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分子生物学复习再次修改

来源:个人技术集锦
分子生物学:从广义来讲,分子生物学是从分子水平阐明生命现象和生物学规律的一门新兴的边缘学科。它主要对蛋白质及核酸等生物大分子结构和功能以及遗传信息的传递过程进行研究。从狭义来讲,分子生物学的范畴偏重于核酸(或基因)的分子生物生物学,主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调节控制等过程,当然其中也涉及与这些过程有关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 DNA重组技术:又称基因工程,是将DNA片段或基因在体外经人工剪接后,按照人们的设计与克隆用载体定向连接起来,转入特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达,产生影响受体细胞的新的遗传性状.

基因组:指某种生物单倍体染色体中所含有基因的总数,也就是包含个体生长、发育等一切生命活动所需的全部遗传信息的整套核酸。

功能基因组:又称后基因组,是在基因组计划的基础上建立起来的,它主要研究基因及其所编码蛋白质的结构和功能,指导人们充分准确的利用这些基因的产物。

中心法则:DNA复制把亲代的遗传信息忠实的传递给子代,子代通过转录传递给RNA,再通过翻译生成蛋白质来表现生命活动。(相关知识)

核小体:用于包装染色体的结构单位,是由DNA链缠绕一个组蛋白核构成的。 C值矛盾:物种的C值往往与它进化的复杂程度不一致,某些低等生物却具有较大的C值。

DNA的半不连续复制:DNA复制时其中一条子链的合成是连续的,而另一条子链的合成是不连续的。

DNA的半保留复制:由亲代DNA生成子代DNA时,每个新形成的子代DNA中,一条链来自亲代DNA,而另一条链则是新合成的,这种复制方式称为半保留复制。(需重点了解其实验证明,书本42页实验过程)大题!

冈崎片段:在DNA复制过程中,前导链能连续合成,而滞后链只能是断续的合成5’→3’的多个短片段,这些不连续的小片段称为冈崎片段。

转录:指拷贝出一条与DNA链序列完全相同(除了T→U之外)的RNA单链的过程

翻译:指以新生的mRNA为模板,把核苷酸三联遗传密码子翻译成氨基酸序列、合成多肽链的过程

转录单元:一段从启动子开始至终止子结束的DNA序列。

编码链:把与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链或称有意义链。 模板链:把另外一条根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链或称反义链

启动子:能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。 增强子:能强化转录起始的序列。

内含子:内含子是断裂基因线性表达的序列。DNA上的内含子会被转录到前体RNA中,但RNA上的内含子会在RNA离开细胞核进行转译前被剪除。在成熟mRNA被保留下来的基因部分被称为外显子。内含子有时也叫内显子,与外显子相对。 外显子:断裂基因中的编码序列。外显子是真核生物基因的一部分,它在剪接后仍会被保存下来,并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质。外显子是最后出现在成熟RNA中的基因序列,又称表达序列。既存在于最初的转录产物中,也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。

核酶:指本质为RNA或以RNA为主含有蛋白质辅基的一类具有催化功能的物质。 剪接:在基因操作中,酶催化使DNA裂片接合起来或是在切除内含子后将留下的mRNA连接起来。

分子伴侣:一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质,能都在细胞内辅助新生肽链正确折叠、组装、运转和降解的蛋白质。

信号肽:新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的N—末端氨基酸序列(有时不一定在N端)。

核定位序列:蛋白质的一个结构域,通常为一短的氨基酸序列,它能与入核载体相互作用,使蛋白能被运进细胞核。

组成性表达:蛋白质的合成不受环境环境变化或代谢状态的影响,始终维持在恒定水平(意义:)

适用性表达:环境的变化容易使其表达水平变动的一类基因表达(意义:) 操纵子:是基因表达的协调单位,由启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成。操纵基因收调节基因产物的控制。 弱化子:起转录终止信号的一段核苷酸序列。

