例如，我们需要小鼠型蛋白Myrip，首先从文献中找到表达此蛋白的组织，从小鼠身上提取组织裂解等，得到总DNA后，使用设计的primer，进行RT-PCR，以下重点记录，如何设计此类primer
打开NCBI网页，最下，选择primer blast
打开页面如下：
然后在NCBI网页上查找你的目的蛋白基因序列，注意是house mouse，在mRNA和protein的选项中打开，如下
打开后，看到
把编码（阴影）输入到primer blast页面中，点击最下面的blast 会出现以下页面：
然后根据位置，选择primer，primer选择在ORF区域，并且需要在blast所选primer，是否有其他蛋白与之重合。
在NCBI网页最下面，选择blast选项打卡网页，输入blast的序列 最后确定是否是唯一的primer。
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