甘氨酸) 0.5%(W/V)SDS 【配制方法】 称取 15.1gTris , 94.0g 甘氨酸(glycine), 5.0gSDS,用800ml蒸溜水茨去离子水溶解，充分搅 拌溶解，定容至1000ml,室温保存。得
0.125mol/L Trisl.25mol/L甘氨酸电极缓冲液。焙用前稀释5倍。
【保存条件】
室温保存，两年有玫。
【注意事项】
配制好的电泳液T更用时间不宜超过两周。
电泳缓冲液可叹回収，回收后可再便用12次,但 为T取得最隹的电泳效果，应侯用新电泳液。
5XSDSPAGE 加样缓冲液 5xSDSPAGE Loading Buffer
【组分恣度】0.25MTrisHCL(pH6.8)；
10%(W/V)SDS；
0.5%(W/V) BPB(浜酚篮)； 50%(V/V)甘油； 5%(W/V)卩號基乙醇(2ME)
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各种组分名称 配制不同体积所需各成分的体积(mL咸质虽：(g) 5 ml 3ml lMTrisHCL(pH6.8) 1.25ml SDS 0.5g 25mg BPB(浪酚蓝) 2.5ml 甘油 (0.5mL/份)分装，室温保存，使用前加25PL2ME/小份，保存一个月左右。 0.25ml B競基乙醇(2ME) 【配制方法】 量取 1.25mL lMTrisHCL fpH6.8J , 0.5g SDS, 25mg BPB,
2.5mL甘油，置于lOmL塑料离心管中， 加去离子水溶解后，定容至5mL,
小份f0.5mL/份丿 分装，于室温保存。便用前将25(.1L的2ME加入對参 小份中。加入2ME的Loading Buffer可在室温下保存 〜个戸左右。
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【保存条件】
20°C保存，至少一年有玫。
【注意事项】
SDSPAGE蚕白上样缓冲液(5X)中舍少量 DTT和號烹 乙醇，有轻微剌激
牲乞味，決须完全溶解后再废用。 摘自Takara商品目录实验室常观试剂配制方法
TEMED原液直接废用
考与斯芫蓝R250染鱼液
【组分浚度】0.1 %(w/v)考刍斯亮篮 R250, 25%(v/v) 舁丙醇，10%(v/v)那醋酸
各种组分名称 配制不同体积所需各成分的体积(mL咸质量(g) 1000ml l.Og 250ml 100ml 650ml 400ml 0.4g 100ml 40ml 260ml 备注 考马斯亮蓝R250 异丙醇 冰醋酸 去离子水 考与斯亮蓝染更脫更液 搅拌溶解，可用甲醇替代 搅拌均匀 搅拌均匀，滤纸除去颗粒物，室温 保存 名称 冰醋酸 乙醇 去离子水 用量 100ml 50ml 850ml 备注 充分混匀后使用
时间：2021.03. 08 创作：欧阳与 【组分浚度】10%(v/v)醋酸，5%(v/v)乙醇
时间：2021.03. 08 欧阳与创编
创作：欧阳与
2021.03.08
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