反义RNA:一段非编码的小分子RNA,能与mRNA互补的RNA分子,影响mRNA的翻译过程,封闭或抑制基因的正常表达。

葡萄糖效应或降解物抑制作用

细菌培养基中在葡萄糖存在的情况下,即使加入乳糖、半乳糖等诱导物,与

其对应的操纵子也不会启动。

安慰诱导物:能够促使细菌产生酶而本身又不被分解。

早期证实DNA是遗传物质主要是哪些实验?并能写出这些实验的主要步骤。

1.下列有关TATA盒(Hognessbox)的叙述,哪个是正确的: A. 它位于第一个结构基因处

B.它和RNA聚合酶结合

C.它编码阻遏蛋白 D.它和反密码子结合 2.转录需要的原料是: dNTP B. dNDP C. dNMP

D. NTP

E . NMP

3.DNA模板链为 5’-ATTCAG-3 ’ , 其转录产物是: A. 5 ’ -GACTTA-3 ’ B. 5 ’ -CTGAAT-3 ’ C. 5 ’ -UAAGUC-3 ’

D. 5 ’ -CUGAAU-3 ’

DNA复制和转录过程有许多相同点,下列描述哪项是错误的? A.转录以DNA一条链为模板,而以DNA两条链为模板进行复制 B. 在这两个过程中合成均为5`-3`方向 C. 复制的产物通常情况下大于转录的产物

D. 两过程均需RNA引物

下面那一项不属于原核生物mRNA的特征( ) A:半衰期短 B:存在多顺反子的形式

C:5’端有帽子结构 D:3’端没有或只有较短的多聚(A)结构

6、比较RNA转录与DNA复制,下列哪些是正确的?C A.都在细胞核内进行 B.转录是连续的 C.链的延长均为5’→3’

D.与模板链的碱基配对均为G-C

7、真核细胞中的mRNA帽子结构是( )A A. 7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸

B. 7-甲基尿嘧啶核苷三磷酸 C. 7-甲基腺嘌呤核苷三磷酸 D. 7-甲基胞嘧啶核苷三磷酸

8、下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述(B ) (A)σ因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物 (B)全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物 (C)三个全酶在转录起始点形成的复合物 (D)σ因子、核心酶和促旋酶形成的复合物 9、真核细胞mRNA前体的长度由( B ) A、转录终止位点形成的茎环结构决定

B、其3‘端的聚腺苷酸化位点所决定,转录产物在此位点被切割并加上poly(A) C、在终止位点与RNA聚合酶Ⅱ结合的终止蛋白决定

D、将所有初始转录产物加工成最终长度的前mRNA的核酸外切酶决定

10、在前mRNA上加多聚腺苷酸尾巴(BD) A、涉及两步转酯机制

B、需要保守的AAUAAA序列

C、在AAUAAA序列被转录后马上开始 D、通过一个多组复合物的逐步组装进行 E、由依赖于模版的RNA聚合酶催化 11、可变剪接(BCDE)

A、与“组成型”剪接的机制完全不同

B、可以从单个基因产生多种同工蛋白,即添加或缺失少数氨基酸的变异蛋白 C、涉及不同的5’和3‘剪接位点

D、被用于在不同组织,不同的发育阶段产生不同的蛋白质 E、可以跨越外显子,也可涉及可变外显子或保留内含子 12、转酯反应(D) A、不需要ATP

B、拆开一个化学键后又形成另一化学键 C、涉及对磷酸骨架OH基团的亲核攻击 D、以上都正确

13、真核生物的mRNA加工过程中,5’端加上( 帽子结构 ),在3’端加上(多聚腺苷酸尾巴 ),后者由( poly(A)聚合酶 )催化。如果被转录基因是不连续的,那么,( 内含子 )一定要被切除,并通过( 剪接 )过程将( 外显子 )连接在一起

14、–10位的( TATA )区和–35位的( TTGACA )区是RNA聚合酶与启动子的结合位点,能与σ因子相互识别而具有很高的亲和力

15、决定基因转录基础频率的 DNA 元件是 (启动子) ,它是 ( RNA聚合酶 )的结合位点

16、原核生物 RNA 聚合酶核心酶由(2αββ′ω )组成,全酶由 ( 2αββ′ωσ )组成

17、增强子的增强效应有严密的 (是否有)组织性和细胞特异性。

18、第一类内含子的剪接,依靠 外来的鸟苷或鸟苷酸的3’-OH; 发动第一次亲核攻击。

19、第二类内含子的剪接,依靠 保守的A利用2’-OH 发动亲核攻击,使左剪接点断裂

1、证明DNA是遗传物质

的两个关键性实验是:肺炎链球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是:( C)

(a)从被感染的生物体内重新分离得到DNA,作为疾病的致病剂 (b)DNA突变导致毒性丧失

(c)生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能

(d)DNA是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子 2、1953年Watson和Crick提出:(A )

(a)多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋

(b)DNA的复制是半保留的,常常形成亲本—子代双螺旋杂合链 (c)三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 (d)遗传物质通常是DNA 而非RNA

3、下列哪一种蛋白不是组蛋白的成分( D)

(a) H1 (b) H2A 、H2B (c) H3、H4 (d) H5 4、DNA的变性:( ACDE) (a)包括双螺旋的解旋 (b)可以由低温产生 (c)是可逆的

(d)是磷酸二酯键的断裂 (e)包括氢键的断裂

5、DNA的二级结构指:( C);

(a)是指4种核苷酸的连接及其排列顺序,表示了该DNA分子的化学构成; (b)是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构; (c)是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构

6、在原核生物复制子中以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核甘酸:( C ) (A)DNA聚合酶Ⅲ (B) DNA聚合酶Ⅱ (C)DNA聚合酶Ⅰ(D)外切核酸酶MFl

7、DNA复制时不需要以下哪种酶?(B )。 (A) DNA指导的DNA聚合酶 (B) RNA指导的DNA聚合酶 (C)拓扑异构酶 (D)连接酶

8、细菌的错配修复机制可以识别复制时新旧DNA链之间错误配对的碱基,这是因为(C )

A.新DNA链含有错误的碱基

B.旧DNA链更倾向于含有错误碱基 C.旧DNA链在特殊位点含有甲基化基团 D.新DNA链在特殊位点含有甲基化基 E.DNA聚合酶与新链结合

9、使DNA超螺旋结构松驰的酶是(C )。 A.引发酶 B.解旋酶 C.拓扑异构酶 D.端粒酶 E.连接酶

真核生物中主要有五种DNA聚合酶,它们是 ① α ;② β ;③ γ ;④ δ ;⑤ ε ;

„ 真核DNA聚合酶 和 显示 3'→5' 外切核酸 酶活性。 δ ε

DNA复制时在前导链上DNA沿5’-3’方向合成,在滞后链上则沿3’-5’方向合成。( ) 核小体是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的(组蛋白 )和由大约200bp DNA组成的。八聚体在中间,DNA分子盘绕在外,而( H1)则在核小体的外面。

DNA修复包括三个步骤: DNA修复核酸酶对DNA链上不正常碱基的识别与切除, DNA聚合酶 对已切除区域的重新合成, DNA连接酶 对剩下切口的修补。„ DNA大多数自发变化都会通过称之为 DNA修复 的作用很快被校正。仅在极少情况下,DNA将变化的部分保留下来导致永久的序列变化,称为 突变

1、一个操纵子(元)通常含有 B (A) 数个启动序列和一个编码基因 (B) 一个启动序列和数个编码基因 (C) 一个启动序列和一个编码基因 (D) 两个启动序列和数个编码基因 (E) 数个启动序列和数个编码基因

2、乳糖操纵子(元)的直接诱导剂是 E (A) 葡萄糖 (B) 乳糖

(C) β一半乳糖苷酶 (D) 透酶 (E)异构乳糖

3、Lac阻遏蛋白结合乳糖操纵子(元)的 B

(A) CAP结合位点 (B) O序列 (C) P序列 (D) Z基因 (E) I基因

4、cAMP与CAP结合、CAP介导正性调节发生在 C (A) 葡萄糖及cAMP浓度极高时 (B) 没有葡萄糖及cAMP较低时 (C) 没有葡萄糖及cAMP较高时 (D) 有葡萄糖及cAMP较低时 (E) 有葡萄糖及CAMP较高时 5、Lac阻遏蛋白由 D (A) Z基因编码 (B) Y基因编码 (C) A基因编码 (D) I基因编码 (E) 以上都不是

6、Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)是指:( A )

A.在mRNA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序 B.在DNA分子上转录起始点前8-13个核苷酸处的顺序 C.16srRNA3‘端富含嘧啶的互补顺序 D.启动基因的顺序特征

7、“同工tRNA”是:( C)

(A)识别同义mRNA密码子(具有第三碱基简并性)的多个tRNA (B)识别相同密码子的多个tRNA (C)代表相同氨基酸的多个tRNA

(D)由相同的氨酰tRNA合成酶识别的多个tRNA

8、反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性(摇摆)。(A ) (A)第—个 (B)第二个 (C)第二个 (D) 第一个与第二个

9、与mRNA的GCU密码子对应的tRNA的反密码子是( B) (A)CGA (B)IGC (C)CIG (D)CGI

10、真核与原核细胞蛋白质合成的相同点是(C ) (A)翻译与转录偶联进行 (B)模板都是多顺反子 (C) 都需要GTP

(D)甲酰蛋氨酸是第一个氨基酸

A、mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子不一定严格配对 B、转肽酶 C、酯键

D、磷酸化酶 E、N-C糖甘键

11、是翻译延长所必需的B 12、遗传密码的摆动性A

第二章 染色体与DNA

复制子:从复制原点到终点,组成一个复制单位,叫复制子。

复制叉:复制时,解链酶等先将DNA的一段双链解开,形成复制点,这个复制点的形状像一个叉子,故称为复制叉。

核小体:用于包装染色体的结构单位,是由DNA链缠绕一个组蛋白核构成的。 C值反常现象:物种的C值往往与它进化的复杂程度不一致,某些低等生物却具有较大的C值。

DNA的二级结构:指两条多核苷酸链反向平行盘绕所产生的双螺旋结构。 DNA的三级结构:指DNA双螺旋进一步扭曲盘旋所形成的特定空间结构。是一种比双螺旋更高层次的空间构像。

DNA的半保留复制:由亲代DNA生成子代DNA时,每个新形成的子代DNA中,一条链来自亲代DNA,而另一条链则是新合成的,这种复制方式称为半保留复制。

不连续复制:DNA复制时其中一条子链的合成是连续的,而另一条子链的合成是不连续的,故称半不连续复制。

冈崎片段:在DNA复制过程中,前导链能连续合成,而滞后链只能是断续的合成5’→3’的多个短片段,这些不连续的小片段称为冈崎片段。

染色体与染色质的区别

答:染色体在细胞分裂间期表现为染色质。染色体与染色质是同一种物质的两种形态; 伸展的染色质形态有利于在它上面的DNA储存的信息表达,而高度螺旋化的棒状染色体则有利于细胞分裂中遗传物质的平分。

原核生物、真核生物基因组特点

1.原核生物基因组结构特点

●基因组很小,大多只有一条染色体 ●结构简练:绝大多数DNA编码蛋白质 ●存在转录单元 ●有重叠基因

2.真核生物基因组结构特点

●真核基因组结构庞大 3×109bp、染色质、核膜 ●单顺反子:一个基因编码一条多肽链或RNA链 ●基因不连续性 断裂基因、内含子、外显子 ●非编码区较多 多余编码序列(9:1) ●含有大量重复序列

核小体——组蛋白(种类、特点) 种类:H2A、H2B、H3、H4、H1 组蛋白的一般特性:

(1)进化上的保守性

保守程度:H1 → H2A、H2B → H3、H4

(不同生物组蛋白的氨基酸组成非常相似)

(2)无组织特异性:到目前为止,仅发现鸟类、鱼类及两栖类红细胞染色体不含H1而带有H5,精细胞染色体的组蛋白是鱼精蛋白(例外)

(3)肽链上AA分布的不对称性:践行氨基酸集中分布在N端的半条连上。而大部分疏水集团都分布在C端

(4)H5组蛋白的特异性:富含赖氨酸(24%),H5的磷酸化与染色质失活有关 (5)存在较普遍的修饰作用:包括甲基化、乙基化、磷酸化及ADP核糖基化等

染色体的包装过程:核小体(串联)→染色质细丝(盘绕)→螺线管(压

缩)→超螺旋(压缩)→染色体单体(具体见PPT)

DNA与RNA不同

DNA:A/G/C/T,脱氧核糖核苷酸 RNA:A/G/C/U,核糖核苷酸

与DNA复制有关的物质

1、原料:四种脱氧核苷三磷酸(dATP、dGTP、dCTP、dTTP) 2、模板:以DNA的两条链为模板,合成子代DNA 3、引物:DNA的合成需要一段RNA链作为引物

4、引物合成酶(引发酶):此酶以DNA为模板合成一段RNA,这段RNA作为合成DNA的引物。实质是以DNA为模板的RNA聚合酶 5、DNA聚合酶:以DNA为模板的DNA合成酶 ●以四种脱氧核苷酸三磷酸为底物 ●反应需要有模板的指导 ●DNA链的合成方向为5’ → 3’ ● 反应需要有3’-OH存在

6、DNA连接酶:若双链DNA中一条链有切口,一端是3’-OH,另一端是5’-磷酸基,连接酶可催化这两端形成磷酸二酯键,而使切口连接。 DNA连接酶在DNA复制、损伤修复、重组等过程中起重要作用 7、DNA拓扑异构酶

在DNA复制时,复制叉行进的前方DNA分子部分产生有正超螺旋,拓扑酶可松弛超螺旋,有利于复制叉的前进及DNA的合成

DNA复制完成后,拓扑酶又可将DNA分子引入超螺旋,使DNA缠绕、折叠, 压缩以形成染色质 8.DNA解螺旋酶/解链酶

通过水解ATP获得能量来解开双链DNA。E.coli中的rep蛋白就是解螺旋酶,还有解螺旋酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 9、单链结合蛋白

稳定已被解开的DNA单链,阻止复制性和保护单链不被核酸酶降解

分类:

右手螺旋:A-DNA, B-DNA 左手螺旋: Z-DNA

B-DNA是最常见的形式,是活性最高的DNA构象;

DNA双链中一条链被相应的RNA替换,则转变成A-DNA,其构象对基因表达有重要意义(一条链为RNA链)

Z-DNA可能与基因调控有关

原核生物、真核生物DNA聚合酶

真核生物中DNA复制的特点

DNA的修复系统;(重点在错配修复)

转座:由可移位因子介导的遗传物质重排现象 原核生物转座子的类型:

1、插入序列 2、复合转座子 3、TnA家族

真核生物转座子类型:

A.玉米中的转座子——Ac-Ds体系 B.果蝇中的转座子——P转座子

转座作用的遗传学效应

(1)转座引起插入突变 (2)转座产生新的基因 (3)转座产生的染色体畸变 (4)转座引起的生物进化

第三章 生物信息传递上

转录:指拷贝出一条与DNA链序列完全相同(除了T→U之外)的RNA单链的过程。

启动子:能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。 终止子:是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列。在一个操纵元中至少在构基因群最后一个基因的后面有一个终止子。分为强终止子和弱终止子两种。 内含子:内含子是断裂基因线性表达的序列。DNA上的内含子会被转录到前体RNA中,但RNA上的内含子会在RNA离开细胞核进行转译前被剪除。在成熟mRNA被保留下来的基因部分被称为外显子。内含子有时也叫内显子,与外显子相对。 外显子:断裂基因中的编码序列。外显子是真核生物基因的一部分,它在剪接后仍会被保存下来,并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质。外显子是最后出现在成熟RNA中的基因序列,又称表达序列。既存在于最初的转录产物中,也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。 编码链:把与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链或称有意义链。 模板链:把另外一条根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链或称反义链。

核酶:指本质为RNA或以RNA为主含有蛋白质辅基的一类具有催化功能的物质。 剪接:在基因操作中,酶催化使DNA裂片接合起来或是在切除内含子后将留下的mRNA连接起来。

转录单元:一段从启动子开始至终止子结束的DNA序列。

转录起始位点:转录的起点是指与新生RNA链第一个核苷酸相对应的DNA链上的碱基,研究表明通常为一个嘌呤(A 或G),即5’UTR的上游第一个碱基。 转录过程(了解):模板识别、转录起始、转录的延伸和终止(具体见PPT)

原核、真核转录起始环节转录复合物形成的区别?

答:对于原核生物而言,RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合。真核生物RNA聚合酶不能直接识别基因的启动区,需要一些被称为转录调节因子的辅助蛋白质按特定顺序结合于启动子上,RNA聚合酶才能与之相结合并形成复杂的前起始复合物,以保证有效的转录起始。

原核生物RNA聚合酶的组成和功能,真核生物RNA聚合酶的种类和转录产物?

答:大多数原核生物RNA聚合酶的组成是相同的,大肠杆菌RNA聚合酶由2个α亚基、一个β亚基,一个β’亚基和一个w亚基组成,称为核心酶。加上一个δ亚基后则成为聚合酶全酶。δ亚基的作用:δ因子是酶的别构效应物,通过改变酶与DNA之间的亲和力,专一性识别模板的启动子。δ因子主要是负责模板链的选择和转录的起始。核心酶的作用:一旦转录开始,δ亚基就脱离了起始复合物,由核心酶负责RNA链的延伸。

RNA聚合酶和DNA聚合酶的区别?

原核与真核生物启动子的区别?

原核生物与真核生物mRNA特征比较?

答:原核生物mRNA的特征:1、半衰期短 2、多以多顺反子的形式存在

3、5’端无帽子结构,3’端没有或只有较短的poly(A)结构

真核生物mRNA的特征:1、5’端存在帽子结构 2、多数mRNA3’端具有poly(A)尾巴(组蛋白除外) 3、以单顺反子的形式存在

加尾和加帽过程?

加帽过程:

加尾过程:需要特殊组分:含3个亚基 A、AAUAAA 准确切割和加poly(A)尾巴

强终止子和弱终止子的特点?

强终止子为不依赖ρ因子的终止,弱终止子为依赖ρ因子的终止。不依赖ρ因子的终止结构:终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区,RNA形成发夹结构,在终止位点前面有一段有4-8个A组成的序列,RNA的3’端为寡聚U。依赖ρ因子的终止结构:转录的RNA也具有发夹结构,但发夹结构后无poly(U),形成的发夹结构较疏松,茎环上不富含GC,终点需要ρ因子的参与,与不依赖ρ因子的终止一样,终止信号存在于新生的RNA链上而非DNA链上的过程。

转录和复制的异同点?

第四章:生物信息的传递(下) ——从mRNA到蛋白质

名词解释:

1、翻译:指将mRNA链上的核甘酸从一个特定的起始位点开始,按每三个核甘酸代表一个氨基酸的原则,依次合成一条多肽链的过程。

2、遗传密码子(三联子密码):mRNA链上每三个核甘酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸,这三个核甘酸就称为密码子或三联子密码。 3、同义密码子:对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子。

4、无义突变:在蛋白质的结构基因中,一个核苷酸的改变可能使代表某个氨基酸的密码子变成终止密码子(UAG、UGA、UAA),使蛋白质合成提前终止,合成无功能的或无意义的多肽,这种突变就称为无义突变。

5、错义突变:由于结构基因中某个核甘酸的变化使一种氨基酸的密码子变为另一种氨基酸的密码子,这种基因突变叫错义突变。

6、同工tRNA:代表同一种氨基酸的tRNA称为同工tRNA。同工tRNA既要有不同的反密码子以识别该氨基酸的各种同义密码,又要有某种结构上的共同性,能被相同的氨基酰-tRNA合成酶识别。

7、分子伴侣:一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质,能都在细胞内辅助新生肽链正确折叠、组装、运转和降解的蛋白质。

8、信号肽:新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移的N—末端氨基酸序列(有时不一定在N端)。

9、核定位序列:蛋白质的一个结构域,通常为一短的氨基酸序列,它能与入核载体相互作用,使蛋白能被运进细胞核。

简答题:

翻译所需要的几种物质:

核糖体、mRNA、tRNA、20种氨基酸、酶(氨酰-tRNA合成酶)、因子(起始因子、延伸因子、终止因子)、无机离子、ATP、GTP

遗传密码子的特性:

简并性、普遍性与特殊性、连续性、摆动性、密码子与反义密码子的相互作用

tRNA的特征:

1、共同特征:存在经过修饰的特殊碱基、3’端均为CCA-OH

2、高度保守二级结构:三叶草形、、受体臂(环)、TψC臂(环)、反密码子臂(环)、D臂(环)、多余臂(环)、稀有碱基

3、L形三级结构:在L形三级结构中,受体臂和T ψ C臂的杆状区域构成了第一个 双螺旋,D臂和反密码子臂的杆状区域形成了第二个双螺旋;tRNA折叠为L形,与氨基酸 结合的受体臂 与反密码环相 互远离,分别 位于两端。

原核生物与真核生物的氨酰tRNA合成酶区别:

AA-tRNA合成酶既要能识别tRNA,又要能识别氨基酸,它对两者具有高度的专一性

真核生物:起始密码子AUG所编码的氨基酸是甲硫氨酸, 起始AA-tRNA为Met-tRNAMet 原核生物:起始密码子AUG所编码的氨基酸是甲酰甲硫氨酸,起始AA-tRNA为 fMet-tRNAfMet,

原核生物与真核生物的核糖体区别:

原核生物:70S(30S+50S) 真核生物:80S(40S+60S)

核糖体亚基

细菌 70S 2.5X106d 66%RNA 1

50

rRNAs

23S=2904b 5S=120b 30S 16S=1542b

蛋白

RNA的特异顺序和功能

31 种(L1-L31)含CGAAC和GT 也 CG互补

21 种(S1-S21) 16SRNA(CCUCCU)和 S-D

哺乳动物 80S 4.2X106D 60%RNA

顺序(AGGAGG)互补

6028S=4718b 49种 有GAUC和tRNAfMat的 5S=120b 5.8S=160b

40

18S=1874b

33种

和Capm7G结合

核糖体合成中心(活性中心)

蛋白质前提加工方式;

N端fMet或Met的切除、二硫键的形成、特定氨基酸的修饰、切除新生肽链中的非功能片段

蛋白质合成抑制剂:

嘌呤霉素、链霉素、四环素、氯霉素、红霉素

蛋白质合成抑制剂的作用机制:

第五章:分子生物学研究方法——PCR 名词解释:

PCR:聚合酶链式反应,一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,又称为 基因的体外

扩增方法

荧光定量PCR:在PCR反应体系中加入荧光信号积累,实时监测整个PCR过程, 利用标准曲线对样品目的DNA(或CDNA)的起始浓度进行定量的方法

DNA重组载体条件:

1、能自主复制;

2、具有一个以上的遗传标记,便于重组体的筛选和鉴定;

3、有克隆位点(外源DNA插入点),常具有多个单一酶切位点,称为多克隆位点;

4、分子量小,以容纳较大的外源DNA

如何提高PCR反应特异性?

DNA 重组技术步骤:

目的基因的获取→克隆载体的构建→外源基因与载体的连接(体外重组)→重组DNA导入受体菌→重组体→转化子的筛选和鉴定→克隆基因的表达

第七章

组成性表达:蛋白质的合成不受环境环境变化或代谢状态的影响,始终维持在恒定水平

适用性表达:环境的变化容易使其表达水平变动的一类基因表达

操纵子:是基因表达的协调单位,由启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成。操纵基因收调节基因产物的控制。 弱化子:起转录终止信号的一段核苷酸序列。 安慰诱导物:没找到

反义RNA:一段非编码的小分子RNA,能与mRNA互补的RNA分子,影响mRNA的翻译过程,封闭或抑制基因的正常表达

葡萄糖效应或降解物抑制作用

细菌培养基中在葡萄糖存在的情况下,即使加入乳糖、半乳糖等诱导物,与

其对应的操纵子也不会启动。

乳糖操纵子的调控模型

1、Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码

2、这个mRNA分子的启动子紧接着O区,而位于I与O之间的启动子区(P),不能单独启动合成β-半乳糖苷酶和透过酶的生理过程

3、操纵基因是DNA上的一小段序列(仅为26bp),是阻遏物的结合位点

4、当阻遏物与操纵基因结合时,lac mRNA的转录起始受到抑制

5、诱导物通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之不能与操纵基因结合,激发lac mRNA的合成。当有诱导物存在时,操纵基因区没有被阻遏物占据,启动子能够顺利起始mRNA的合成。

环磷酸腺苷、正调控与葡萄糖关系

色氨酸阻遏类型机制:

阻遏系统(粗调)

trpR基因的产物是阻遏蛋白,色氨酸是辅阻遏物,低trp时阻遏物不结合操纵基因,高trp时阻遏物结合操纵基因。 弱化调节机制(细调)

通过前导肽基因的翻译来调节色氨酸操纵子转录的终止,色氨酸浓度低时转录。高时转录终止

半乳糖操纵子(双向功能)

阿拉伯糖操纵子

第八章

单顺反子:只编码一个蛋白质的mRNA称为单顺反子mRNA。

多顺反子:有些mRNA的编码区可生成多个不同的蛋白质,称为多顺反子mRNA. 反式作用因子:是能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上,参与调控靶基因转录效率的蛋白质。

顺式作用因子:真核生物启动子和增强子是由若干DNA序列元件组成的,由于它们常与特定的功能基因连锁在一起,因此被称为顺式作用元件,这些序列组成基因转录的调控区,影响基因的表达。

断裂基因:在一个结构基因中,编码某一个蛋白质不同区域的各个外显子并不连续排列在一起,被内含子隔离,形成镶嵌排列的断裂方式,所以真核基因能常被称为断裂基因。

假基因:是基因组中因突变而失活的基因,无蛋白质产物往往存在于真核生物的多基因家族中,常用ψ表示一般启动子出现问题。

沉默子:能够对基因转录起阻遏作用的DNA片段,属于负性调控元件。 增强子:是一个顺式作用序列,能使和它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列,能够在启动子任何方向以及任何位置(上游或下游)作用。

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